Abstract

integrina ανβ6 é altamente expressa em uma variedade de cancros humanos e freqüentemente se correlaciona com a sobrevida do paciente. Este estudo analisa as correlações entre a expressão ανβ6 e características clínico-patológicas de pacientes em fase B e fase C do cancro retal, incluindo a sobrevida global. Expressão de ανβ6 foi medida em 362 Stage B ou amostras de tecido de câncer retal C na região central do tumor, frente tumor invasivo e adjacente mucosa utilizando imuno-histoquímica não-neoplásica. Distribuição de ανβ6 verificou-se ser significativamente mais elevada na frente invasiva em comparação com as regiões centrais do tumor (p 0,001) ou na mucosa, não neoplásico adjacente (p 0,001) sugerindo ανβ6 desempenha um papel na invasão de células de tumor. No entanto, a expressão da integrina ανβ6 não foi associado com características clínico-patológicas ou sobrevida global, indicando que não é um marcador de prognóstico independente diferenciar Fase B ou câncer retal C. ανβ6 estudos anteriores sugeriram que a expressão de ανβ6 está envolvida nos estádios iniciais (isto é, fases A /B) de progressão do tumor, em vez de nas fases posteriores (ou seja, Fases C /D). No entanto, nosso estudo revelou que na expressão câncer retal ανβ6 não aumenta entre as Fases B e C, mas pode ocorrer mais cedo, ou seja, antes ou durante o cancro Stage B

Citation:. Ahn SB, Mohamedali A, Chan C , J Fletcher, Kwun SY, Clarke C, et ai. (2014) Correlações entre a integrina ανβ6 Expressão e Características clínico-patológicas na Fase B e C Stage câncer retal. PLoS ONE 9 (5): e97248. doi: 10.1371 /journal.pone.0097248

editor: Ju-Seog Lee, da Universidade do Texas MD Anderson Cancer Center, Estados Unidos da América

Recebido: 11 de novembro de 2013; Aceito: 16 de abril de 2014; Publicado: 12 de maio de 2014

Direitos de autor: © 2014 Ahn et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Este trabalho foi apoiado pelo Centro BioFocus Research, Universidade Macquarie e doações de NHMRC (1010303) e Câncer NSW Conselho. Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

a classificação da gravidade do câncer colorretal (CRC) está baseada na determinação clínica e histológica de extensão da disseminação do tumor. As células de tumor pode ser localizado dentro da parede do intestino (estádio A), que se estende para além da túnica muscular (Fase B), ou metastizado para os nódulos linfáticos (Fase C) ou órgãos distantes (estádio D). Cinco ano estatísticas de sobrevivência CRC mostram uma redução significativa na sobrevivência entre a Fase B e C, correspondendo a diferença de linfonodo metástase [1]. Embora estadiamento clínico-patológico é a técnica padrão actual para a determinação do prognóstico, a utilização de novos biomarcadores de proteína expresso ou amplificado num modo específico do estágio durante a progressão pode aumentar a precisão e fiabilidade de determinações histológicas. A combinação de um sistema de som de preparo CRC e presença de proteína biomarcadores de prognóstico tem sido proposta como uma abordagem mais eficaz para orientação diagnóstico, prognóstico e tratamento [2].

Um potencial biomarcador de prognóstico proposto recentemente é o ανβ6 integrina. Esta proteína é altamente expressa em muitos tipos de cancros e tem sido sugerida para ser um indicador de prognóstico pobre de sobrevivência no CRC, adenocarcinoma gástrico e carcinoma escamoso cervical [3] – [6]. Integrina ανβ6 é um receptor transmembranar de composto αν e β6 subunidades ligadas não covalentemente, desde que os parceiros de subunidade β6 exclusivamente com αν e é expressa apenas em tecidos epiteliais [7]. ανβ6 é frequentemente concentrada em tumores pouco diferenciados proximal para invasores margens de cancro [8] – [11]. Também tem sido identificada como um factor importante na

“epitelial para mesênquima transição”

(EMT) que se caracteriza pela perda de adesão celular, a repressão de E-caderina e aumento da motilidade celular durante a progressão do carcinoma [12] . ανβ6 integrina é pensado para operar de um modo complexo, iniciando célula cascatas de sinalização, enquanto também interagir com a matriz extracelular chave (ECM) proteínas e activação de sinais de crescimento, tais como a transformação latente β1 do factor de crescimento (TGF-p 1), um indutor reconhecido de EMT [3 ], [13]. Em apoio a esta afirmação, a inibição mediada pelo anticorpo da activação de TGF-β1 mediada por ανβ6 suprime EMT [14]. Além disso, a integrina ανβ6 tem mostrado desempenhar um papel vital em um modelo de EMT CRC esferóide mediada através da activação de TGF-β1 e subsequente migração de células na fibronectina intersticial [11].

Em contraste com a maioria das outras integrinas, ανβ6 sinais através de um 12-mer sequência citoplasmática C-terminal única que interage directamente com a quinase regulada por sinal extracelular (ERK-2) activação da via /MAPK ERK que é frequentemente altamente sobre-expresso em CRC metástase [15]. O β6 • interacção ERK2 também é responsável por mediada por integrina de metaloprotease de matriz 9 (MMP9) de secreção (meio de MAPK) que permite que a degradação de ECM, facilitando a fuga de células [16], [17]. Em resumo, ανβ6 é um regulador de metástase e é encontrado a ser sobre-expressos em muitos fenótipos cancerosas. Enquanto o corpo de evidências implicando ανβ6 na metástase é substancial, atualmente nenhum estudo examinou quando se torna sobre-expressos ou se existe correlação entre ανβ6 e sobrevida do paciente em câncer retal. Neste estudo, examinamos especificamente a expressão imuno-histoquímica de ανβ6 em 362 pacientes com câncer retal Fase B ou C na região central do tumor, a frente invasiva e mucosa não-neoplásica adjacente.

Materiais e Métodos

coorte paciente

Todos os pacientes foram submetidos a ressecção cirúrgica para câncer retal em Concord Hospital, um hospital de referência terciária em Sydney, Austrália, entre Janeiro de 1988 e dezembro de 2001. Todas as ressecções foram realizadas por cirurgiões colorretais especializadas na sequência de um técnica padronizada (dissecção anatômica total) [18]. O reto foi definida como incluindo a junção retossigmoide mas excluindo o canal anal. Os dados clínicos dos pacientes foram inseridos em um banco de dados prospectivo iniciado em 1971, incluindo informações sobre as características do paciente, comorbidade, apresentação, investigações, tratamento cirúrgico, complicações, terapia adjuvante, patologia e acompanhamento [19], [20]. O Projeto CRC em Concord Hospital é realizada sob a aprovação do Comité de South Western Area Sydney Saúde Ética (CH62 /6 /2011-136) com autorização por escrito de acordo com as exigências da Lei de Tecidos NSW Humano 1983 ea Demonstração NHMRC Nacional de Conduta Ética em Pesquisa em Seres Humanos de 2007. o estudo também aprovado pelo Comité de Macquarie University Humano Ética (# 5201100858). Os pacientes que receberam radioterapia neoadjuvante tiveram tratamento quer de curta ou longa claro, com ou sem quimioterapia associada. Seleção para o tratamento foi baseado nos achados clínicos e discussão em uma reunião multidisciplinar.

O exame anatomopatológico do espécime extirpado

Exame de espécimes ressecados seguido um protocolo padrão [1]. O tamanho do tumor foi medido como a maior dimensão da superfície. Os blocos foram utilizados para demonstrar a penetração máxima do tumor directa da parede intestinal. blocos adicionais foram tomadas para demonstrar especificamente a relação entre o tumor e qualquer estrutura de tecido aderente ou [21], bem como linhas de ressecção e a superfície serosa livre [22]. nível do tumor no recto foi medida a partir da margem anal. invasão venosa pelo tumor que se refere ao envolvimento das veias com paredes grossas ou finas, seja dentro ou fora da parede do intestino. Quando a dúvida existia quanto ao facto de a estrutura envolvida era uma veia, um resultado negativo foi registrado. Um nó apical foi definida como a mais proximal de todos os nós encontrados dentro de um centímetro da ligação de um navio indicado no ápice do pedículo vascular. grau do tumor foi avaliado tendo em conta o grau de diferenciação e anaplasia, a natureza da margem do tumor (ou empurrando infiltrante) e a presença e a proeminência da invasão vascular [19]. sistema de todas as características patológicas foram analisados ​​em cada amostra e presença ou ausência explicitamente registada, sem dados perdidos em qualquer variável.

Os tumores foram classificados de acordo com o estadiamento clínico-patológico australiano (SACP) [1] para CRC, que acomoda sub-estágios compatíveis com outros sistemas de estadiamento clínico-patológicas, como TNM [23]. Uma operação potencialmente curativa foi definido como aquele em que não houve metástases sistêmicas no momento da operação e nenhum tumor identificados histologicamente na proximal, distal linhas ou circunferenciais de histologicamente ressecção (ACPS Fases A, B, C).

Tissue microarrays construção

Tissue microarrays (TMA) foram construídas utilizando um Advanced Tissue Arrayer ATA-100 (Chemicon, Temecula, CA, EUA). Núcleos (1,5 mm) foram tomadas a partir cuidadosamente selecionados áreas, morfologicamente representativos dos blocos de parafina originais e vestiu em blocos de parafina receptor feitas na hora. Os núcleos foram tomadas a partir da região central do tumor (evitando superfícies luminais), a frente invasivo do tumor e na mucosa histologicamente normais.

A imuno-histoquímica (IHC)

Um anticorpo monoclonal de murino (mAb) contra o comprimento total ανβ6 humana (clone 6.2A1, IgG1) (Biogen Idec, Cambridge, MA, EUA) foi utilizado em IHC. A especificidade do anticorpo monoclonal anti 6.2A1-ανβ6 foi avaliado em diversos estudos [14], [24] – [26]. Todas as secções TMA foram preparadas e processadas em simultâneo com o mesmo lote de anticorpos primários e secundários e reagentes de coloração, obviando a necessidade de implantar um padrão interno. O IHC foi realizada com dois sistemas diferentes de amplificação de detecção: um complexo de avidina-biotina (ABC) e um sistema de detecção de IHC por base um polímero. Para ABC IHC, 4 mm seções TMA embebidos em parafina foram deparaffinised e reidratadas e peroxidase endógena bloqueada com 3% H

2O

2 em metanol durante 5min. A recuperação de antígenos foi realizada utilizando pepsina (DAKO, Carpinteria, CA) a 37 ° C durante 10 min. As secções foram incubadas com soro de cavalo (Vector Laboratories, Burlingame, CA), solução de bloqueio (15 ul /ml) em TBS-Tween 20 durante 20 min à temperatura ambiente (TA) e depois incubadas com 0,5 mg /ml de mAb anti-ανβ6 à TA durante 60 min . As secções foram incubadas com IgG de ratinho anti-biotinilado (Vector Laboratories) durante 20 min à RT e incubaram-se com o reagente Elite ABC (Vector Laboratories) durante 20 min à TA. Entre cada incubação, lavagem TBS foi realizada duas vezes. substrato de 3,3′-diaminobenzidina em 0,05 M de Tris-HCl (pH 7,4) foi aplicado para a intensidade 5 minutos e aumentada por secções a incubar em CuSO

4 durante 5 min. os núcleos das células foram contrastadas com hematoxilina de Mayer (Sigma, St. Louis, MO). à base de polímero IHC realizada numa bond-Max Autostainer (Leica Microsystems, Bannockburn, IL) como descrito [27], excepto que a recuperação de antigénio foi realizado com pepsina e 6.2A1 anti-ανβ6 MAb (0,5 ug /ml), utilizado como um primário anticorpo. Isotipo IgG1 (R D Systems, Minneapolis, EUA) foi usada como um controlo negativo

IHC avaliação

A imunorreactividade para ανβ6 foi avaliada por dois avaliadores independentes (SBA, cc), com 100. % de concordância, que eram cegos para o status clínico-patológico do paciente. intensidades de coloração foram pontuadas separadamente para a região central, frente tumor invasivo e mucosa normal e classificada como 0 = nenhuma coloração, 1 = coloração fraca, 2 = coloração intermediária e 3 = forte coloração. Se a intensidade da coloração foi heterogênea em qualquer núcleo de tecido único, a intensidade de coloração predominante foi gravado.

variável e resultados de acompanhamento do paciente

O resultado do tempo de sobrevivência global foi medida a partir da data da ressecção cirúrgica a data de morte por qualquer causa, com tempos de censura para os pacientes perdidos para follow-up ou que permaneceram vivos no fim do estudo. Os pacientes foram acompanhados anualmente até a morte ou a 31 de Dezembro de 2011. Os detalhes do protocolo de acompanhamento foram previamente descritos [18].

Análise Estatística

O teste do qui-quadrado ou exato de Fisher de teste foram usadas para examinar a significância estatística das diferenças de proporções. O Wilcoxon pares combinados assinado teste fileiras foi utilizado para comparar as distribuições de expressão ανβ6 frequência entre o tumor central, tumor frontal e mucosa normal. Comparações de tempo de sobrevivência entre os estratos de expressão ανβ6 e co-variáveis ​​foram feitas com o método de Kaplan-Meier e teste log-rank e também de regressão de Cox e Wald p. co-variáveis ​​contínuas e multi-categoria foram dicotomizados em pontos de corte convencionais ou não apropriadas. Como estágio clinico-patológico é o mais forte preditor de prognóstico, associações com sobrevivência foram examinadas para a Fase B e C separadamente, bem como para as duas fases combinadas, a fim de identificar quaisquer diferenças de efeitos de ανβ6 entre fases. O nível de significância estatística de duas caudas foi p ≤ 0,05 com intervalos de confiança (IC) no nível de 95%. As análises foram realizadas com SPSS versão 20 (IBM Australia Limited)

Resultados

A partir dos 1.804 ressecções Concord Hospital CRC entre Janeiro de 1988 e Dezembro de 2001, foram excluídos na seguinte sequência:. Aqueles pacientes com câncer de cólon (1022), CRC anterior (20), doença inflamatória intestinal ou

polipose coli (9), um parente de primeiro grau com CRC (65) e Stage a ou D tumor (289), deixando 399 pacientes potencialmente disponíveis para avaliação da ανβ6 neste estudo. No entanto, 37 destes pacientes tinha insuficiente tecido de arquivo disponível para avaliação, deixando 362 que estavam avaliável. Um número variável de estes tiveram um resultado não informativo para uma ou mais das avaliações ανβ6 (indicados quando apropriado nas Tabelas subsequentes). Na comparação entre os 362 pacientes que tiveram um resultado em uma ou mais das avaliações ανβ6 com o 37 que não puderam ser avaliados, não houve diferenças significativas em toda a gama de variáveis ​​clínico-patológicas examinado. Assim, os 362 pacientes avaliados apareceu a ser representativa do conjunto total de 399 pacientes de onde foram tiradas. As características clínico-patológicas destes 362 pacientes são apresentados na Tabela 1.

A expressão de ανβ6 integrina na Fase B e amostras de tecido de câncer retal C

Para comparar a distribuição de ανβ6 intensidade de coloração entre, câncer retal frontal central e tecido epitelial histologicamente normal, e por causa dos números variados de pacientes com resultados informativos sobre cada avaliação, a Wilcoxon pares combinados assinado teste fileiras foi realizada em pacientes que tiveram um resultado informativo em ambas as avaliações de cada par. A distribuição da intensidade da coloração ανβ6 foi significativamente mais elevada no córtex frontal em relação ao centro de tecido (n = 259, p 0,001); significativamente mais elevadas no córtex frontal em relação ao tecido normal (n = 302, p 0,001); e ligeiramente maior na região central em comparação com a mucosa aparentemente normal (n = 253, p = 0,049) (Tabela 2). As intensidades de ανβ6 expressão entre o cancro rectal Fase B e C tecidos mostrou nenhuma diferença em cada valor marcado (Figura 1). A ligação não específica foi examinado utilizando os AcM de controlo do isotipo relevante e foi mostrado em todos os casos ser inconsequentes.

Não houve diferença nos padrões de coloração dentro de cada valor marcado (0 ou 1 ou 2 ou 3) entre o cancro rectal fase B e tecidos C. (C): controle negativo IgG1. Barra de escala:. 200 um

Acompanhamento detalhe

Em 110 (30,4%) pacientes que não tinham morrido, o tempo de sobrevida variou de 103 meses a 245 meses, com uma médio de 171 meses. Em 243 (67,1%) pacientes que tinham morrido, o tempo de sobrevida variou de 2 dias a 243 meses com uma mediana de 45 meses. Em 9 (2,5%) pacientes que foram perdidas, tempo de seguimento variou de 3 a 178 meses com uma mediana de 51 meses.

A expressão de ανβ6 e pacientes sobrevivência

sobrevida de Kaplan-Meier parcelas demonstraram que a sobrevida global não foi significativamente relacionado à central ou frontal ανβ6 expressão, quer para a Fase B e C combinada ou separadamente (Figura 2 e Tabela 3).

a sobrevida global de 362 pacientes com câncer retal (fase combinada b e C) não foi significativamente relacionada com a (a) ou frontal (b) a expressão ανβ6 central.

a expressão de características ανβ6 e clínico-patológicos

a avaliação da correlação entre a expressão da integrina ανβ6 e características clínico-patológico indicou que a expressão ανβ6 não foi associada a qualquer característica clinico-patológico (Tabela 3).

características clínico-patológicos da Fase B e C doente com cancro rectal

a sobrevida global foi significativamente diminuída em pacientes com 75 anos ou mais velhos, aqueles que tiveram uma operação de Hartmann, aqueles com tumores anel mucinoso ou signet, quando um nó de linfa apical estava envolvido, quando ≥4 nós estavam envolvidos, aqueles com tumor Fase C , em tumores de grau elevado, na presença de invasão venosa, quando um órgão ou estrutura adjacente tinha sido infiltrado por tumor, e em pacientes que não receberam quimioterapia adjuvante. Associação entre características clínico-patológicas e sobrevida global nos 362 pacientes são apresentados na Tabela 4.

Detecção de ανβ6 usando polímero à base de IHC

polímero à base de IHC foi realizada soley para detectar ανβ6 perdeu pelo teste ABC IHC. Este foi um instrumento de investigação para determinar única ανβ6 intensidade de coloração e não foi utilizado para avaliar a sobrevida do paciente. Uma comparação de distribuições de integrina ανβ6 intensidades de coloração das duas técnicas de IHC demonstraram que ανβ6 expressão utilizando o polímero à base de IHC ocorreram em mais do que 90% de todos os tecidos dos pacientes em todas as avaliações (Tabela 5).

Discussão

neste estudo, nós demonstramos que a distribuição da expressão da integrina ανβ6 foi significativamente maior na frente invasiva do tumor em comparação com a região central do tumor (p 0,001) ou na mucosa histologicamente normais (p 0,001) em 362 cancros rectais Fase B e C. no entanto, as características clínico-patológicas e sobrevida global não foram estatisticamente associadas à expressão ανβ6 integrina. Esta observação contrasta com os relatórios anteriores que sugerem que a expressão ανβ6 é frequentemente associada a uma pior sobrevida em vários tipos de câncer [3], [6], [11], [26], [28]. No entanto, outros estudos ανβ6 foram realizados em tumores em várias fases (ou seja, Fases A a D), enquanto que nosso estudo incidiu apenas sobre Stage B e C e pela primeira vez exclusivamente em amostras de câncer retal.

CRC é uma doença devastadora cuja proteína molecular biosignatures estão lentamente a ser explorado. Uma compreensão e detecção destes podem ajudar a oportuna diagnóstico, prognóstico e tratamento da CRC [2]. É bem sabido que a metástase é a principal causa de mortalidade e uma das principais causas da falha de terapias anti-cancerosas [29]. Na verdade, ficou estabelecido que a histologicamente mudança observável fenotípica de um não-metastático (Fase B) para metastático nodal (Fase C) está correlacionada com a sobrevivência pobre [1]. A nível molecular, o interruptor de células de cancro epitelial de um para um fenótipo mesenquimal é acoplado com a degradação de ECM e outros processos biológicos fundamentais que facilitam a metástase. reguladores-chave que pode modulam estes processos biológicos são a perda de E-caderina, a activação de TGF-β1, aumenta em sistemas proteolíticos, como as MMPs, activador de urocinase de plasminogénio (uPA) e o receptor de uPA (uPAR) [13], [30]. Importante, integrina ανβ6 está fortemente associada com muitos dos processos esses reguladores de agir, incluindo a via de MAPK, uma das vias de sinalização primários implicados na transformação, proliferação, invasão e metástase de CRC [3], [31]. Por exemplo, ανβ6 activa de TGF-β1, libertando desta proteína a partir de um complexo inactivo [3]. Não é surpreendente, portanto, que ανβ6 é abundante principalmente na proliferação de células epiteliais onde ativa e promove “drivers” de metástase. O nosso trabalho não publicado recentes sugerem que ανβ6 interage com outras proteínas, encontrado sobre-regulada em CRC (por exemplo, uPAR), e este foi agora confirmado pelo ensaio de ligação e proximidade matriz péptido. Não se sabe se a interacção com outras moléculas podem modular a biologia de ανβ6 dado que uPAR é um receptor da superfície celular multifuncional envolvida em ambos degradação de ECM e de sinalização celular [32], assim como sendo um factor de mau prognóstico de sobrevivência CRC [ ,,,0],33].

Não só os nossos resultados recapitular estudos anteriores que demonstram a expressão ανβ6 na proliferação de células epiteliais, mas eles confirmam que ανβ6 é epitelial-restrito no cancro rectal. Estudos anteriores demonstraram que a expressão ανβ6 foi concentrada na borda de invasão de tumor de ovário e carcinomas de células escamosas orais [8], [9], [34]. Nossos resultados confirmam que ανβ6 também é mais altamente expresso na frente invasiva no cancro rectal do que nas regiões centrais de tumores do reto e /ou ανβ6 sugerindo mucosa normal desempenha um papel crucial na invasão de células tumorais.

Este estudo centrou-se em delinear se na expressão câncer retal de ανβ6 poderia ser um marcador de transição de um tumor da Fase B à Fase protocolos de coloração C. dois IHC foram realizados e os dados do IHC baseado no ABC confirmou que integrina ανβ6 não foi um marcador prognóstico independente nessas duas etapas , nem foi correlacionada com qualquer característica clinico-patológico estudado. Este resultado foi ao contrário das expectativas, porque ανβ6 já teve uma correlação positiva com a sobrevida do paciente em uma variedade de cânceres. Especificamente, ανβ6 tem sido identificada como um indicador de prognóstico de sobrevivência pobre em CRC [11], adenocarcinoma gástrico [6], [26] e cervical carcinoma escamoso [28], em que os estudos de CRC e de carcinoma gástrico foram baseadas no estágio de tumor I através IV eo carcinoma escamoso cervical estava em pacientes identificados como FIGO Estágio IA através IIB (equivalente a TMN Stage I-II). A partir desse estudo CRC (n = 488) [11], Gráficos de Kaplan-Meier demonstrou que ανβ6 foi fortemente associada com a sobrevivência nos tumores iniciais fase (Fase I-II), mas não para os tumores em fases avançadas (Fase III-IV). Da mesma forma, um estudo de 300 pacientes com carcinoma gástrico [26] revelou que ανβ6 foi um fator de risco potencial, tanto inicial (fase I-II) e fase tardia (Fase III-IV), com a sobrevivência mais significativamente associados em mais cedo do que mais tarde. Um estudo recente carcinoma gástrico (n = 51) [6] ανβ6 também demonstrou foi um fator prognóstico pobre, mas a sobrevivência não foi significativamente associada com o estágio. Além disso, o estudo cervical (n = 85) [28] indicou ανβ6 é um fator prognóstico desfavorável em pacientes entre FIGO Stage IA2-IB1 e IB2-IIB. Em geral, é sugerida a expressão de ανβ6 estar envolvido nas fases anteriores de progressão do tumor, em vez de as fases posteriores, no entanto, os nossos dados tem revela que a expressão ανβ6 não aumenta entre o cancro rectal Fases B e C, mas pode ocorrer mais cedo.

Além disso, a comparação de dois protocolos de coloração alternativos (polímero de base versus um método ABC IHC) mostrou que o método de amplificação à base de polímero mais sensível detectada expressão ανβ6 em quase todas ( 90%) do cancro rectal Fase B e tecidos C. Estes dados também suporta que a expressão ανβ6 pode ocorrer mais cedo do que anticiptaed na progressão CRC, ou seja, antes ou durante o cancro Stage B.

Estudos anteriores encontraram expressão ανβ6 é baixa ou indetectável em epitélios adulto normal, mas é altamente expressa durante cura e /ou cancro da ferida [3], [8], [34], potencialmente explicar porque ανβ6 está a ser explorada como um alvo interessante para a imagiologia e terapia de [35] do cancro. Aqui, ανβ6 foi observada em quase todos mucosa rectal normais histológica menos do que 1-2 cm da margem do tumor (i.e., mucosa não-neoplásica adjacente, sugerindo que as alterações associadas EMT-estão ocorrendo em que o tecido). A observação de que, aparentemente, adjacente mucosa não-neoplásica expressa outros antigénios envolvidos na progressão do cancro (por exemplo, EMT) é suportado por um estudo que demonstra marcadores EMT (α-actina de músculo liso CARACOL) e EMT-indutores (MMP2 TGF-β3 ) são amplamente expressos em tecidos normais histologicamente proximais para margens do tumor da mama (isto é, = 1 cm de distância) embora seja apenas escassamente expressos a uma distância de 5 cm a partir dos mesmos margens do tumor [36]. Este estudo está bem alinhada com as nossas observações atuais de ανβ6 ser expressas dentro de 1 cm de margens de câncer retal, como ανβ6 também é conhecida por estar envolvida na EMT [14].

Em conclusão, integrina ανβ6 é mais freqüentemente expressa na frente invasiva do câncer retal. Embora provavelmente desempenha um papel importante na progressão do tumor, este integrina não age como um marcador de prognóstico independente em rectal estágio do câncer B e C. Mais estudos são necessários para delinear proteínas diferencialmente expressos em diferentes estágios de câncer retal.

Agradecimentos

os autores agradecem Paul H. Weinreb e Sheila M. Violette, de Biogen Idec Inc., Cambridge Center, Cambridge, MA 02142, EUA por gentilmente proporcionando o anticorpo 6.2A1 contra o avp6 integrina.