Sumário

malignidade é um problema grave em doentes tratados com agentes imunossupressores. Nós demonstramos que o tratamento com os inibidores de calcineurina (CNIS) pode induzir a activação de Ras proto-oncogénica, e pode promover uma rápida progressão do cancro renal humano, através da sobre-expressão do factor de crescimento endotelial vascular (VEGF). Curiosamente, verificou-se que a sobre-expressão de VEGF e a proliferação de células de cancro induzido por CNI foi inibida por rapamicina tratamento, indicando o envolvimento potencial do alvo da rapamicina em mamíferos (mTOR) via neste processo tumorigénico. Aqui, nós examinamos o papel de mTOR na mediação da sobre-expressão induzida por Ras e CNI- de VEGF em células de cancro renal humano (786-0 e Caki-1). Descobrimos que o knockdown de rapina (utilizando siARN) diminuiu significativamente a actividade do promotor VEGF induzida por CNI como observada por ensaio de promotor-luciferase, sugerindo o papel de mTOR complex1 (mTORC1) na transcrição de VEGF induzida por CNI. Sabe-se que mTOR torna-se activa a seguir a fosforilação da sua PRAS40 regulador negativo, que é uma parte de mTORC1. Observou-se que o tratamento CNI e activação de H-Ras (através de transfecção de um plasmídeo de H-Ras activo) aumentou marcadamente a fosforilação de PRAS40, e a transfecção de células utilizando um plasmídeo negativo dominante de Ras, diminuiu significativamente PRAS40 fosforilação. A proteína quinase C (PKC), PKC–ζ e δ, que são moléculas intermediário crítico para via tumorigénico induzida por CNI, complexo formado com PRAS40 sinalização; e verificou-se que o tratamento CNI aumentou a formação de complexos entre PRAS40 PKC e, em particular (PKC) -ζ. A inibição da actividade de PKC utilizando inibidor farmacológico diminuiu marcadamente a fosforilação induzida por H-Ras de PRAS40. A superexpressão de PRAS40 em células de cancro renal significativamente regulada VEGF activação da transcrição induzida por H-Ras CNI- e. Finalmente, observou-se que o tratamento CNI aumentou a expressão de phosho-PRAS40 em tecidos de tumor renal

in vivo

. Juntos, a fosforilação de PRAS40 é crítico para a activação de mTOR em sobre-expressão de VEGF induzida por CNI e progressão do cancro renal

citação:. Um Basu, Banerjee P, Contreras AG, Flynn E, S Pal (2011) calcineurina inibidor-induzida e Ras-Mediated superexpressão de VEGF em células de cancro renal envolve mTOR através do Regulamento de PRAS40. PLoS ONE 6 (8): e23919. doi: 10.