Abstract

Fundo

A fim de melhorar os resultados dos pacientes com cancro do pulmão de não pequenas (NSCLC), um biomarcador que possa prever é necessária a eficácia da quimioterapia. O objetivo deste estudo foi avaliar o papel das mutações EGFR e ERCC1 em predizer a eficácia da quimioterapia à base de platina ea evolução dos pacientes com NSCLC.

Métodos

Foi realizado um estudo retrospectivo para analisar as relações entre mutações EGFR ou expressão ERCC1 e sobrevida livre de progressão (PFS) em doentes com NSCLC que receberam quimioterapia baseada em platina. estado de mutação do EGFR foi determinada utilizando a polimerase de ácido nucleico nucleico reacção em cadeia método de fixação de bloqueio de ácido peptídeo, e imuno-histoquímica foi utilizado para examinar a expressão de ERCC1 em amostras de tumores obtidos a partir dos pacientes.

Resultados

Entre os pacientes com NSCLC que receberam quimioterapia baseada em platina, a PFS mediana foi significativamente melhor naqueles que nunca fumaram e aqueles com exon 19 exclusão, ea sobrevida global mediana (oS) foi significativamente melhor naqueles que nunca fumaram, aqueles com exon 19 eliminação, e as mulheres. A análise de regressão de Cox revelou que exão 19 exclusão e nunca ter fumado foram significativamente associados com ambos PFS e OS. A análise de subgrupos mostrou uma correlação significativa entre a expressão ERCC1 e mutação EGFR, e os pacientes ERCC1-negativos com exon 19 deleção tinha PFS mais longos do que os outros pacientes; pacientes ERCC1-positivo sem exão 19 deleção tinha PFS mais curtos do que os outros pacientes.

Conclusões

Nossos resultados indicam que, entre os pacientes com NSCLC submetidos a quimioterapia à base de platina, aqueles com exon 19 exclusão têm uma PFS mais longos e OS. Nossos resultados sugerem que a quimioterapia à base de platina é mais eficaz contra ERCC1-negativo e exão 19-positivo NSCLC

Citation:. Yamashita F, Azuma K, Yoshida T, Yamada K, Kawahara A, Hattori S, et al . (2013) Valor prognóstico do EGFR mutação e ERCC1 em pacientes com não-pequenas células do pulmão com câncer submetidos Platinum baseados em quimioterapia. PLoS ONE 8 (8): e71356. doi: 10.1371 /journal.pone.0071356

editor: Karl X. Chai, University of Central Florida, Estados Unidos da América

Recebido: 16 de abril de 2013; Aceito: 28 de junho de 2013; Publicação: 05 de agosto de 2013

Direitos de autor: © 2013 Yamashita et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Este estudo foi apoiado pela Fundação Fukuoka para a Saúde Som, Japão (https://www.sukoken.or.jp/). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito. Sem financiamento externo adicional recebida para este estudo

Conflito de interesses:. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

câncer

pulmão é a principal causa de morte por câncer. em todo o mundo [1]. O receptor do factor de crescimento epidérmico (EGFR) é considerado como sendo um alvo molecular importante na terapia do cancro do pulmão. Somatic mutações ativadoras do

gene EGFR

foram identificados como um dos principais determinantes da resposta clínica aos inibidores de tirosina-quinase de EGFR (TKI), tais como gefitinib e erlotinib em pacientes com NSCLC. A maior parte destas mutações ocorrem nos exões 19 e 21, que codificam o domínio de tirosina-quinase do receptor, sendo os mais comuns deleções no exão 19 (tais como delE746-A750) e a mutação pontual L858R no exão 21. Estas mutações são encontrados mais frequentemente em pacientes do sexo feminino, em indivíduos que nunca fumaram, e em doentes de etnia asiática Oriente [2] – [5]. ensaios clínicos prospectivos de tratamento de EGFR-TKI de doentes com NSCLC com activadores mutações de EGFR, tais como delE746-A750 (exão 19) e L858R (exão 21), demonstraram elevadas taxas de resposta clínica de cerca de 80% [4] – [7]. No estudo IPASS comparando gefitinib com carboplatina e paclitaxel como terapia de primeira linha em pacientes asiáticos, pacientes com NSCLC com mutação EGFR tiveram uma taxa de resposta mais elevada do que pacientes sem mutações EGFR quando eles receberam carboplatina e paclitaxel. A eficácia da quimioterapia à base de platina foi melhor em pacientes positivos para a mutação EGFR do que naqueles que foram negativos [8]. Estes resultados sugerem que os pacientes com NSCLC mutações de EGFR podem tender a reagir com os regimes de quimioterapia citotóxicos, tais como à base de platina. Alguns pesquisadores têm relatado que pacientes com mutações EGFR respondem à quimioterapia convencional [9] – [13]. No entanto, os mecanismos subjacentes a essas respostas à quimioterapia permaneceram obscuros.

Por outro lado, ERCC1 é um componente da via de reparação de excisão de nucleótidos, o que é essencial para a reparação de aductos ADN-platina e está associada com resistência à quimioterapia à base de platina [13]. Alguns estudos clínicos demonstraram que a sobre-expressão de ERCC1 tende a ser associada com a resistência à quimioterapia à base de platina [14] – [15]. Anteriormente, também relataram que a expressão ERCC1 estimado por imuno-histoquímica foi um fator prognóstico independente tanto em termos de sobrevida livre de proression (PFS) e sobrevida global (SG) em pacientes com NSCLC recaída que tinham recebido quimioterapia baseada em platina [16]. Em geral, pacientes com NSCLC com um baixo nível de ERCC1 teve maior sobrevida após a quimioterapia à base de platina do que aqueles com um alto nível de ERCC1. Gandara et al. relataram uma associação significativa entre a mutação EGFR e um baixo nível de mRNA ERCC1 em amostras de tumores NSCLC [17]. Estas descobertas importantes nos levou a investigar as correlações entre mutações EGFR e ERCC1 em pacientes com NSCLC submetidos a quimioterapia à base de platina. Foi realizado um estudo retrospectivo para avaliar a utilidade da mutação EGFR como um preditor da eficácia da quimioterapia à base de platina ea evolução dos pacientes com NSCLC. Além disso, utilizou-se imuno-histoquímica para examinar a expressão de ERCC1 em amostras de tumor de doentes com NSCLC submetidos a quimioterapia à base de platina, e analisadas as relações entre ERCC1 e EGFR mutações em tumores e o tempo de sobrevivência para determinar se ou não a expressão destas moléculas pode ser utilizada para prever PFS e OS.

Materiais e Métodos

NSCLC pacientes e Tratamento

Este estudo retrospectivo incluiu casos de histologicamente ou citologicamente diagnosticado NSCLC, que foram avançados (estágio IIIB ou IV) ou recorrente no momento do diagnóstico inicial. Nós selecionados 206 pacientes com NSCLC tratados com gefitinib ou erlotinib entre setembro de 2002 e março de 2011 no Hospital Universitário de Kurume. Desses pacientes, 103 receberam quimioterapia baseada em platina e EGFR-TKI. O tratamento foi mantido até o aparecimento de eventos adversos inaceitáveis, progressão da doença ou morte, ou a retirada do estudo. As informações clínicas sobre cada caso foi obtido a partir dos registros médicos; os parâmetros incluíram sexo, idade, Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) performance status (PS), histologia do tumor, estágio, tabagismo, e o número de cursos de quimioterapia. As características dos pacientes observados foram: sexo, idade, PS, histologia do tumor, estágio da doença, no pós-operatório recorrência da doença, história de tabagismo, quimioterapia prévia, e tipo de mutação EGFR.

A resposta tumoral foi examinado por tomografia computadorizada e avaliadas de acordo com o Critérios de avaliação de resposta em tumores sólidos (RECIST). A resposta foi confirmada, pelo menos, 4 semanas (para uma resposta completa ou parcial) ou 6 semanas (para a doença estável) depois de ter sido documentada pela primeira vez. Este estudo foi aprovado pelo Conselho de Revisão Institucional da Universidade Kurume.

Extração de DNA e PNA-LNA PCR braçadeira Ensaio

Para

EGFR

análise de mutação, o ácido-péptica nucleico ácido nucleico bloqueado (PNA-LNA) reação em cadeia da polimerase (PCR) método de fixação foi adotado, utilizando protocolos descritos anteriormente [18]. Específicas conjuntos de sondas de PNA-LNA para dois locais de mutação, exão 19 (delE746-A750) e exão 21 (L858R), foram desenvolvidos e estes coberto 90% de

EGFR

mutações reportadas anteriormente no Japão. Em resumo, o ADN genómico foi purificado a partir de tecidos embebidas em parafina usando um kit de DNA QIAamp Micro (QIAGEN). Os iniciadores de PCR utilizados foram sintetizados por Invitrogen Inc. iniciadores braçadeira de PNA e LNA sondas mutantes foram adquiridos a FASMEC (Kanagawa, Japan) e IDT (Coralville, IA), respectivamente. ensaio de grampo de PNA-LNA de PCR foi realizada utilizando o Sistema de SDS-7500 (Applied Biosystems). sequências de exão do domínio de cinase de EGFR foram amplificados por PCR com iniciadores internos utilizando um iniciador específico.

Avaliação imuno-histoquímica de incluídos em parafina Os tecidos tumorais

espécimes tumorais adequados estavam disponíveis para 51 destes doentes e sujeitos a detecção ERCC1, como relatado anteriormente [16]. As amostras de tecido foram fixados em formalina a 10% neutra tamponada e embebidos em parafina. As secções de parafina foram então cortados com uma espessura de 4 mm, montadas em lâminas de vidro revestidas, e marcadas com um anticorpo contra ERCC1 (clone 8F1; Neomarkers, Fremont, CA). Depois de as secções foram desparafinadas em xileno e desidratadas numa série de etanol graduada, a actividade da peroxidase endógena foi bloqueada com H

2O

2 em metanol. Para a coloração de ERCC1, antigénios foram recuperados por aquecimento em ácido cítrico (pH 6,0) durante 10 min. As secções foram incubadas com solução de bloqueio (10% Block Ace; Yukijirushi, Tóquio, Japão) e em seguida, feito reagir com anticorpo monoclonal anti-ERCC1. Após o excesso de anticorpo foram lavadas com PBS, as amostras foram incubadas com peroxidase de rábano (HRP) de cabra anti-ratinho marcado com ou o anticorpo anti-coelho (Nichirei, Tóquio, Japão) durante 60 min. A reacção foi visualizada utilizando 3,3-diaminobenzidina (DAB) como substrato (Dako, Glostrup, Dinamarca), e as lâminas foram contrastadas com hematoxilina. Cada lâmina foi alvo usando Retrieval Solution a pH 9.0 (Dako, Glostrup, Dinamarca) durante 30 min, e incubadas com o anticorpo, a 4 ° C durante a noite tratado termicamente. expressão nuclear ERCC1 foi classificado em quatro categorias: pontuação 0, ausência total de coloração 10% das células tumorais; marcar 1+, expressão parcial ligeira /quase imperceptível nuclear em 10% das células tumorais; pontuação 2 +, fraco a moderado coloração de todo o núcleo em 10% de células tumorais; e marcar 3+, forte coloração de todo o núcleo em 10% de células tumorais. A extensão da coloração imuno para ERCC1 foi definida da seguinte forma: dezenas de 1+, 2+ e 3+ foram considerados positivos, e uma pontuação de 0 foi considerado como negativo. Todos os estudos de IHC foram avaliados por dois observadores IHC-experientes que desconheciam as condições dos pacientes (AK e MK).

Análise Estatística

Foi utilizado o teste exato de Fisher para avaliar a importância da relações entre estado da mutação EGFR e outras características do paciente. Para o tratamento de EGFR-TKI, PFS foi calculada a partir da data de início de EGFR-TKI até à data da progressão da doença. Para tratamentos de quimioterapia à base de platina, o PFS foi calculada a partir da data de início de quimioterapia à base de platina até à data da progressão da doença. OS foi definido como o período compreendido entre a data de início da quimioterapia à base de platina até à data da morte. Pacientes sem progressão da doença e que ainda estavam vivos foram tratados como censurado em seu último contato para análise da PFS e OS, respectivamente. As curvas de sobrevida para PFS e OS foram estimadas pelo método de Kaplan-Meier, ea diferença entre as curvas para pacientes com e sem mutações EGFR foi avaliada pelo teste de log-rank. O modelo de riscos proporcionais de Cox foi aplicado para verificar se a mutação EGFR foi associado com PFS ou OS, mesmo após o ajuste para outros fatores prognósticos. Todos os testes foram em frente e verso, e as diferenças em

P Art 0,05 foram considerados estatisticamente significativos. A análise estatística foi realizada com JMP versão 10.0.0 e SAS software versão 9.2 (SAS Institute, Cary, NC).

Resultados

Relações entre EGFR mutações e as características do paciente

as características clínicas dos 103 pacientes são mostradas na Tabela 1. Todos os pacientes receberam quimioterapia à base de platina e uma boa PS (0-1). mutações de EGFR foram identificados em 46 pacientes. No que diz respeito ao tipo de

EGFR

mutação, 26 pacientes apresentou deleções no exão 19, e 20 pacientes apresentavam a mutação L858R missense no exon 21. Cinquenta e seis pacientes eram do sexo feminino e 51 nunca fumaram; a idade média dos pacientes global foi de 63 (intervalo de 33 a 78) anos. Oitenta e nove pacientes tinham adenocarcinoma. Os compostos de platina foram usadas para quimioterapia de primeira linha na maioria (99/103) dos pacientes. Nas outras mãos, 4 pacientes receberam gefitinib como uma primeira quimioterapia linha seguido de compostos de platina como quimioterapia de segunda linha. Os regimes de quimioterapia consistiu de carboplatina-paclitaxel em 55 pacientes, carboplatina-gemcitabina em 12, carboplatina-pemetrexed em 4, carboplatina-vinorelbina em 1, cisplatina-vinorelbina em 18, cisplatina-docetaxel em 4, cisplatina-gemcitabina em 4, cisplatina vinorelbina-gemcitabina em 3, cisplatina-pemetrexed em 1, e cisplatina e etoposídeo em 1. O número médio de ciclos de quimioterapia foi de três (intervalo 1-4). No grupo mutação-positiva EGFR, 17 pacientes (36,9%) mantiveram uma resposta parcial (PR), 25 (54,3%) mantida a doença estável (SD), e 4 (8,8%), mantido a doença progressiva (DP), enquanto que na EGFR grupo mutação-negativos, 10 pacientes (17,5%) manteve um PR, 28 (49,1%) mantiveram SD, e 19 (32,2%) mantiveram PD. sexo feminino (P = 0,072), a resposta do tumor (P = 0,005), e tratamento gefitinib (P 0,001) foram significativamente mais freqüentes no grupo de pacientes com mutações EGFR, enquanto que outras características não apresentaram diferenças inter-grupos (Tabela 1) .

Análise de Sobrevivência

A duração média do acompanhamento foi de 565 (intervalo 31-3367) dias. Entre 103 pacientes com NSCLC que receberam quimioterapia à base de platina, 101 sofreram progressão da doença e 73 morreram. Para o tratamento de EGFR-TKI, o PFS mediana era significativamente mais longa na mutação de EGFR-positivo do que nos casos de mutação negativa do EGFR (P 0,001, P 0,001) (Fig. 1A e 1B), enquanto que não houve diferença significativa na mediana de OS entre os dois grupos (

P

= 0,126, P = 0,122), respectivamente.

as diferenças na sobrevida livre de progressão ea sobrevida global entre os subgrupos foram analisados ​​pelo teste de log-rank. A, B: Para o tratamento de EGFR-TKI, o PFS mediana era significativamente mais longa na EGFR-mutação positiva do que em pacientes de mutação negativa do EGFR (P 0,001, P 0,001) C: Entre os doentes com NSCLC que receberam quimioterapia à base de platina, a PFS mediana foi significativamente melhor para aqueles com mutações EGFR do que para aqueles sem. D: Entre os pacientes com NSCLC que receberam quimioterapia baseada em platina, a PFS mediana foi significativamente melhor para aqueles com exon 19 exclusão ou L858R

Entre os pacientes com NSCLC que receberam quimioterapia baseada em platina, a mediana. PFS foi significativamente melhor para aqueles que nunca fumaram (P = 0,003) e para aqueles com exon 19 exclusão ou L858R (P = 0,040) (Fig. 1C e Fig. 1D). No entanto, o PFS não foi associada com outros factores, tais como idade, sexo, histologia, fase, e no tratamento de EGFR-TKI (Tabela 2). Também entre os pacientes com NSCLC que receberam quimioterapia baseada em platina, o OS mediana foi significativamente melhor para pacientes do sexo feminino (p = 0,020), os pacientes que nunca fumaram (P = 0,03), os pacientes com estágio IV ou doença recorrente (P = 0,010) , e pacientes com o exão 19 deleção (P = 0,028). No entanto, OS não foi associada a outros fatores, como idade, histologia e tratamento de EGFR-TKI (Table2). Finalmente, a análise de regressão de Cox, incluindo fatores mostrados para ser significativamente associado com PFS ou OS pelo teste de log-rank, revelou que a mutação EGFR e tabagismo (nunca ter fumado) foram significativamente associados com PFS (P = 0,036 para a heterogeneidade entre exão 19 exclusão, L858R e tipo selvagem; P = 0,024 para o status de fumar com taxa de risco (HR) intervalo de confiança de 0,427 e 95% (CI) 0,213-0,892). Em comparação aos pares em relação ao tipo selvagem, os pacientes com exon 19 deleção tinha PFS significativamente mais longos do que aqueles com o tipo selvagem (HR, 0,566; 95% CI, 0,340 a 0,911;

P

= 0,019), enquanto os pacientes com L858R não têm significativamente mais PFS (HR, 1,073; 95% CI, 0,621-1,780) (Tabela 3). Para OS, foram obtidos resultados semelhantes: mutação EGFR foi significativamente associada com OS (P = 0,010 para heterogeneidade) e tabagismo foi próxima da significância estatística (P = 0,082; HR, 0,523; 95% CI, 0,256-1,086). Pacientes com exon 19 deleção tinham significativamente mais OS que aqueles com o tipo selvagem (HR, 0,452; 95% CI, ,242-,811;

P

= 0,007), enquanto aqueles com L858R fez não (HR, 1.176; IC 95%, 0,628-2,100, P = 0,600) (Tabela 4).

imuno-histoquímica Avaliação da ERCC1 e Correlação entre ERCC1 e Sobrevivência

tumor adequada amostras estavam disponíveis de 51 destes pacientes, e foram submetidos a detecção ERCC1. Expressão de ERCC1 foi avaliada por imuno-histoquímica (Fig. 2A). Expressão da proteína de ERCC1 foi detectado nos núcleos das células cancerosas. A Tabela 5 mostra as relações entre a expressão ERCC1 e outros factores clinicopatológicas. expressão nuclear do ERCC1 foi classificada em quatro categorias. Vinte e três pacientes tiveram marcar 0, 12 tiveram pontuação 1+, 8 tiveram pontuação 2+ e 8 tiveram pontuação 3+ (mediana 1). Porque a pontuação expressão ERCC1 mediana é marcar 1+, dezenas de 1+, 2+ e 3+ foram considerados positivos e pontuação de 0 como negativo. expressão ERCC1 foi positivo em 28 pacientes e negativo em 23. expressão ERCC1 foi significativamente correlacionada com a mutação EGFR (P = 0,030) (Fig. 2B), mas não com outros fatores, incluindo a idade (

P

= 1,000) , sexo (

P

= 1,000), histologia (

P

= 1,000), tabagismo (

P

= 0,773), ou a resposta à quimioterapia (

P

= 0,374)

A:. A expressão de ERCC1 foi avaliada por imuno-histoquímica. A expressão da proteína ERCC1 foi detectado nos núcleos de células cancerosas (X400). B: curvas de sobrevida de Kaplan-Meier de acordo com a pontuação expressão ERCC1. C:. Pacientes ERCC1-negativos com exon 19 deleção tinha mais PFS do que os outros, e os pacientes ERCC1-positivo sem exão 19 deleção tinha PFS mais curtos do que os outros

A PFS mediana foi significativamente melhor em pacientes que nunca fumaram (p = 0,027) e em doentes que estavam ERCC1-negativos (P = 0,039), enquanto que não estava relacionado com outros fatores, como idade, sexo, histologia, e mutação EGFR (Tabela 6). O OS mediana foi significativamente melhor em pacientes com adenocarcinoma (P = 0,014) e pacientes que nunca fumaram (P = 0,040), enquanto que não estava relacionado com outros factores como a idade, a mutação EGFR, e ERCC1 (Tabela 6). A Figura 2C mostra gráficos de Kaplan-Meier construídos utilizando uma combinação de expressão ERCC1 e estado de EGFR. Pacientes com exon 19 exclusão e baixa expressão ERCC1 mostrou mais PFS, enquanto que aqueles sem exão 19 exclusão e que mostra a alta expressão de ERCC1 teve PFS mais curtos. Foram examinados os efeitos do estado de mutação e ERCC1 simultaneamente por meio de regressão Cox ajuste para fatores que haviam sido mostrados para ser significativamente associado com PFS ou OS pelo teste de log-rank. A análise de regressão de Cox revelou que a mutação EGFR e tabagismo (nunca ter fumado) foram significativamente associados com PFS (P = 0,045 para a heterogeneidade entre exão 19 exclusão, L858R e tipo selvagem; P = 0,013 para fumantes). comparativos emparelhados em relação ao tipo selvagem mostrou que pacientes com exon 19 deleção tinha PFS significativamente mais longos do que aqueles com o tipo selvagem (HR, 0,484; 95% CI, 0,227 a 0,984;

P

= 0,045), enquanto os pacientes com L858R não têm significativamente mais PFS (HR, 1.050; 95% CI, 0,486-2,163; P = 0,897) (Tabela 7). Como sugerido pela Figura 2C, regressão de Cox revelou que os pacientes ERCC1-negativos com exon 19 deleção tinha mais PFS, enquanto os pacientes ERCC1-positivos sem exão 19 deleção tinha PFS mais curtos do que os outros. Por outro lado, nem a expressão ERCC1 nem estado de mutação foi significativamente associada com o OS. A análise de regressão Cox, incluindo fatores mostrados para ser significativamente associada com o sistema operacional pelo teste de log-rank, revelou que nunca ter fumado e tendo adenocarcinoma foram significativamente associados com OS (P = 0,021 para o tabagismo, P = 0,047 para histologia). No entanto, há associações significativas foram evidentes para ERCC1 e EGFR estado de mutação (Tabela 8).

Discussão

ensaios clínicos prospectivos de tratamento de EGFR-TKI para NSCLC pacientes com mutações de activação do EGFR, tais como delE746-A750 (exão 19) e L858R (exão 21), demonstraram elevadas taxas de resposta clínica de cerca de 80%. ensaios clínicos randomizados para comparar a eficácia de EGFR-TKI ou compostos à base de platina como quimioterapia de primeira linha para pacientes com NSCLC abrigar mutações EGFR [4] – [7] demonstraram que pacientes com NSCLC com mutações EGFR mostram uma resposta dramática para EGFR TKI e um PFS mais longos do que aqueles sem

EGFR

mutações. Coincidente com estes resultados, o nosso estudo mostrou que a PFS mediana foi significativamente maior no EGFR mutação positiva do que em pacientes de mutação negativa do EGFR. No estudo IPASS, pacientes com NSCLC com mutação EGFR mostrou uma taxa de resposta mais elevada do que pacientes sem mutação EGFR quando eles receberam carboplatina e paclitaxel. No entanto, PFS não diferiu entre pacientes com NSCLC com e sem mutações EGFR que receberam agentes citotóxicos [8]. Estes resultados sugerem que os pacientes com NSCLC mutações de EGFR podem ter uma tendência para responder a agentes citotóxicos, tais como os compostos à base de platina. De acordo com estes resultados, também descobriu que pacientes com NSCLC com mutações EGFR tiveram uma taxa de resposta mais elevada do que pacientes sem mutações EGFR (36,9% vs 17,5%). Lin e Kalikaki et ai. relataram que pacientes com NSCLC ancorando mutações de EGFR mostram uma melhor resposta à quimioterapia, ao passo que outros investigadores relataram que a presença de mutações de EGFR não está correlacionada com a capacidade de resposta quimioterapia [9] – [13]. Em seguida, examinaram a associação entre a mutação EGFR e sobrevivência, e descobriu que a PFS mediana e OS foram significativamente maior nos pacientes com exon 19 exclusão que receberam quimioterapia baseada em platina. Além disso, a análise de regressão de Cox revelou que a mutação EGFR foi significativamente associada com PFS e OS. Houve alguma discordância entre os pesquisadores no que diz respeito à associação entre estado da mutação EGFR e sobrevivência após a quimioterapia convencional. Hotta et ai. demonstrou que EGFR mutação afetou PFS, ao passo que outros pesquisadores não encontraram tal correlação [9] – [13]. Dois estudos anteriores têm indicado que os doentes com NSCLC ancorando exão 19 deleções parece ser o mais sensível ao EGFR-TKI [19] – [20]. Nossos resultados favorecem a interpretação de que a quimioterapia é mais eficaz para os pacientes que abrigam a mutação EGFR do que para aqueles que são negativos. Investigações adicionais são necessárias para confirmar ou não a mutação EGFR podem ser preditivos da resposta a agentes citotóxicos.

A fim de melhorar o prognóstico de pacientes com NSCLC, um biomarcador que pode prever é necessária a eficácia da quimioterapia. ERCC1 é um componente da via de reparação de excisão de nucleótidos, o que é essencial para a reparação de aductos ADN-platina. Estudos anteriores demonstraram que a sobre-expressão de ERCC1 tende a ser correlacionada com a resistência à quimioterapia à base de platina [14] – [15]. pacientes com NSCLC com baixa expressão de ERCC1 mostrar maior sobrevida após a quimioterapia à base de platina do que aqueles mostrando uma expressão alta ERCC1. Gandara et al. investigaram a associação entre a mutação ERFR e níveis de mRNA ERCC1 em 1207 amostras de tumores NSCLC, e relatou que os tumores abrigando mutações ativadoras do EGFR foram mais propensos a expressar baixos níveis de mRNA ERCC1 [17]. Re et al. também informou que amostras com mutações EGFR eram propensos a ter baixa expressão de ERCC1 [21], e Lee et al., utilizando imuno-histoquímica, encontraram uma correlação significativa entre a mutação EGFR e baixos níveis de ERCC1 em células tumorais [22]. De acordo com estes resultados, verificou-se uma correlação significativa entre a expressão ERCC1 e mutação EGFR (P = 0,030). Embora a correlação entre a mutação do EGFR e ERCC1 tem sido pouco clara, pode ser postulado que uma capacidade diminuída para a reparação do ADN e síntese podem ser correlacionados com aumento da instabilidade do genoma e tumorais mutações [23] – [24]. lesões oxidativas do ADN e reparação contribuir para o desenvolvimento de diversas patologias humanas, incluindo malignidades [25]. Em estudos anteriores, que têm demonstrado que mutações de activação do EGFR em NSCLC estão intimamente associadas com uma diminuição da capacidade para reparar danos no ADN induzida por 8-hidroxi-2′-desoxiguanosina (8-OHdG). Um possível mecanismo através do qual 8-OHdG afecta mutações de EGFR em NSCLC poderia ser fracasso do processo de reparação de excisão de bases para a eliminação de ADN oxidado, resultando assim em aumento de mutações e a promoção da carcinogénese pulmonar [25] EGFR. Ele continua a ser mais estudada como ERCC1 poderia afetar mutações do gene EGFR no cancro do pulmão.

Foi investigada a associação entre PFS ou OS e mutação EGFR e ERCC1, e descobriu que a PFS mediana foi significativamente maior em pacientes que foram ERCC1-negativa (P = 0,039). Como estudos anteriores demonstraram, pacientes com NSCLC que são negativas para ERCC1 mostrar mais PFS [16]. Apesar de nossa análise de regressão de Cox revelou nenhum efeito significativo do estado ERCC1 em PFS ou OS, este foi um estudo retrospectivo e o número de pacientes era pequena demais para provar quaisquer associações significativas. A análise de subgrupos demonstrou que os pacientes ERCC1-negativos com exon 19 deleção tinha mais PFS do que os outros, enquanto os pacientes ERCC1-positivos sem exão 19 deleção tinha PFS mais curtos do que os outros. Curiosamente, Gandara et al. encontrado que os cancros com deleções exão 19 tiveram uma tendência para expressar níveis mais baixos do que de ERCC1 cancros com o tipo selvagem ou L858R [17]. Estes achados sugerem que PFS mediana e OS são significativamente melhores em doentes portadores do exão 19 eliminação que recebem a quimioterapia à base de platina. Dois estudos anteriores têm indicado que os doentes com NSCLC ancorando exão 19 deleções parece ser o mais sensível ao EGFR-TKI [19] – [20]. Além disso, os ensaios clínicos prospectivos envolvendo pacientes com NSCLC, como ideal e EURTAC, demonstraram que exon19 pacientes têm uma taxa de risco mais favorável do que aqueles com exon21 mutações. Por outro lado, estudos clínicos prospectivos de tratamento de EGFR-TKI para pacientes com NSCLC com

EGFR

mutações, tais como NEJ002 e WJTOG3405, não demonstraram diferenças na resposta entre os pacientes portadores exon19 e exon21 mutações. Considerando esta situação, ainda não está resolvido se supressões EGFR exon19 são representam um fator prognóstico em geral positiva, independentemente da quimioterapia empregada. Somos a favor da interpretação que a quimioterapia à base de platina é mais eficaz contra ERCC1-negativo e exão 19-positivo NSCLC.

Considerando que a maioria dos pacientes com NSCLC com

EGFR

mutações beneficiar do tratamento com EGFR-TKI, a sua eficácia clínica de EGFR-TKI difere entre esses pacientes e quase todos os indivíduos eventualmente desenvolver resistência a estas drogas. Adquiriram resistência a fármacos alvo EGFR é um dos principais obstáculos à melhoria dos resultados clínicos neste campo. Imunocoloração para ERCC1 pode ser útil para estratificar pacientes com NSCLC de quimioterapias personalizados. Porque a detecção imunohistoquímica da proteína ERCC1 é simples e viável em um ambiente clínico, os nossos resultados poderiam ser amplamente aplicáveis ​​neste contexto. Nosso estudo sugere potencialmente promissoras opções de tratamento para pacientes com NSCLC que tiveram uma recaída após o tratamento de EGFR-TKI.

Houve limitações do presente estudo. Em primeiro lugar, o número de pacientes incluídos foi relativamente pequeno. Em segundo lugar, a natureza retrospectiva do estudo não permitir uma medida padronizada de PFS. Em terceiro lugar, adotamos a PNA (PNA) -locked nucleicos (LNA) Método braçadeira PCR para identificar as mutações EGFR. Este método é capaz de detectar 11 mutações diferentes na presença de um fundo de tipo selvagem de EGFR de 100 a 1000 vezes [16]. Estes 11 mutações responsáveis ​​por 95% de todas as mutações de EGFR encontrados em pacientes japoneses, o que sugere que os restantes 5% não pode ser detectado pelo método de fixação PNA-LNA de PCR [21]. Por isso, é possível que alguns pacientes nos quais foram detectadas mutações não podem, na verdade, ter abrigado mutações.

Em conclusão, nós descobrimos que o exão 19 deleção está associada com um mais PFS em doentes com NSCLC submetidos a quimioterapia à base de platina. Nossos resultados sugerem que a quimioterapia à base de platina é mais eficaz contra ERCC1-negativo e exão NSCLC 19-positivo. Mais estudos são necessários para esclarecer a utilidade clínica da análise imunohistoquímica de ERCC1 para a determinação do antineoplásico regime terapêutico ideal usando drogas-alvo EGFR.