Abstract

gástrica e colorretal (GC e CRC) tem mau prognóstico e são resistentes à quimioterapia e /ou radioterapia. No presente estudo, os efeitos profiláticos de celular (DC) a vacinação dendríticas são avaliadas na progressão da doença e os benefícios clínicos em um grupo de 54 GC e pacientes com CCR tratadas com imunoterapia DC combinado com assassino induzida por citocinas (CIK) células após a cirurgia, com ou sem quimio-radioterapia. As DCs foram preparados a partir de células mononucleares isoladas a partir de pacientes utilizando a IL-2 /GM-CSF e carregado com antigénios de tumores; células CIK foram preparados por incubação de linfócitos de sangue periférico com IL-2, IFN-γ, e anticorpos CD3. A terapia DC /CIK iniciado 3 dias após a quimioterapia de baixa dose e foi repetida 3-5 vezes em 2 semanas, como um ciclo, com um total de 188,3 ± 79,8 × 10

6 DCs e 58,8 ± 22,3 × 10

8 células CIK. os níveis de citocinas no soro dos pacientes antes e após os tratamentos foram medidos e o acompanhamento foi realizado durante 98 meses para determinar a sobrevivência livre de doença (DFS) e sobrevida global (OS). Os resultados demonstram que todas as citoquinas testadas foram elevados com níveis significativamente mais elevados de IFN-γ e IL-12 em ambos os GC e coortes de CRC de DC /CIK tratados pacientes. Através de análise de regressão de Cox, terapia DC /CIK reduziu o risco de progressão da doença pós-operatória (p 0,01) com um aumento do OS ( 0,01). Estes resultados demonstram que em adição à quimioterapia e /ou radioterapia, DC /CIK imunoterapia é uma potencial abordagem eficaz no controlo do crescimento do tumor para GC pós-operatório e os pacientes de CRC

citação:. D Gao, Li C, Xie X, Zhao P, X Wei, Sun W, et al. (2014) Tumor autólogo Lysate-Pulsed dendríticas imunoterapia celular com células assassinas induzida por citocinas melhora a sobrevida em gástricas e doentes com cancro colorectal. PLoS ONE 9 (4): e93886. doi: 10.1371 /journal.pone.0093886

Autor: Michael Lim, Johns Hopkins Hospital, Estados Unidos da América

Recebido: 01 de agosto de 2013; Aceito: 10 de março de 2014; Publicação: 03 de abril de 2014

Direitos de autor: © 2014 Gao et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Os autores não têm apoio ou financiamento para relatar

CONFLITO dE iNTERESSES:.. Endereço para correspondência Jian Jian Li é um membro do Conselho Editorial PLOS, e isso não altera a nossa adesão a PLOS ONE políticas e critérios editoriais

Introdução

O câncer gástrico (GC) e cancro colorectal (CRC) são as principais doenças malignas do trato alimentar. Enquanto GC é o câncer mais comum na região da Ásia-Pacífico, CRC está classificada como a quarta a nível mundial mais comum malignidade, com cerca de 1,2 milhões de novos casos e 609,051 mortes por ano [1]. A ressecção cirúrgica com ou sem quimioterapia adjuvante e /ou terapia de radiação continua a ser a chave para a modalidade de GC e CRC, mas infelizmente mostra benefícios clínicos limitados devido a uma elevada taxa de metástases tumorais. Embora a terapia quimio-radiação adjuvante corrente foi mostrado para prolongar a sobrevivência do paciente, na presença de lesões recorrentes [2], [3], os efeitos secundários graves normalmente limitar a eficácia desta modalidade anti-cancro [2] – [4]. Para melhorar ainda mais a sobrevivência global para a GC e pacientes de CRC, é crítico para explorar novas abordagens para controlar metástases de tumores, com ou sem o uso do tradicional quimio e /ou radioterapia.

As células dendríticas (DC) desempenham um papel fundamental na indução de respostas de células T específicas do antigénio para proporcionar imunoterapia activa [5] – [7]. Os estudos clínicos com vacinas de células de câncer DC-alvo projetados especificamente demonstrado diferentes benefícios clínicos. Os pacientes com linfoma [8], [9], melanoma metastático [10], [11], câncer de cólon e câncer de pulmão não-pequenas células [12] mostrou que a vacinação com DCs antígeno-pulsada tumorais, quer isolados directamente a partir de sangue ou gerado

ex vivo

a partir de precursores no sangue, provocou reacção imunitária específica do antigénio e, em alguns casos, as respostas significativas de tumor. Na verdade, a aplicação de um regime de imunoterapia activa, Sipuleucel-T (APC8015) usado por activação de células mononucleares de sangue periférico (PBMC) com uma fosfatase ácida prostática (PAP), uma proteína de fusão de antigénio de cancro da próstata, com GM-CSF, resultou aproximadamente 4 meses de sobrevivência mediana prolongada em pacientes com cancro da próstata [13] – [15], e foi aprovado pela FDA para o tratamento de cancros da próstata metastático [14], [16], [17]. células CIK são um subconjunto de linfócitos T assassinas naturais (NKT) que são predominantemente CD3

+ CD56

+ células NKT tipo II [18], e tais células pode ser gerada

ex vivo por incubação

linfócitos do sangue periférico com um anticorpo monoclonal anti-CD3 agonista, interleucina (IL) -2, IL-1 e interferão-β -γ (IFN). células CIK, apoiados por encorajadores resultados de ensaios clínicos em ambos os contextos autólogos e alogénicos, são conhecidos para eliminar cytolytically células tumorais [19]. Em contraste com assassino Lymphokine-activated actividade de células (LAK), que são células T efectoras citotóxicas estimuladas predominantemente em resposta à elevada concentração de interleucina-2 (IL-2), células CIK apresentam uma melhor tumoral lítica de células [20], [21 ], maior taxa de proliferação [22], e relativamente menor toxicidade [23]. Embora a imunoterapia passiva por transferência adoptiva de células T acredita-se ser eficaz no controlo de tumores primários, não é claro se a imunoterapia passiva é eficaz no controlo a longo prazo de recidiva tumoral [24]. Por outro lado, a imunoterapia activa com vacinas específicas do tumor, tais como a vacina DC, tem a vantagem potencial de aumentar significativamente as células efectoras e T de memória específicos de tumores. As respostas anti-tumorais desencadeadas por terapia DC /CIK foram relatados em um certo número de

ex vivo

[25] – [29] e

In vivo

[30], bem como estudos em ensaios clínicos preliminares em pacientes com linfoma não-Hodgkin e linfoma de Hodgkin [31], [32] e o cancro do pulmão de células não pequenas, com poucos efeitos colaterais [33]. No presente estudo, os benefícios clínicos são avaliada num grupo de 54 pacientes de CRC GC e tratados com imunoterapia combinada com DC células assassinas induzida por citocinas (CIK) após a cirurgia, com ou sem quimio-radioterapia. Os resultados demonstram taxas de DFS e OS melhorada com níveis elevados de IFN-γ e coortes de IL-12 em ambos os GC e CRC da DC /CIK tratados pacientes.

Pacientes e Métodos

Desenho do estudo , recrutamento de pacientes e coleta de dados

Foi realizado o estudo com pacientes tratados no Departamento de Cirurgia e Centro de Terapia Biológica, Hospital Central Qingdao, Qingdao, China 2005-2010 (Tabela 1). Os pacientes foram recrutados com os seguintes critérios: GC 1) 18 anos ou mais, 2) confirmou patologicamente ou CRC, 3) foi submetido à ressecção cirúrgica de tumores primários, 4) nenhuma evidência de metástase de tumor ou de reincidência antes de receber imunoterapia baseada em células, 5) ter completado a quimioterapia e /ou radioterapia por pelo menos 1 mês e 6) a assinatura do termo de consentimento. Os pacientes no grupo de controle foram recrutados com características patológicas demográficas e clínicas. Um total de 27 pacientes foram distribuídos aleatoriamente para imunoterapia baseada em células e 27 pacientes foram incluídos no grupo de controlo. Os tumores foram classificados de acordo com (UICC) de classificação da União Internacional Contra o Câncer baseado em subconjuntos pTNM. consentimentos informados de todos os doentes foram obtidos e os procedimentos do estudo foram revistos e aprovados pela ética Review Board do Hospital Central de Qingdao. Depois de imunoterapia baseada em células, todos os pacientes obtiveram acompanhamento por visitas hospitalares e /ou entrevistas por telefone em pelo menos a cada 6 meses. recorrência local do tumor e metástases à distância foram examinados pela imagem análises. DFS (sobrevida livre de doença, o intervalo de tempo entre a cirurgia ea recorrência do tumor) e OS (sobrevida global, o tempo entre a cirurgia e último follow-up) foram coletadas no banco de dados de pesquisa do projeto. DFS e OS taxas foram calculadas em ambos os grupos de tratamento e controle das datas da cirurgia e os acompanhamentos foram concluídas para todos os pacientes até agosto de 2011, incluindo os pacientes com 12 meses ou mais longo período após a imunoterapia.

vacina DC e terapia celular CIK

Uma dose de 1 × 10

6 unidades de IL-2 (Quangang Pharma Co. Shandong, China) em 250 ml de soro fisiológico foi preparada e por via intravenosa administrados aos pacientes em o grupo de tratamento, uma vez por dia durante 5 dias consecutivos. Três a seis dias após a IL-2 por injeção, as células mononucleares (4-6 × 10

9) foram coletadas a partir do total de 6-9 litros de sangue que circula pelo COBE Spectra Aférese System (Gambro BCT, Inc., Colorado, EUA ) e armazenado em 120-150 ml de plasma. Se as células mononucleares foram menos de 4 × 10

8 /litro, GM-CSF (150? G) foram subcutaneamente aplicado aos pacientes de uma vez por dia durante 1-3 dias antes de uma nova colecção de células mononucleares foi processada.

Antigen preparação

antígeno do tumor foi preparado seguindo o protocolo estabelecido [34], [35] a partir de células de câncer gástrico AGS humano ou câncer de cólon LS-174T. As células de tumor foram cultivadas durante 2-3 passagens (1-2 × 10

8), e recolhida, e lavada com solução salina normal durante 3 vezes, e lisadas por congelação-descongelação, três vezes, e analisadas com o rompimento de células ultrassónico. Os lisados ​​de células de tumor foram então fraccionados por centrifugação (1200 rpm x 5 min) e o sobrenadante foi recolhido e filtrado com um filtro de 0,22 (Carrighwohill, Co. Cork, Irlanda), e a concentração de proteína no sobrenadante foi medida antes do armazenamento a – 80 ° C.

Preparação do DC e CIK células

as células mononucleares foram isoladas das células coletadas de sangue periférico de GC e CRC paciente, seguindo um método estabelecido [36], [37] usando Ficoll (GE Healthcare Life Science, Xangai, China). As células isoladas foram suspensos em meio RPMI 1640 a uma concentração de 1 × 10

7 ml

-1 e cultivadas em 175 cm

2 frascos de cultura de células a 37 ° C, 5% de CO

2 para 2 hrs. As células aderentes foram cultivadas em meio de cultura isento de soro DC (CellGenix, Freiburg, Alemanha) contendo 20 ng /mL de interleucina 4 (IL-4) e 50 ng /mL de GM-CSF a 37 ° C, 5% de CO

2 para 6 dias. meio de cultura de DC contendo antigénio tumoral preparada foi em seguida adicionada em células de cultura a uma concentração final de 50 ug /ml, e foram cultivadas por mais 2 dias. DCs maduras foram examinadas por citometria de fluxo para marcadores DC CD83 e HLA-DR. As preparações foram testadas como bactérias e isenta de pirogénios. Uma porção da DC preparada foi infundido em pacientes e os restantes DCs foram armazenadas a -80 ° C. As células em suspensão foram cultivadas em meio RPMI 1640 (2 x 10

6 /mL) contendo 10% de SFB, 100 U /ml de IL-2, 300 U /mL de IFN-γ, 20 ng /anticorpo monoclonal mL CD3 (R ; D Systems, Minneapolis, MN, EUA), e 40 U /ml de gentamicina. No dia 8, uma porção das células foram analisadas por citometria de fluxo para marcadores de células CIK com anticorpos contra CD3, CD8, e CD56. As células foram, em seguida, mantido em solução salina normal com 1% de albumina, e o resto das células suspensões foram mantidas em cultura por mais 7 dias.

DC vacina e administração da célula CIK

Os pacientes no grupo de tratamento recebeu um ciclo de baixa dose de quimioterapia partida no dia após a coleta de células mononucleares com Carmofure (100 mg, po., bid) para 5~6 dias. A infusão de células DCs e CIK foi iniciado no dia 2 ou dia 3 após a quimioterapia. DC células preparadas foram divididas em duas partes: uma parte foi misturado com as células CIK em 250 ml de solução salina normal contendo 1.500 U /ml de IL-2 e 1% de albumina, e infundida no paciente intravenosamente. A outra parte foi suspenso em 1,5 ml de solução salina normal e injectadas por via subcutânea na área de drenagem de nodos linfáticos adjacentes aos locais tumorais. O tratamento foi repetido 3-5 vezes em 2 semanas, como um ciclo. Os pacientes com doenças em estágios avançados receberam 2 ciclos de tratamento, enquanto que os doentes em fase inicial foram tratadas com um ciclo. As respostas imunitárias de pacientes foram monitorizados antes e após o tratamento, medindo os níveis no soro de IFN-γ, IL-2, IL-6, IL-10 e IL-12, determinado por ELISA (R D systems, Minneapolis, MN, EUA). Os horários de preparação e infusão DC e CIK foram mostrado na Figura 1.

Os prognósticos de pacientes foram registrados até 98 meses após as datas de cirurgia em ambos os grupos de tratamento e controle.

a análise estatística

Os dados foram apresentados como porcentagens, significa com desvio padrão (média ± DP) ou mediana com intervalos de confiança de 95% (IC 95%). teste de qui-quadrado, t de Student ou Mann-Whitney, testes de Spearman linear ou de Pearson foram utilizados para análise, conforme apropriado. o resultado do tratamento foi analisado por curvas de sobrevivência de Kaplan-Meier com teste de log rank e Cox testes de regressão de riscos proporcionais multivariadas. A significância estatística foi estabelecido em p 0,05. Todas as análises estatísticas foram realizadas utilizando SPSS 16.0 para Windows (SPSS, Chicago, IL, EUA).

Resultados

Informação de base

Um total de 54 pacientes com histológico confirmou gástrica ou adenocarcinoma colorrectal foram recrutados aleatoriamente para este estudo que consiste em 27 pacientes em cada grupo. Os dados patológicos demográficas e clínicas dos pacientes nos grupos de tratamento e de controlo foram apresentados na Tabela 1. Metade dos pacientes no grupo de tratamento e todos os pacientes no grupo de controle tinham recebido pelo menos um ciclo de quimio-radioterapia antes da inscrição. Imunoterapia foi iniciado pelo menos um mês após o término da quimioterapia e /ou radioterapia e tempo de acompanhamento foi de 98 meses para todos os pacientes em grupos de tratamento e controle.

Características das células DC /CIK para infusão de células

O número médio de células infundidas em pacientes em um ciclo foi 188,3 ± 79 x 10

6 para DCs e 58,8 ± 22,3 × 10

8 para células CIK. As células que expressam DR /CD11c e CD83 (marcadores DC) ou de CD3 /CD8 e CD3 /CD56 (marcadores CIK) foram analisados. DCs preparados a partir de pacientes de GC foram de 88% -81% positivo para DR /CD11c, e 85% -71% positiva para CD83 (Fig. 2A, B). CIK células preparados a partir de pacientes por CG mostrou 73% -46% positiva para CD3 /CD8 e 42% -16% positiva para CD3 /CD56 (Fig. 2C e D). Além disso, DC preparado a partir de pacientes com CCR foram 87% -80% positivos para DR /CD11c, e 84% -71% positivas para CD83 (Fig. 3A, B), e células de CIK de pacientes com CCR foram de 75% -48% positivo para CD3 /CD8 e 41% -11% positiva para CD3 /CD56, respectivamente (Fig. 3C e D). A eficácia citolítica de células geral CIK de todos os pacientes foi melhorada -2,5 dobra. Estes resultados indicam que a maioria dos DCs e células CIK preparado a partir de pacientes eram maduros e funcionais.

Os níveis de citocinas após DC /CIK terapia

Nós examinados os níveis séricos de um grupo de citocina para cada paciente antes e depois de DC /tratamentos CIK (Figura 4 para GC (a) e CRC (B)). Os níveis de IL-2, IL-6 e IL-10 ligeiramente aumentada, sem significado estatístico no soro de pacientes de CRC e de GC (Fig. 4A, B). No entanto, IL-12 e IFN-y níveis séricos foram significativamente aumentados em ambos os pacientes de CRC e GC, indicando que a terapia DC /CIK podem especificamente promover uma resposta imune do tipo Th1 para mediar tumor matando efeito da terapia DC /CIK.

livre de doença sobrevivência (DFS) e sobrevida global (OS) dos pacientes após imunoterapia baseada em células

Como mostrado nas Figuras 5 e 6, DFS e OS foram ambos prolongou significativamente em pacientes em DC /grupos de tratamento CIK (GC: 5 anos taxa de DFS: 66%, a taxa de oS: 66%; CRC: 5 anos taxa de DFS: 66%, a taxa de oS: 75%) em comparação com os pacientes em grupos de controlo (GC: 5- ano de taxa de DFS: 34%, a taxa de OS: 34%; CRC: taxa de DFS de 5 anos: 8%, a taxa de OS: 15%; p 0,01). Para examinar a resposta diferencial de GC e CRC, analisou-se dois coortes (GC: p 0,05; CRC: p 0,01) e descobriram que CRC são mais sensíveis à terapia DC /CIK de GC. Além disso, a análise com regressão proporcional multivariada Cox confirmou que a terapia DC /CIK significativa e independentemente reduziu o risco de progressão da doença pós-operatório (relação Odd: 0,09, 95% CI: 0.02-0.42; p 0,01) ou um paciente deceases (Odd ratio: 0,05, 95% CI:. 0,01-0,37; p 0,01) após ajuste para idade, sexo, grau do tumor, estágios TNM, e quimioterapia anterior e /ou tratamentos de radiação

(A) A geral taxa de sobrevivência dos pacientes com câncer gástrico. As taxas de sobrevivência 1, 3 e 5 anos no grupo de tratamento foi de 93%, 82% e 66%, em comparação com o controle de 79%, 42% e 34%, respectivamente. sobrevida livre B) Doença dos pacientes com câncer gástrico. As taxas de sobrevivência 1, 3 e 5 anos nos grupos de tratamento (caixa vermelha marcada) foram de 86%, 73% e 66%, em comparação com o controle de 79%, 42% e 34%, respectivamente. As curvas de sobrevivência cumulativos em A e B foram analisadas pelo método de Kaplan-Meier.

(A) A taxa de sobrevida global dos pacientes com câncer colorretal. As taxas de sobrevivência 1-, 3- e 5-ano no grupo de tratamento foram de 100%, 77%, e 75%, em comparação com o controle de 85%, 23%, e 15%, respectivamente. (B) Doença de sobrevida livre dos pacientes com câncer gástrico. As taxas de sobrevivência 1-, 3- e 5-ano no grupo de tratamento foram de 100%, 69%, e 66%, em comparação com o controle de 69%, 15%, e 8%, respectivamente. As curvas de sobrevivência cumulativos em A e B foram analisadas pelo método de Kaplan-Meier.

Os efeitos adversos potenciais de célula com base na imunoterapia

O efeito adverso mais comum observado em todos os pacientes que receberam terapia DC /CIK foi a febre, que ocorreu em 9 de 27 pacientes tratados (33%) na faixa de 37,5-40 ° C. Todos os pacientes se recuperaram espontaneamente ou após o tratamento antipirético com a medicina não-esteróides. Não foram observadas outras complicações significativas que acompanham imunoterapia baseada em células.

Discussão

imunoterapia do cancro tinha mostrado uma eficácia potencial no controle do crescimento do tumor e sobrevida do paciente [14], [38], [39] como a notícia divulgada de que “em vez de usar a cirurgia, quimioterapia ou radioterapia, pesquisadores dos Institutos Nacionais de Saúde estão encontrando limitado assim agora, mas inspirando sucesso em uma nova abordagem para combater o câncer, usando o sistema imunológico para atacar os tumores do caminho seria um resfriado ou gripe. -CNN.com (Agosto de 2006) “. Apesar de extensivamente estudado em células e modelos animais, os dados clínicos sobre o benefício exato da imunoterapia na sobrevida do paciente ea progressão da doença continuam a ser investigado [17], [40]. Apesar do tamanho limitado de coortes, este estudo demonstra uma melhoria notável no controle pós-cirúrgico de taxas de recorrência e sobrevivência do tumor em GC e pacientes CRC tratados com terapia DC /CIK combinados. tem sido bem estabelecido que as células T ingénuas principais DCs e vacina DC combinados com terapia celular CIK alcançou promessa encorajadora como uma nova abordagem terapêutica para o controle da doença em cancros específicos [41]. DC [6], [7], [42] ter a capacidade para apresentar antigénios tumorais e linfócitos T para induzir as células T citotóxicas específicas contra os antigénios tumorais [43]. Sipuleucel-T, a primeira vacina DC, foi aprovada para aplicação clínica pelo FDA nos EUA para o tratamento de câncer de próstata castração-resistente metastático assintomático, melhorando OS dos doentes em fase III de ensaios [14]. resultados promissores adicionais foram relatados nos últimos ensaios de fase III utilizando vacina tumor para tratar vários tipos de câncer fase tardia [44], incluindo melanoma, linfoma folicular, CRC, e NSCLC. Estudos nas clínicas têm demonstrado que DCs capturar e processar antigénios associados a tumores e secretar citocinas para iniciar uma resposta imune [45].

Além vacina DC, cıks são induzidas por citocinas e possuem citotoxicidade não específica contra tumores [24]. células CIK podem matar directamente células tumorais, mas têm eficácia anti-cancro significativamente curto prazo e que são menos susceptíveis de controlar o desenvolvimento de tumor a longo prazo [24]. Em contraste, a vacina CC é mostrado para induzir células T efectoras da memória e específicos de tumores [24]. Portanto, a combinação de vacina de DC com o tratamento com CIK podem ter um potencial maior actividade citotóxica e a especificidade das células T efectoras, que mostra tanto a eficácia antitumoral de curto e longo prazo. De acordo com os benefícios clínicos observados em outros estudos clínicos [44], o nosso estudo sugere que o tratamento DC /CIK pode melhorar significativamente a sobrevida do paciente, o que levou o seu futuro investigação clínica.

Embora um número de citocinas pró-inflamatórias foram elevados em DC /CIK pacientes tratados, apenas duas citocinas Th1, IL-12 e IFN-γ, mostrou um aumento significativo nos soros dos pacientes neste estudo. Estudos demonstraram que o IFN-y e IL-12 desempenham papéis críticos na imunoterapia utilizando DC e CIK [28], [33]. As células tumorais são altamente heterogênea [46] e um tumor específico pode conter células com populações altas e baixas MHC-I [47], [48]. Curiosamente, a expressão de MHC-I mostra heterogéneo entre as células tumorais e radiação promove o reconhecimento imunológico das células tumorais por células do sistema imunológico através de MHC-I [49]. No entanto, provavelmente devido à heterogeneidade num determinado tumor, um único tipo de terapia imune só pode ser eficaz numa subpopulação de pacientes com cancro. Do mesmo modo, as células de tumor com maior expressão de MHC-I pode ser mais sensíveis à terapia com vacina DC, enquanto as células com menor expressão de MHC-I podem ser mortos por CIK. Os resultados reforçam que a terapia combinada DC /CIK pode promover a citotoxicidade das células tumorais, visando diferentes populações de células tumorais, tais como aqueles com vários níveis de MHC-I.

As doses de DC e CIK para os pacientes neste estudo foram determinados com base em teste de escalada dose anterior, e encontrado para ser seguro em todos os pacientes. Deve notar-se que, no presente estudo, os dados foram obtidos a partir de doentes tratados com um regime modificado, ou seja, antes da recolha de linfócitos por administração intravenosa de IL-2 para melhorar a função e número de linfócitos, o que pode contribuir com um papel significativo em DC /terapia CIK. Além disso, os pacientes também recebeu um ciclo de quimioterapia de dose baixa antes da infusão DC e CIK, que também podem afectar a eficácia global da terapia DC /CIK. Colocámos a hipótese de que um intervalo de 3 dias é crítica para “washout” suficiente do agente quimioterapêutico, de modo a não afectar a eficácia de infusa DC e CIK. Os pacientes no grupo de controlo tinham sido previamente tratados com, pelo menos, um ciclo de quimioterapia, comparáveis ​​aos doentes incluídos no grupo de imunoterapia (Tabela 1 e as Figuras 5, 6). Os efeitos potenciais de baixo quimioterapia de dose antes da infusão de células [28] também pode induzir a morte das células do tumor, sobre-regular a expressão do antigénio do tumor e contribui para a composição de células imunitárias do hospedeiro. Portanto, mais estudos serão conduzidos com grupos maiores de pacientes. Em conclusão, este estudo clínico indicam que a combinação da vacina contra a DC e terapia CIK podem melhorar significativamente a sobrevida livre de doença em pacientes com câncer gástrico e colorretal.

Reconhecimentos

Agradecemos ao Dr. William Murphy e Dr. Cheikh Menaa no centro abrangente cancro NCI-concebido, da Universidade da Califórnia em Davis para discussões úteis, e com o apoio prodigiosa de médicos e enfermeiros no centro da bioterapia, Qingdao Hospital Central.