Abstract

O SOX9 fator de transcrição desempenha um papel crucial no desenvolvimento normal da próstata e tem sido sugerido para conduzir próstata carcinogênese em conjunto com PTEN inativação. Para avaliar o impacto clínico da SOX9 e sua relação com alterações genômicas chave no cancro da próstata, expressão SOX9 foi analisada por imuno-histoquímica em um tissue microarray contendo 11.152 cancros da próstata. Dados sobre o estado ERG e deleções de

PTEN

, 3p13, 5q21 e 6q15 estavam disponíveis a partir de estudos anteriores. Os níveis de expressão SOX9 eram comparáveis ​​em células luminais de glândulas prostáticas normais (50% SOX9 positivo) e 3.671 cancros falta TMPRSS2: ERG (55% SOX9 positivo), mas foi significativamente aumentada em cancros positivos 3116 ERG-fusão (81% SOX9 positivo, p 0,0001). Embora sem alterações inequívocas nos níveis de expressão SOX9 foram encontrados em diferentes estágios de câncer ERG-negativos, uma redução gradual da SOX9 paralelo progressão para fase avançada, alto grau de Gleason, o crescimento metastático, ea presença de deleções PTEN no ERG positivo cancros (p 0,0001 cada). níveis SOX9 não estavam relacionados com deleções de 3p, 5q e 6q. Down-regulação da expressão SOX9 foi particularmente fortemente associada com recorrência PSA no ERG positivo tumores abrigando PTEN deleções (p = 0,001), mas não teve efeito significativo em cancros ERG-negativos ou em tumores com número de cópias PTEN normais. Em resumo, os resultados do nosso estudo argumentar contra um papel de promoção do tumor de SOX9 no câncer de próstata, mas demonstram que a perda de expressão SOX9 caracteriza um subconjunto particularmente agressivo dos cancros positivos ERG abrigando eliminações PTEN

Citation:. Burdelski C, E Bujupi, Tsourlakis MC, Hube-Magg C, H Kluth, Melling, N. et al. (2015) Perda de SOX9 expressão é associado à recidiva PSA no ERG-positivas e PTEN Deleted próstata. PLoS ONE 10 (6): e0128525. doi: 10.1371 /journal.pone.0128525

Editor do Academic: Zoran Culig, Innsbruck Medical University, ÁUSTRIA

Recebido: 19 de fevereiro de 2015; Aceito: 29 de abril de 2015; Publicação: 01 de junho de 2015

Direitos de autor: © 2015 Burdelski et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Disponibilidade de dados: Todos os dados relevantes estão dentro do papel e seus arquivos de suporte de informação

financiamento:.. os autores não têm apoio ou financiamento para relatar

Conflito de interesses:. os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

o câncer de próstata é o câncer mais prevalente em homens nas sociedades ocidentais [1]. Enquanto a maioria dos tumores têm um curso clínico em vez indolente, o câncer de próstata ainda representa a terceira causa mais comum de morte relacionada com cancro nos homens. parâmetros prognósticos estabelecidos são Gleason grau, extensão do tumor nas biópsias, antígeno específico da próstata pré-operatório (PSA), e estágio clínico. Embora estatisticamente poderosos, eles não são suficientes para as decisões individuais de tratamento ideais. Espera-se que uma melhor compreensão da biologia da doença irá eventualmente conduzir à identificação de marcadores moleculares clinicamente aplicáveis ​​que permitem uma previsão mais fiável da agressividade do cancro da próstata em pacientes individuais.

SOX9 pertence à SOX (SRY-relacionada HMG box) família de fatores de transcrição de desenvolvimento (revisto em [2]). É essencial para processos de desenvolvimento que envolvem a determinação do sexo (revisto em [3]), o desenvolvimento da cartilagem [4], gliogenesis [5], CARDIOGENESIS [6], a formação ouvido interno [7], a formação do compartimento de células estaminais cabelo [8] , progenitor manutenção da piscina de células no pâncreas [9] e organogênese da próstata [10]. Aqui, SOX9 é um dos primeiros factores de transcrição expressados ​​na próstata primordial [10]. Na próstata adulto, expressão SOX9 é fortemente expresso nas células basais [11,12], onde tem um papel importante para a manutenção da função normal da próstata [11,13]. Várias linhas de evidência existentes que SOX9 pode também contribuir para a iniciação do cancro da próstata e progressão, incluindo sobre-regulação durante as fases iniciais de neoplasia da próstata em modelos de rato [14], bem como nas neoplasias intraepiteliais prostáticas humanas (PIN) [10] e da próstata cancros [10,11] [14-17]. Alguns desses estudos sobre 98-387 pacientes também têm ligado SOX9 superexpressão de alto grau e tumores avançados [10,14,15,17], hormônio-refratário estado de doença [15] ou pobre prognóstico do paciente [14,15,17] .

os resultados promissores desses estudos obtidos em conjuntos limitados de pacientes nos levou a avaliar melhor o possível impacto clínico de SOX9 no câncer de próstata. Para este efeito, aproveitamos nossa tissue microarray preexistente contendo 11.000 espécimes de cancro da próstata com acompanhamento clínico e banco de dados molecular anexado. Os resultados do nosso estudo demonstram que a diminuição, e não elevado, a expressão da proteína SOX9 está ligada ao mau prognóstico e que este efeito é estritamente limitado ao subconjunto dos cancros da próstata que abrigam eliminações PTEN.

Materiais e Métodos

os pacientes

espécimes prostatectomia radical foram disponível a partir de 11.152 pacientes, submetidos a cirurgia entre 1992 e 2011 no Departamento de Urologia e as Clínicas de Martini na Universidade Medical Center Hamburg-Eppendorf. dados de acompanhamento estavam disponíveis para um total de 9.695 pacientes com um seguimento médio de 31,2 meses (intervalo: 0,3 a 228 meses; Tabela 1). Gleason peneiração foi realizado de acordo com critérios resumidos na classificação 2004 Organização Mundial de Saúde (OMS) de cancros genito-urinário [18]. valores de antigénio específico da próstata (PSA) foram medidos e o PSA cirurgia seguinte recorrência foi definido como o ponto no tempo quando o PSA pós-operatório foi, pelo menos, 0,2 ng /ml e aumentando em medições subsequentes. Todos os espécimes de próstata foram analisados ​​de acordo com um procedimento padrão, incluindo uma incorporação completa de toda a próstata para análise histológica [19]. O processo de fabricação de TMA foi anteriormente descrito em detalhe [20]. Em suma, um núcleo 0,6 milímetros foi feita a partir de um bloco de tecido representativo de cada paciente. Os tecidos foram distribuídos entre 24 blocos de TMA, contendo cada um 144 a 522 amostras de tumor. Para controles internos, cada bloco TMA também continha vários tecidos de controlo, incluindo o tecido da próstata normal. O banco de dados molecular ligada a este TMA continha resultados sobre a expressão ERG em 9619 [21],

ERG

quebrar análise FISH em 6106 (expandido a partir de [21]) e estado de exclusão de 5q21 (

CHD1)

em 7222 (expandido a partir de [22]), 6q15 (

MAP3K7)

em 3523 (expandido a partir de [23]),

PTEN

(10q23) em 6109 (expandido a partir de [24] ) e 3p13 (

FOXP1)

em 6410 (expandido a partir de [25]) cancros.

declaração Ética

O uso de tecidos sobras de diagnóstico arquivados para fabricação de microarrays de tecido e sua análise para fins de investigação, bem como a análise dos dados do paciente tenha sido aprovado pelas leis locais (HmbKHG, §12,1) e pelo comitê de ética local (Comissão de ética Ärztekammer Hamburgo, WF-049/09 e PV3652) . De acordo com as leis locais, o consentimento informado não foi necessário para este estudo. registros de pacientes /informação foi anónimos e de-identificados antes da análise. Todo o trabalho foi realizado em conformidade com a Declaração de Helsinki.

Imunohistoquímica

seções TMA Corte recentemente foram imunocoradas em um dia e em um experimento. As lâminas foram de-encerado e exposto a calor induzido por recuperação de antigénios por 5 minutos numa autoclave a 121 ° C em pH 9 Dako alvo Retrieval Solution. O anticorpo primário específico para SOX9 (anticorpo monoclonal de ratinho (clone 3C10), Abnova, Taipei, Taiwan; cat # H00006662-M02; diluição 1: 700) foi aplicada a 37 ° C durante 60 minutos. O anticorpo ligado foi então visualizadas utilizando o kit EnVision (Dako, Glostrup, Dinamarca) de acordo com as instruções MANUFACTURER’S. Se presente, a coloração SOX9 foi tipicamente homogénea nos núcleos de todas as células do cancro das manchas de tecidos. A percentagem de células tumorais positivas (tipicamente 100%), portanto, não foi gravado separadamente. coloração citoplasmática fraca, que acompanhou coloração nuclear na maioria dos pontos de tecido, foi atribuída a coloração não específica e não considerado para a análise. intensidade de coloração nuclear de todos os casos foi semiquantitativa avaliada em quatro categorias:. negativos, fracas, moderadas e fortes

Estatísticas

Os cálculos estatísticos foram realizados com o software JMP 9 (SAS Institute Inc., NC, EUA). tabelas de contingência e o

2-teste do qui foram aplicados para procurar associações entre parâmetros moleculares e fenótipo tumoral. As curvas de sobrevida foram calculadas de acordo com Kaplan-Meier. O teste Log-Rank foi aplicado para detectar diferenças significativas entre os grupos. Cox análise de regressão de riscos proporcionais foi realizada para testar a independência estatística e significância entre variáveis ​​patológicas, moleculares e clínicos.

Resultados

Aspectos técnicos

Um total de 3.587 dos 11.152 ( 32%) amostras de tecido foram não informativo. Três secções de TMA compreendendo 1.271 amostras foram excluídos da análise porque de qualidade insuficiente de coloração. Estas três secções não foram re-corados a fim de evitar uma polarização intensidade de coloração que pode ocorrer quando os ensaios IHC são repetidos em dias diferentes. Em outros 2.316 pontos de tecido, nenhum resultado IHC foi obtida devido à completa falta de tecido ou ausência de células cancerosas inequívocos.

SOX9 no cancro da próstata

expressão SOX9 Nuclear era tipicamente forte em células basais de glândulas prostáticas normais. Em células normais luminais, moderada a forte coloração foi encontrada em cerca de 50% dos casos analisados. No cancro da próstata, SOX9 expressão nuclear foi observada em 67% dos casos 7.565 interpretáveis. coloração SOX9 detectável foi considerado fraco em 15%, moderada em 39% e forte em 13% dos casos. Exemplos de manchas de tecidos com níveis variáveis ​​de imunocoloração SOX9 são mostradas na Fig 1.

(a) negativa, (b) fraca, (c) moderada, (d) forte.

associação com o estado ERG

os dados em ambos coloração SOX9 interpretável e estado ERG foram disponível a partir de 7.565 tumores se o status ERG foi determinada por análise IHC e de 4.454 tumores se ERG rearranjo foi analisado por FISH. coloração SOX9 foi fortemente ligadas a cânceres ERG-positivos, independentemente de se o estado ERG foi analisada por IHC ou FISH: Expressão SOX9 foi encontrado em 82% dos ERG IHC-positivas e 83% do ERG cancros reorganizados-peixe, mas apenas em 55% do ERG IHC-negativo e 62% dos cânceres ERG PEIXES-normal (p 0,0001 cada, Fig 2).

IHC = imuno-histoquímica; FISH = Fluorescência hibridização in-situ.

A associação com outras alterações genômicas chave

Estudos anteriores têm fornecido evidências para os subgrupos moleculares distintos e clinicamente relevantes de cancros da próstata definidos por rearranjos de genes e várias deleções genómicas. Outros e nos descreveu uma forte ligação entre o PTEN, 3p13 supressões e ERG positividade, e entre 5q21, exclusões 6q15 e ERG negatividade [22-24,26-28]. Para estudar se a expressão SOX9 pode estar ligado a qualquer uma destas alterações, os dados SOX9 foram comparados com preexistente conclusões sobre eliminações de PTEN, 3p13, 6q15 e 5q21. Na análise de todos os tumores, coloração SOX9 foi associado positivamente com deleções de PTEN (p 0,0001) e 3p13 (p = 0,001) e negativamente associados com deleções de 6q15 (p = 0,0002) e 5q21 (p 0,0001, Fig 3A) . Isto era esperado, porque todas estas supressões-como como SOX9-são conhecidos por ser fortemente ligado ao status ERG. Com efeito, quando estratificados por subconjuntos de cancros positivos e negativos do ERG-fusão, a maior parte da associação desapareceu. No entanto, para PTEN, a análise separada dos cancros ERG-positivos e ERG-negativos revelou uma relação bimodal impressionante com expressão SOX9. eliminações PTEN foram positivamente associados com a expressão SOX9 no ERG-negativo (p 0,0001, Fig 3B), mas inversamente ligada à expressão SOX9 no ERG positivo cancros (p 0,0001, Fig 3C).

(a) todos cancros, (b) no ERG-negativos, c) subconjunto ERG positivo.

Relacionamento com fenótipo tumoral

expressão SOX9 reduzida foi ligado a um fenótipo tumoral desfavorável, incluindo fase tardia , alto grau de Gleason, e os níveis de PSA pré-operatórios elevados (p 0,0001 cada, Tabela 2) em todos os cancros. No entanto, análises separadas de cânceres ERG-positivos e ERG-negativos revelou que esta associação foi apenas conduzido pelo subgrupo de cancros ERG-positivos. Aqui, a expressão reduzida SOX9 foi fortemente ligada ao estágio do tumor avançado, alto grau de Gleason, níveis elevados de PSA pré-operatório, a presença de metástases (p 0,0001 cada) e margem cirúrgica positiva (p = 0,001) (Tabela 3). Em contraste, não foram encontradas diferenças entre os níveis inequívocos SOX9 e fenótipo tumor em cancros ERG-negativos, embora os valores de p significativos ainda foram obtidos devido ao elevado número de amostras em nosso estudo (S1 Tabela).

Relacionamento com PSA recorrência

o valor prognóstico da expressão SOX9 dependia do status de ERG. SOX9 expressão reduzida ou ausente foi fortemente ligada a bioquímica (PSA) recorrência no subconjunto de cancros ERG-positivos (p 0,0001, figura 4A), mas não em cancros do ERG-negativos (p = 0,80, Figura 4B). Porque a expressão SOX9 foi ligado ao estatuto PTEN, que também comparou o impacto prognóstico da SOX9 em cancros com e sem exclusões PTEN. Esta análise revelou que a perda de expressão SOX9 foi fortemente ligada à recorrência PSA em cancros deleted-PTEN (p = 0,008, Fig 4C), mas apenas fracamente em cancros com PTEN normal de copiar números (p = 0,02, Fig 4D). A associação mais forte entre a perda de SOX9 e pior prognóstico foi encontrado no subgrupo de cancros que abrigam tanto ERG-fusion e PTEN eliminação (p = 0,001, Fig 4E), enquanto SOX9 não estava relacionado com o prognóstico em cancros ERG-positivos e ERG-negativos com estatuto PTEN normal (p = 0,56 e p = 0,73; Fig 4G e 4F) ou em cancros ERG-negativas com PTEN eliminação (p = 0,27; Fig 4H).

(a) ERG-positivo (ERG

+) cancros (n = 2.906), (b) ERG-negativo (ERG

-) cancros (n = 3.407), (c)

PTEN

excluídos (PTEN

del) cancros (n = 771), (d)

PTEN

não-excluídos (PTEN

norm) cancros (n = 3.367), (e) ERG-positivas e

PTEN

cancros excluídos ( n = 512), (f) ERG-negativo e

PTEN

cancros não excluídos (n = 1.859), (g) ERG-positivas e

PTEN

cânceres não-excluídos (1.391) , (h) ERG-negativo e

PTEN

cancros excluídos (n = 238). Uma lista detalhada do número de pacientes em risco é dado para (a) e (b) no S3 Tabela.

A análise multivariada

A fim de avaliar se o impacto clínico da expressão SOX9 no ERG positivo cânceres abrigando eliminações PTEN foi independente de parâmetros prognósticos estabelecidos, realizamos quatro diferentes tipos de análises multivariadas Cenário 1 avaliação de todos os parâmetros disponíveis de pós-operatório, incluindo estágio patológico do tumor, patológica estado dos linfonodos (pN), status da margem cirúrgica, pré-operatório valor de PSA e grau Gleason patológica obtida após a avaliação morfológica de toda a próstata ressecados. No cenário 2, foram incluídos todos os parâmetros de pós-operatório disponíveis com exceção do estado nodal. O racional para esta abordagem foi a de que a indicação e extensão da dissecção de linfonodos não é padronizado no tratamento cirúrgico do câncer de próstata e que a exclusão pN na análise multivariada pode aumentar significativamente o número de casos. Dois cenários adicionais teve a finalidade de modelar a situação pré-operatória, tanto quanto possível. Cenário 3 incluídos expressão SOX9, PSA pré-operatório, o estágio do tumor clínico (fase TC) e grau de Gleason obtido na amostra de prostatectomia. Dado que a determinação pós-operatório de grau Gleason de um tumor é “melhor” do que o grau de Gleason pré-operatório determinada (sujeito a erros de amostragem e, consequentemente, sub-graduação em mais de um terço dos casos [29]), foi adicionada uma outra análise multivariada. No cenário 4, o grau de Gleason pré-operatório obtido na biópsia inicial foi combinado com PSA pré-operatório, estágio cT e expressão SOX9. Esta análise, que foi limitado ao subconjunto de cancros ERG-positivas e excluídos-PTEN onde SOX9 tiveram forte impacto prognóstico na análise univariada, revelou que o valor prognóstico da SOX9 não era independente dos prognosticadores estabelecidos (S2 tabela).

Discussão

os resultados do nosso estudo mostram que a relevância clínica dos níveis de expressão SOX9 existe no câncer de próstata que depende muito do contexto molecular das células tumorais. Em particular, os nossos dados demonstram que a relevância prognóstico da expressão SOX9 é estritamente limitada ao subconjunto de ERG positivo tumores abrigando eliminações PTEN.

A fração de cancros com expressão SOX9 detectável neste estudo foi de 67%, incluindo 51% com moderada a forte coloração. Esses números estão na faixa superior de estudos de imunohistoquímica anteriores relatórios cancros positivos 41-55% SOX9 por análise de grande parte convencional envolvendo até 36 tumores [11,16], ou de estudos TMA relatórios 46-100% de positividade SOX9 em até 387 cancros da próstata [10,14,17]. É mais provável que estas diferenças são antes de tudo relacionado a problemas técnicos, incluindo o uso de diferentes anticorpos e critérios de pontuação. Que as fracções comparáveis ​​de cancros SOX9 positivos podem ser encontrados tanto com grande seção e TMA aproxima sugere que nossa análise forneceu dados representativos, que não são marcadamente influenciados por amostragem questões de erro que podem potencialmente ocorrer em estudos que avaliaram a pequenos núcleos de tecido medindo apenas 0,6 mm de diâmetro por paciente.

A análise bem sucedida de mais de 7.500 cancros da próstata não fez-nos um levantamento geral sobre todos os tumores de revelar associações relevantes de um aumento da expressão SOX9 com o fenótipo tumoral desfavorável ou pobre prognóstico do paciente como sugerido por obras anteriores [10,14,15,17]. Vários estudos envolvendo 98-387 cânceres já havia sugerido uma ligação entre a expressão SOX9 e características tumorais pobres, como o alto grau de Gleason [10,14,15,17] e até mesmo menor sobrevida global [14]. Em contraste, os nossos dados revelaram um melhor resultado do paciente em caso de níveis de expressão alta SOX9 em subgrupos. De acordo com os nossos achados, Zhong et al. demonstrar um intervalo livre de recidiva prolongados de para tumores com níveis elevados SOX9 em uma coorte de 147 pacientes [15].

A base de dados molecular anexado ao nosso cancro da próstata TMA permitiu uma avaliação da relação entre a expressão SOX9 e outra tecla características moleculares do câncer de próstata. Cerca de 50% dos cancros da próstata são caracterizados pela fusão TMPRSS2: ERG, o que resulta em sobre-expressão do factor de transcrição ERG e alterações transcricionais maciças [30]. Desde ERG regula o receptor de andrógeno (AR) SOX9 responde indiretamente pela funcionando como um fator pioneiro para abrir um potenciador regulamentada-AR enigmática no gene SOX9 (24.985.976) [31], não foi surpreendente encontrar uma forte ligação entre o ERG -fusion genótipo positiva e expressão SOX9 forte. A inclusão de dados de exclusão de múltiplos loci cromossômica revelou ainda, que a relação de SOX9 e expressão ERG em grande parte dependia ou não uma eliminação PTEN estava presente em um tumor. Além disso, os dados demonstraram uma doença resultado surpreendentemente pobre em um subgrupo de 101 pacientes com ERG, cancros PTEN suprimido positivas com expressão SOX9 ausente. Estes achados sugerem interações fortes e clinicamente relevantes entre estas proteínas. A relação funcional de PTEN e SOX9 é realmente apoiado por dois estudos utilizando modelos do rato do cancro da próstata [14,16]. Estes estudos sugeriram um papel cooperativa de SOX9 e perda de PTEN para a formação de tumor da próstata [14], através da inibição, dependente da SOX9 do supressor do retinoblastoma (RB1) do tumor [16], a fim de contornar a senescência celular induzida por perda de PTEN [32]. Tal papel cooperativa se encaixa bem para a nossa observação de que a expressão SOX9 estava ligada a PTEN eliminação, pelo menos, no subgrupo de cancros falta de fusão ERG.

No entanto, a associação inversa entre a perda da superexpressão SOX9 e PTEN exclusão encontrados em ERG cancros -positivas indica que níveis muito altos-como proteína SOX9 induzidas pelo ERG-fusion-talvez não, por si só fornecer uma vantagem de seleção para as células cancerosas deleted-PTEN. Além disso, uma vez que a progressão para doença de alto grau foi acompanhada por uma redução de expressão SOX9 em cancros do ERG-positivas, muito forte sobre-expressão SOX9 pode até neutralizar o crescimento do tumor. Isso poderia ser mecanicamente explicados através de efeitos antagônicos em vias reguladas por ambos ERG e SOX9. Por exemplo, enquanto ERG activa canónica SS-catenina /sinalização Wnt [33,34], SOX9 contribui para a comutação entre promotoras de crescimento e de diferenciação de iniciação consequências desta via [35,36]. É, assim, tentador especular que a sobre-expressão forte SOX9 inibe a progressão através da diferenciação forçado, e que ERG positivo células cancerosas, por conseguinte, precisa de sofrer passos de adaptação para ajustar expressão SOX9 a um nível que é compatível com a progressão do tumor. Desde a pior prognóstico foi encontrado para tumores suprimidos-PTEN e ERG-positivas que careciam completamente qualquer expressão detectável SOX9, SOX9 pode até prejudicar o crescimento tumoral nesse fundo molecular específico. Tal papel crucial do ambiente molecular sobre a actividade de promoção tumoral ou tumor-supressor de SOX9 é também suportada pela linha de células e as experiências de xenoenxerto que mostram que a sobreexpressão SOX9 pode levar a crescimento de tumor melhorada e invasão em algumas linhas de células [13], mas a reduzida tumorigenicidade em outros [37].

Notavelmente, nossos dados sugerem que SOX9 pode fornecer informação prognóstica adicional substancial para além PTEN supressão-um dos mais fortes prognosticadores conhecido único no câncer de próstata, mas ao mesmo tempo também demonstram que o valor de SOX9 como um marcador molecular putativa é limitada ao pequeno subconjunto de cerca de 10-15% dos cancros da próstata albergando tanto ERG-fusão e PTEN eliminação. SOX9 é assim um exemplo interessante para possivelmente muitos mais genes que podem exercer qualquer um tumor ou uma promoção de acção supressora do tumor de acordo com o andaime molecular particular na sequência de combinações específicas de alterações genómicas em células de cancro da próstata [33,34,38]. Tais observações desafiar o conceito de testes prognósticos multiparâmetros geralmente aplicáveis ​​que geram uma pontuação prognóstico simples com um impacto semelhante em todos os tipos de câncer.

Em resumo, os resultados do nosso estudo demonstram que SOX9 é expressa em uma grande fração da próstata cancros, mas tem um impacto prognóstico variável dependendo do ambiente molecular. A limitação marcante do impacto prognóstico de perda SOX9 ao subconjunto de cancros ERG-positivos com deleções PTEN fornece mais provas para a existência de subgrupos distintos molecularmente clinicamente relevantes de cancros da próstata.

Informações de Apoio

Tabela S1 . Clinico-patológico associação de imunocoloração SOX9 no subconjunto ERG negativo

doi:. 10.1371 /journal.pone.0128525.s001

(DOC)

S2 Table. A análise multivariada incluindo o estado de expressão SOX9 no ERG-positivas e PTEN suprimido cancros da próstata

doi:. 10.1371 /journal.pone.0128525.s002

(DOC)

S3 Tabela. Número de pacientes em risco de recorrência bioquímica em cancros positivos ERG-negativas e ERG

doi: 10.1371. /Journal.pone.0128525.s003

(XLS)

Reconhecimentos

Agradecemos Janett Lüttgens, Sünje Seekamp e Inge Brandt pela excelente assistência técnica.