Abstract

Fundo

As citocinas e quimiocinas no desenvolvimento metastático tumor unidade microambiente e seus níveis séricos pode espelhar o inflamatória em curso reacção no local do tumor. Novas ferramentas altamente sensíveis são necessários para identificar pacientes com câncer colorretal em alto risco de recorrência que devem ser acompanhados mais de perto durante a pós-cirúrgica acompanhamento. Aqui nós estudar se circulam marcadores inflamatórios pode ser usado para prever recorrência em pacientes com CCR.

Métodos

Os níveis circulantes de citocinas inflamatórias IL-1, IL-6, IL-10, TNF-alfa, CCL2, CXCL8, VEGF e proteína de fase aguda pentraxina-3 foram medidos por ELISA em amostras de soro pré-operatórios coletados prospectivamente a partir de uma coorte de sessenta e nove pacientes submetidos à ressecção cirúrgica para a fase 0-IV CRC e associados com a recorrência da doença pós-operatório.

resultados

Cox análise multivariada mostrou que níveis elevados combinados (≥ROC cortou-value) de CXCL8, VEGF e Pentraxin3 foram associados ao aumento do risco de recorrência da doença [HR: 14,28; IC 95%: (3,13-65,1)] independentemente do estadiamento TNM. A análise de Kaplan-Meier mostraram que os níveis Pentraxin3 CXCL8, VEGF e foram significativamente associados com pior sobrevida (P 0,001).

Conclusões

Circulação mediadores inflamatórios eficiente previu recidiva pós-operatória após a cirurgia CRC. Portanto, este estudo sugere que a sua validação em ensaios clínicos em larga escala pode ajudar na adaptação de gestão CRC pós-cirúrgica

Citation:. Di Caro G, Carvello M, Pesce S, Erreni M, Marchesi F, J Todoric , et ai. (2016) de mediadores inflamatórios circulantes como potenciais marcadores prognósticos de câncer colorretal humano. PLoS ONE 11 (2): e0148186. doi: 10.1371 /journal.pone.0148186

editor: Ken-ichi Mukaisho, Universidade Shiga de Ciência Médica, JAPÃO

Recebido: 21 Setembro, 2015; Aceito: 14 de janeiro de 2016; Publicação: 09 de fevereiro de 2016

Direitos de autor: © 2016 Di Caro et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Data Availability:. Todos relevante os dados estão dentro do papel e seu arquivo de Informações de Suporte

Financiamento:. o trabalho foi apoiado por 16230 Associazione Italiana per la ricerca sul Câncer de GDC. O financiador não teve nenhum papel no desenho do estudo, recolha e análise de dados, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

O câncer colorretal (CRC) é uma das principais causas de morte por câncer nos países desenvolvidos [1]. Apesar dos avanços nos testes de diagnóstico e procedimentos cirúrgicos que geralmente têm intenção curativa, cerca de metade dos pacientes submetidos à cirurgia para CRC com intenção curativa vai experimentar metástase metacrônica e consequente morte [2]. Até à data patológica Sistema Tumor Nodal metástase (TNM) continua a ser o ponto de referência para a previsão de pacientes de CRC que vai experimentar a progressão da doença, apesar do núcleo do sistema Dukes original [3] é substancialmente inalterado. Na verdade, o estadiamento histopatológico carece de precisão e uma percentagem significativa de doentes em maior risco de recorrência da doença ainda não são detectados com esta metodologia [2] [4]. biomarcadores de prognóstico novela de CRC iria permitir a identificação do subgrupo de pacientes com alto risco de reincidência do tumor que deve ser considerado para a vigilância freqüente, triagem diagnóstica e intervenção terapêutica.

Tem sido bem estabelecido que as células inflamatórias no microambiente do tumor libertar mediadores inflamatórios que por sua vez activam as redes locais imunes para promover o desenvolvimento e o crescimento de células malignas, aumentando a sua proliferação e sobrevivência, bem como a angiogénese [5] [6] [7-9]. Além disso, mediadores inflamatórios, isto é, as quimiocinas em conjunto com factores angiogénicos são um gatilho para o desenvolvimento de capacidades invasivas à medida que aumentam as células tumorais motilidade e migração que resulta finalmente em ocorrência metastático [8]. A interligação entre a inflamação e a angiogénese é explicado pela capacidade de VEGF e quimiocina, tais como CCL2 e CXCL8 para recrutar leucócitos no local do tumor, que por sua vez produzem VEGF e mediadores inflamatórios e, portanto, amplificar o sinal tumorigénico através de um loop autócrino e parácrino [8]. Quimiocinas e citocinas são amplamente produzida no microambiente tumoral, independentemente dos gatilhos iniciais [8] e de mediadores, tais como a IL-1B, TNF e IL-6 promoveu directamente a progressão tumoral em modelos experimentais de cancro colo-rectal [8, 10].

os mediadores inflamatórios detectados no soro de pacientes pode espelhar a reação inflamatória em curso no local do tumor. Consistentemente, estudos populacionais mostraram que indivíduos com altos níveis circulantes de mediadores inflamatórios estão em maior risco de desenvolver CRC [11] [12, 13]. Assim, os níveis séricos destes marcadores têm o potencial para se tornar um paradigma como testes de diagnóstico não invasivos para a detecção de pacientes de CRC [14]. No entanto, poucos estudos sobre esta questão avaliada a capacidade de circulação de mediadores inflamatórios para identificar os pacientes que irão desenvolver recorrências pós-cirúrgicas e as metástases metacrônica no que diz respeito a ferramentas prognósticos clínicos atuais para CRC [15-17]. Portanto, bem desenhados estudos prospectivos são necessários para melhor estabelecer a sua relevância clínica.

Neste estudo, nós prospectivamente amostrados plasma pré-operatório de pacientes com CCR submetidos ao tratamento cirúrgico na instituição, e avaliamos se os níveis de citocinas e quimiocinas representada por IL-1, IL-6, IL-10, TNFalfa, CCL2, CXCL8, VEGF e proteína de fase aguda pentraxina-3 pode estar associado a recorrência da doença pós-operatória em um estudo de acompanhamento de 5 anos.

material e Métodos

o projeto de inscrição e estudo do paciente

69 pacientes que foram diagnosticados com tumor colorretal, ea cirurgia radical consecutivamente submetidos no hospital Humanitas Research com intenção curativa entre abril de 2008 e agosto de 2009 foram incluídos neste estudo. Depois paciente deu consentimento informado para a investigação, uma amostra de sangue de cada paciente foi retirado no momento da admissão hospitalar e antes de cirurgia para serem processados ​​para separação do plasma. Os investigadores que estavam cegos para os resultados dos níveis de parâmetros imunológicos montado um banco de dados clínica através da recolha de dados demográficos dos pacientes, os dados clínicos e histopatológico, que foram gravadas no servidor de intranet da Institucional. Tumor o estadiamento clínico e histopatológico no momento do diagnóstico foi determinada em todos os pacientes através da combinação de achados histopatológicos com os registros cirúrgicos e de imagem perioperatória. O estadiamento do tumor foi categorizada de acordo com a American Joint Committee on Cancer diretrizes AJCC. Todos os dados demográficos, variáveis ​​clínicas e histopatológicas do paciente foram testados para a covariância com níveis de mediadores imunes (Tabela 1). Estas variáveis, em conjunto com a quantidade de IL-1, IL-6, IL-10, TNFalfa, CCL2, CXCL8, VEGF e da proteína de fase aguda pentraxina-3, foram testados como preditores de resultado do paciente, para avaliar a probabilidade de tumor de recidivas com respeito ao ponto de os níveis sanguíneos de mediadores imunitários. Nós definimos o resultado de pacientes com CCR como uma variável incluindo qualquer evento (n = 9) de recidivas tumorais locais (n = 1) ou quaisquer metástases distantes de órgãos metacrônicos (n = 8), que é chamado sobrevida livre de doença (DFS). A sobrevida dos pacientes foi calculada como sobrevida específica da doença (DSS) e em causa qualquer morte relacionada apenas à doença CRC (n = 5). Para detectar ou excluir qualquer recidiva pós-cirúrgicas, os pacientes foram submetidos computadorizada por tomografia tóraco-abdominal, ultra-sonografia abdominal, e radiografia de tórax que foram feitas de acordo com protocolos comuns para a vigilância. O período de observação começou imediatamente após o procedimento cirúrgico e a detecção de recorrência do tumor ou tumor morte relacionada foi calculado a partir do diagnóstico até que os dados foram censurados. O período médio de acompanhamento da coorte estudada foi de 56.33 meses (DP = 15,74 meses). Se o evento morte não foi relacionada à doença CRC, o tempo de seguimento foi interrompido no momento da morte do paciente que não foi considerado um evento de resultado. vigilância tumor pós-cirúrgico de acompanhamento de dados não estavam disponíveis em 6 de 69 pacientes (8,7%) incluídos no estudo e, portanto, foram excluídos da análise dos resultados de acordo com as orientações anteriores [18]. Comissão de Ética da Clínica e Centro de Pesquisa Humanitas aprovou o estudo, e o consentimento informado por escrito referindo médico obtido de cada paciente antes da cirurgia.

Ensaios

As amostras de plasma foram centrifugadas a 3000 rpm durante 10 minutos e, em seguida, mantida a -80 ° C até à análise de ELISA. Os níveis plasmáticos de IL-1, IL-6, IL-10, TNFalfa, CCL2, CXCL8, VEGF foram determinados por kit disponível comercialmente sanduíche ensaio imunossorvente ligado a enzima (ELISA), de acordo com as instruções do fabricante. PTX3 no plasma foi ensaiado com um “em casa” ELISA sanduíche com base no MNB4 anticorpo monoclonal (anticorpo de captura) e de coelho anti-soro (anticorpo de detecção), como previamente descrito [19]. O limite de detecção é de 100 pg /ml e inter variabilidade é de 8% -10%. Os valores normais de PTX3 estão 2 ng /ml. Os níveis de mediadores imunes nas amostras de plasma dos pacientes foram determinados por meio da correlação cada valor duplicados com uma curva padrão baseada em uma diluição em série de 2 vezes de IL-1 recombinante, IL-6, IL-10, TNFalfa, CCL2, CXCL8, VEGF e PTX3 com concentração conhecida.

a análise estatística

a análise estatística foi realizada utilizando o Epi Info (versão 3.4.3), software estatístico StatsDirect (Versão 2.5) e software GraphPad Prism (versão 4.1). A associação entre os valores imunes mediador e demografia basal do paciente, características clínicas e histopatológicas e características do tumor foram estimados por análise de regressão linear. Para melhor determinar a associação de cada mediador imunológico e prognóstico do paciente, foi realizada uma análise receptor curva operacional (ROC). O valor de cut-off ROC de cada distribuição contínua foi definido para prever a ocorrência de recidivas do paciente. Um modelo de risco proporcional de Cox foi desenvolvido para avaliar o ROC cortado valor de IL-1, IL-6, IL-10, TNFalfa, CCL2, CXCL8, VEGF e a PTX3 e outras características demográficas, clínicas e histopatológicas, em prever a ocorrência de DFS. Para avaliar para fatores de confusão, Cox análise multivariada foi realizada inserindo todas as variáveis ​​com um valor de P inferior a 0,20 na análise univariada. Por uma abordagem por passos de eliminação para trás, as variáveis ​​não significativas e as suas interacções não significativas, foram removidos a partir do modelo. As curvas de Kaplan-Meyer de DSS foram plotados, enquanto o teste log-rank foi utilizado para comparar as curvas de cada subgrupo de pacientes com CCR. Para cada teste só P-frente e verso valores inferiores a 0,05 foram considerados estatisticamente significativos.

Resultados

Demografia e histopatológicos de pacientes CRC incluídos neste estudo e sua correlação com avaliação quantitativa do pré-operatório os valores de plasma de mediadores imunitários são mostrados na Tabela 1. a análise de subgrupos revelou que entre todos os mediadores imunes apenas os valores de VEGF IL-1b e um pequeno aumento na TNM avançado teste (P = 0,06 e P = 0,04, respectivamente) (Tabela 1). Curiosamente, apenas valores TNFa IL-1b e aumentou entre os pacientes com níveis sanguíneos elevados de CEA (≥5ng /ml) no cut-off geralmente empregadas para este biomarcador, enquanto outros mediadores imunológicos não foram associados com níveis de CEA (Tabela 1). Em seguida, testou-se os coeficientes de correlação linear entre os valores de plasma contínuas de marcadores inflamatórios como mostrado na Tabela 2. A análise de regressão linear revelou que a IL-1b correlacionados em grande medida, com o TNF-a (r = 0,94, P 0,001), independentemente de outros mediadores imunes (Tabela 2). Além disso, os valores de CXCL8 independentemente linearmente correlacionada com os da IL-6, CCL2 e VEGF (r = 0,34, P = 0,006; r = 0,31 P = 0,01; r = 0,36 P = 0,003, respectivamente), enquanto a IL-10 valores linearmente correlacionou-se apenas com o VEGF (r = 0,39, P 0,001), independentemente dos outros marcadores imunológicos (Tabela 1). Interessantemente, os níveis de PTX3 proteína de fase aguda não se correlacionou com nenhum dos marcadores imunológicos estudados (Tabela 1), o que sugere que a PTX3 pode seguir diferentes caminhos de activação em pacientes com CCR em comparação com outros mediadores imunitários.

Subsequentemente, foi investigada a relação entre a linha de base (pré-operatório) níveis plasmáticos de mediadores imunes e o risco de desenvolver recorrências CRC pós-cirúrgicas. distribuições contínua dos níveis de plasma do paciente circulantes de mediadores inflamatórios de acordo com pós-cirúrgica a recorrência da doença CRC são mostradas na Fig 1. Verificou-se que os doentes que não tiveram recidiva (n = 54) tinham concentrações plasmáticas significativamente mais baixas de IL-1 (P = 0,008), IL-6 (P = 0,01), IL-10 (P = 0,04), CXCL8 (p≤0.001), VEGF (p≤0.001) e TNFalfa (P = 0,02) em comparação com aqueles que experimentaram a recorrência da doença CRC (n = 9) (fig 1). Em contraste, os valores CCL2 não mudar de acordo com o prognóstico dos pacientes com CCR e as proteínas de fase aguda pentraxina-3 teve apenas uma tendência para aumentar (P = 0,11) entre os pacientes que experimentaram pós-cirúrgico recorrência da doença (Fig 1).

A quantidade de IL-1 (A), a IL-6 (B), IL-10 (C), o TNF-a (D), IL-8 (F), de VEGF (L) aumentou significativamente em pacientes experiente recidiva da doença, enquanto que a proteína de fase aguda pentraxina-3 (H) mostrou uma tendência a associar-se com pior prognóstico. níveis de CCL2 (E) não foram associados com recidiva da doença.

De acordo com estudos anteriores [20], para se obter um método reprodutível e confiável para aferir os valores prognósticos de biomarcadores, calculamos curvas ROC para cada marcadores imunológicos para pacientes com CCR que tiveram bom prognóstico (n = 54) versus aqueles que experimentaram recorrência da doença (n = 9) no seguimento (S1 Fig). ROC análise do modelo de trama revelou mediadores inflamatórios com uma melhor sensibilidade do que a especificidade, tais como IL-1b (0,88 e 0,68), IL-6 (0,88 e 0,59), IL-10 (1 e 0,40), o TNF-a (1 e 0,05), CCL2 (0,77 e 0,5), CXCL8 (1 e 0,64) e VEGF: (1 e 0,66) aos pontos de corte óptimos identificados pelo modelo (S1 figura), enquanto que a PTX-3 tinha uma especificidade mais elevada que a sensibilidade (0,55 e 0,90) (S1 FIG). Para melhorar a nossa compreensão da relevância prognóstico de mediadores imunes, foi elaborado um modelo de Cox univariada prognóstico (Tabela 2) com base nos valores de limiar identificados pela curva ROC para cada marcador inflamatório. Neste modelo, os pacientes de CRC que tinham níveis de plasma mais elevados (valor ≥ROC) de IL-1 (P = 0,01), CXCL8 (P 0,001), IL-10 (P = 0,01), a PTX3 (P = 0,002), IL -6 (P = 0,06) e VEGF (P 0,001), associada a um pior prognóstico (Tabela 3), enquanto que os níveis mais elevados de CCL2 (P = 0,31) e TNF-a (P = 0,89) (Tabela 3) não fez. Além disso, testou-se para a independência destes biomarcadores. Para evitar overfitting do modelo COX [21, 22] por causa da quantidade relativamente baixa de eventos (n = 9) em nossa coorte, cada um mediador inflamatório foi inserido separadamente em um modelo multivariado incluindo estágio TNM ou um outro mediador inflamatório (não dados mostrando). Nestes modelos, verificou-se que entre todos os mediadores inflamatórios que foram significativas a análise univariada única CXCL8, valores CCL2 e VEGF foram independentemente e significativamente associado com prognóstico (dados não mostrados). Em detalhe, os níveis elevados de CXCL8, VEGF e PTX-3 (valor ≥ROC) identificaram subgrupos de pacientes de CRC [44,4% (28/63); 42,8% (27/63); 15,8% (10/63), respectivamente] que eficientemente detectado recidivas da doença [47,3% (9/19); 50,0% (9/18); 50,0% (05/05)]. Assim, de acordo com estes resultados, combinados os níveis de CXCL8, VEGF e PTX-3 (valor ≥ROC de marcadores combinados) (Tabela 4) e ajustar para fatores de confusão e testar sua independência prognóstico, foi realizada uma análise multivariada de Cox, com respeito à demografia, clínicas e histopatológicas características (Tabela 4). Cox análise multivariada mostrou que níveis mais elevados de (valores ≥ROC) CXCL8, VEGF e PTX-3 combinados associados a um pior prognóstico [HR: 14,28, IC 95% (3,13-65,1), P 0,001] independentemente do estadiamento TNM e outras variáveis incluídos neste modelo (Tabela 4). Combinado corte alto de CXCL8, VEGF e valores PTX-3 estava presente apenas em 11% (7/63) de pacientes de CRC, mas este subgrupo identificado eficientemente 71,4% (07/05) dos casos de recaída. Por outro lado, um baixo ponto de corte de valores combinados de CXCL8 inflamatórias, VEGF e PTX-3 identificado um 38% (24/63) dos pacientes de CRC com 0% (0/24) dos casos de recaída. No geral, o valor preditivo para detectar recidivas da doença da pontuação combinada de CXCL8, VEGF e PTX-3 foi melhor em relação a cada um dos seus valores separados (todos P ≤ 0,05).

Fig 2 mostra as curvas de DSS de todos os pacientes investigados sub agrupados por os valores de plasma de CXCL8, VEGF, PTX-3 (valores ≥ROC) e o marcador imunológico. Encontramos uma associação com pior sobrevida em pacientes de CRC com valores de CXCL8 (P = 0,008), VEGF (P = 0,001), PTX-3 (P = 0,005) acima do limiar de ROC (valores ≥ROC). A pontuação imunológico representados por valores ROC combinados de CXCL8, VEGF e PTX-3 (baixa, média, alta corte) teve a capacidade de prever a sobrevida significativamente pior (P 0,001). Com uma melhor eficiência em comparação com mediadores imunes individuais

os valores de limiar ROC de IL-8, a PTX3 e VEGF foram calculadas em toda a coorte (6,79 pg /ml, 31.97pg /ml, 6.29pg /ml, respectivamente) e foram utilizados como um ponto de corte para seleccionar alta e baixa IL-8, 3-PTX e VEGF em pacientes com cancro colo-rectal. pontuação imunológico baixo foi definida por valores combinados lowIL-8-lowVEGF-lowPTX3. pontuação imunológico alta foi definida por valores combinados highIL-8-highVEGF-highPTX3. Intermediário pontuação foi definido por qualquer outro valor. Valores acima do ponto de corte ROC foram associados com pior sobrevida do paciente para CXCL8 (P = 0,008), PTX3 (P = 0,001), VEGF (P = 0,005) e a pontuação imunológico (P 0,001)., Em comparação com os que estão abaixo ROC cutoff

Discussão

neste estudo, nós mostramos que os mediadores inflamatórios no sangue de pacientes com CCR cobrados antes da ressecção cirúrgica pode ser candidatos a biomarcadores para prever a progressão pós-cirúrgico de CRC. Ao caracterizar uma variedade de diferentes citocinas, tivemos a possibilidade de aferir o seu relevância prognóstica. Nós mostramos que CXCL-8, VEGF e da longa pentraxina 3 foram os melhores preditores de prognóstico em nosso estudo CRC. Além disso, uma pontuação de citocinas com base na combinação dos níveis desses mediadores imunes era independente do estadiamento TNM convencional na identificação de recidivas da doença pós-operatórias.

O presente estudo seguiu as orientações OBSERVA para a avaliação do prognóstico marcadores tumorais [23]. No entanto, reconhecemos algumas fraquezas com o desenho do estudo. Em primeiro lugar, nós quantificamos níveis de mediadores inflamatórios antes da cirurgia, mas não durante o acompanhamento. No entanto, estudos anteriores mostraram que os níveis de um marcador inflamatório sistêmico comum e inespecífico, como CRP não se alterou em indivíduos ao longo dos anos [24, 25]. Além disso, nós quantificamos níveis basais de mediadores inflamatórios na véspera da cirurgia e por esta razão o tipo de tratamento cirúrgico não representa uma variável de confusão, uma vez que não pode afectar os níveis de mediador inflamatório em nosso estudo. Em segundo lugar, nós não examinamos combinado de controle de doadores de sangue saudável desde que este foi além do objetivo deste estudo. Em terceiro lugar, nós reconhecemos a quantidade limitada de pacientes com CCR incluídos em nosso estudo pode criar overfitting modelos prognósticos. No entanto, o número de eventos necessários para testar a independência dos biomarcadores ainda é debatido [22] e depende da extensão do efeito prognóstico. número de nossa coorte do paciente limitada confiar no seu desenho prospectivo eo curto intervalo de tempo de inscrição do paciente, que diminuem vieses de seleção e inconsistências metodológicas geralmente associados com grandes coortes retrospectivas [26]. Além disso, foram empregados modelos de curva ROC para gerar dados reprodutíveis medindo a especificidade e sensibilidade que são úteis para aferir a capacidade de diagnóstico de biomarcadores entre os estudos [14].

Para o nosso conhecimento, este é o primeiro estudo a abordar a relevância prognóstico pós-cirúrgico de pentraxina 3 em CRC. PTX3 é um mediador imune que pertence à família altamente conservadas de pentraxinas, assim como a proteína C reactiva (PCR) [27]. Tem um papel importante nos processos homeostáticos tais como remodelação de tecidos, angiogénese e respostas inflamatórias ([28], [27], [29], e tem sido associada com a inflamação relacionada com o cancro [30]. Em estudos clínicos prévios, a PTX3 foi Verificou-se que o aumento em outros tumores, tais como os lipossarcomas [31], glioma [32], do pulmão [20] e o cancro da próstata [33] em comparação com controlos saudáveis ​​emparelhados [20, 33] ou a hiperplasia benigna [33]. no entanto, nenhum destes estudos ligados os níveis de PTX3 com recidivas de tumores pós-cirúrgicas. Além disso, a nossa gama de citocinas foi útil para investigar se mediadores imunes correlacionam uma com a outra no plasma de pacientes de CRC humanos. a ausência de covariância entre pentraxina-3 e de outros mediadores inflamatórios explicar o seu impacto independente no prognóstico, e sugere ainda que a pontuação inflamatória combinada pode aumentar o rendimento de detecção de recorrência pós-cirúrgicas. Apesar da forte correlação entre o TNF-a e IL-1b, estes mediadores associados com o prognóstico do paciente a um menor grau do que os níveis de PTX3, os quais sugere que estas citocinas podem ter um nível mais baixo de envolvimento na recidiva metastática de CRC comparando a PTX3. Em outros estudos, a PTX3 foi mostrado ser altamente induzida por LPS /TLRs [34, 35] que também podem induzir a expressão de CXCL8. Neste contexto, é importante reconhecer que maiores níveis de PTX3 e sangue CXCL8 em pacientes com recorrência da doença neste estudo representam uma mera evidência fenomenológica da reação inflamatória no local do tumor. Se estes mediadores apoiar o processo metastático local e sua segmentação iria afectar o crescimento CRC foi além do objetivo deste estudo. Portanto, nossos dados mostram a regulação positiva de PTX3 soro em pacientes CRCs metastáticos não está em conflito com relatórios mecanicistas anteriores [36] e, na verdade fornecer mais provas de que este mediador de alguma forma está envolvida na reacção tumorigénico.

Juntamente com VEGF, inibidor que é correntemente usado como um factor anti-angiogénico para o tratamento de CRC fase IV, CXCL8 é também um potente promotor de angiogénese, que podem promover vascularização no local do tumor, proliferação e metástases de células cancerosas e mediar o recrutamento de leucócitos infiltrantes tumorais [37- 39]. Além disso, nossos dados confirmam os achados de as habilidades prognóstico dos níveis de VEGF [40, 41] e CXCL8 [42] circulantes em pacientes CRC demonstrando que este tipo de metodologia é altamente reprodutível.

Os nossos dados sugerem que a introdução de mediadores inflamatórios circulantes para a detecção da progressão CRC pós-cirúrgica seria efetivamente identificar indivíduos com alto risco de recorrência de forma independente dos preditores de risco convencionais. pacientes com CCR identificados por níveis elevados de níveis plasmáticos mediador inflamatório devem ser monitorados mais de perto no acompanhamento independentemente do seu estatuto TNM que proporcionaria uma ferramenta adicional no processo de tomada de decisões para a triagem pós-cirúrgico. Para concluir, PTX3 e CXCL8 quantificação plasma pode ser acoplado com os níveis de VEGF para obter o melhor rendimento de detecção de recorrência pós-cirúrgica das amostras de sangue. Estas descobertas, fornecem a justificativa para projetar estudos clínicos em grande escala, a fim de confirmar a capacidade de prognóstico desses mediadores inflamatórios.

Informações de Apoio

S1 Fig. curvas de análise ROC-plot comparando pacientes de acordo com a sua recaída pós-cirúrgica nos cortes óptimas identificadas pelo modelo ROC para todos os mediadores imunes solúveis estudada.

curvas enredo ROC em cortes ideais para cada mediador imune foram calculados e testados quanto à sua capacidade de detectar a recidiva pós-cirúrgicas de acordo com a sua sensibilidade e especificidade. Sensibilidade e Especificidade: IL-1 (0,88 e 0,68); IL-6 (0,88 e 0,59); IL-10 (1 e 0,40); O TNF-a (1 e 0,05); CCL2 (0,77 e 0,5); CXCL8 (1 e 0,64); VEGF: (1 e 0,66); PTX-3: (0,55 e 0,90). ROC de corte: os valores de IL-1 (0,81 pg /ml), IL-6 (5,86 pg /ml), IL-10 (4,14 pg /ml), TNFa (49,72 pg /mL ), CCL2 (38,03 pg /mL), CXCL8 (7,01 pg /ml), de VEGF (39,03 pg /mL), a PTX3 (13,68 pg /mL)

doi:. 10.1371 /Journal .pone.0148186.s001

(PDF)

Reconhecimentos

Giuseppe Di Caro é suportado por iCare bolsa da Associazione Italiana per la ricerca sul Câncer (AIRC).

autores declaram não haver conflito de interesses.