Abstract

PLZF é um repressor da transcrição, que desempenha um papel crucial no desenvolvimento, espermatogênese e oncogênese. A sub-regulação de PLZF foi encontrado em várias linhas de células de tumor. Não houve praticamente nenhum estudo dos tecidos na expressão de PLZF em cancro da próstata (CaP). PCA é uma doença heterogênea, a maioria dos quais são indolentes e não-letal. Actualmente não há biomarcadores que distinguem indolente de CaP agressiva; portanto, há uma necessidade urgente de tais marcadores para fornecer apoio à decisão clínica. Este estudo teve como objetivo investigar a expressão de PLZF por imuno-histoquímica em grau diferente, bem como CaP metastático e correlacionar a alteração da expressão PLZF com PCA agressividade. Foram estudados um total de 83 CaP primária a partir de biópsias, o PCA 43 metastático e 8 pares de CaP primário e metastático da prostatectomia radical com dissecção de linfonodos. Os nossos resultados demonstraram que a PLZF foi fortemente expresso em quase todos os (~ 100%) as células luminais benignas (n = 77) e de baixo grau (padrão de Gleason 3) PCA (n = 70) e fraca ou ausente (100%) em células basais ( n = 70). expressão diminuída ou perdida de PLZF foi evidenciado em 26% de alto grau (Gleason 4 e 5) CaP primário (n = 70) e 84% CaP metastático (n = 43). A primária de alto grau CaP nas prostatectomies compartilhada semelhante perda PLZF /diminuição e histomorfologia ao de metástases linfáticas paralelo emparelhados. Estes dados demonstram que a regulação negativa de PLZF é um processo molecular importante para a progressão do tumor e perda de expressão PLZF detectado por imuno-histoquímica de rotina é um biomarcador promissor e valioso para CaP agressividade e metástase no atendimento personalizado do CaP.

citação: Xiao GQ, Unger P, Yang Q, Kinoshita Y, Singh K, McMahon L, et al. (2015) Perda de PLZF Expressão em cancro da próstata por imuno-histoquímica se correlaciona com Tumor Agressividade e metástase. PLoS ONE 10 (3): e0121318. doi: 10.1371 /journal.pone.0121318

Editor do Academic: Natasha Kyprianou, da Universidade de Kentucky College of Medicine, United States |

Recebido: 02 de dezembro de 2014; Aceito: 30 de janeiro de 2015; Publicação: 25 de março de 2015

Direitos de autor: © 2015 Xiao et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

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financiamento:.. Esses autores não têm apoio ou financiamento para relatar

Conflito de interesses:. os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

o câncer de próstata (PCA) é o câncer mais comum entre os homens nos Estados Unidos [1]. Com a crescente consciência pública da APC, o uso generalizado dos níveis de antígeno (PSA) no soro específico da próstata como uma modalidade de triagem, e ultra-sonografia trans-retal para alvejar lesões específicas, prostática de agulha biópsias têm resultado em aumento da detecção clínica do cancro. PCA é uma doença heterogénea, a maioria dos quais tem um comportamento benigno [2,3]. Apesar de melhorias na detecção precoce, atualmente não há biomarcadores confiáveis ​​para distinguir eficazmente homens com doença de alto risco da maioria indolente e tem-se argumentado há décadas que um grande número de CaP pode ter sido overtreated [2,4,5]. Por conseguinte, existe uma necessidade urgente de uma tal biomarcador que possa ser utilizado para identificar CaP agressivo e iniciar o tratamento curativo precoce.

leucemia promielocítica proteína de dedo de zinco (PLZF), também conhecido como Zbtb16 ou Zfp145, identificado pela primeira vez em um paciente com leucemia promielocítica aguda, é um factor de dedo de zinco de transcrição que pertence à família POZ-Krüppel (POK) que se liga a sequências de ADN específicas com os seus dedos de zinco carboxi-terminal e suprime a transcrição através do recrutamento de co-repressores com o seu terminal amino POZ domínio [ ,,,0],6,7]. Funcionamento no núcleo, PLZF afecta sinalização diverso incluindo ciclo celular, diferenciação e morte celular programada em células hematopoiéticas [7], assim como, mais recentemente, tumores sólidos [8-10], e tem sido mostrado para ser envolvido na grande processos de desenvolvimento e biológicos, tais como a espermatogênese e haste de manutenção celular, formação de membro posterior, hematopoiese, regulação imune, e oncogênese [6,7,11,12]. A perda de PLZF tem sido relacionada com o aumento da proliferação, capacidade de invasão e motilidade, e resistência a apoptose em diferentes tipos de linhas celulares de cancro [8]. Recentemente, PLZF foi encontrado para ser sub-regulada em carcinoma de células não-pequenas do pulmão [13], mesotelioma maligno [9] e melanoma maligno [8,10]. A sobre-expressão de PLZF em linhas de células cervicais humanos e linhas de células mesoteliais inibe o crescimento celular através da indução de apoptose [14]. Para o nosso conhecimento a expressão de PLZF praticamente não foram estudadas em tecido de cancro da próstata. O objetivo deste estudo foi investigar a expressão de PLZF no primário, bem como CaP metastático por imuno-histoquímica e correlacionar a alteração da expressão PLZF com PCA grau, agressividade, bem como metástase.

Materiais e Métodos

1. As amostras de tecido

Este estudo foi realizado após aprovação pelo conselho de revisão institucional e de acordo com a garantia protocolado e aprovado pelo conselho de revisão comissão de ética /institucional da Universidade de Rochester e Mount Sinai School of Medicine. Este é um estudo imuno-histoquímico isenta de amostras arquivadas e não contém qualquer informação paciente identificável e a necessidade de consentimento livre e esclarecido foi dispensada. A próstata é um órgão fibromuscular sólido com crescimento para dentro do epitélio glandular, que não é facilmente permeável ao fixador formalina. Para evitar o possível efeito de fixação do tecido desigual e sub-óptima de preservação antigénio e recuperação, bem como sobre os resultados imunohistoquímicos subsequentes, material de biópsia do primário, bem como o cancro da próstata metastático foi escolhida para este estudo, excepto para oito casos de prostatectomias radicais com pélvica dissecção de linfonodos. Todas as amostras de biópsia da próstata e prostatectomia e a maioria dos próstata metastático Ca tecidos foram coletadas e estudou na Universidade de Rochester Medical Center, NY. Vinte por cento dos casos de CaP metastático eram de Mount Sinai Medical Center, em Nova York. Todos os casos eram de pacientes diferentes. Os espécimes foram rotineiramente fixado em formalina a 10% tamponada neutra e embebido em parafina.

Houve um total de 83 biópsias da próstata, cada um com um volume de tumor variando entre 10 a 100%, entre os quais 13 casos tiveram um total de Gleason marcou 6, 57 casos tiveram uma pontuação 7, 7 casos tem uma pontuação 8 e 6 casos tiveram uma pontuação 9/10. epitélio glandular benignas estavam presentes em 77 das 83 biópsias de próstata e estavam ausentes nas restantes 6 biópsias. Quarenta e três casos foram cancro da próstata metastático com um volume de tumor variando entre 5% e 95%, entre os quais 22 eram metástases ósseas, 11 metástase de nodos linfáticos, 7 metástases hepáticas e 3 metástases pulmonares. Oito emparelhado CaP a partir de amostras de prostatectomia e seus gânglios linfáticos paralelas também foram incluídos no estudo. Os oito carcinomas da próstata primários em prostatectomies radicais teve um total de pontuação de Gleason variando de 7 a 9 com uma pT3a estágio do tumor ou pT3b. As metástases linfáticas variou de 1 mm a 3 mm em sua maior dimensão. A distribuição dos casos estão resumidos na Tabela 1.

2. Imunohistoquímica

Na sequência desparafinização e reidratação, cobrado lâminas com 5 mícrons de espessura de tecido foram tratados com 3% de peróxido de hidrogênio (H

2O

2) para eliminar a atividade da peroxidase endógena, então processado para o antígeno recuperação com 10 mM de tampão de citrato de pH 6,0 usando uma panela de pressão (Pascal; Dako Cytomation, Glostrup, Dinamarca) durante 1 minuto a 125 ° C, seguido de arrefecimento lento. O resto do procedimento foi realizado num instrumento automatizado DAKO. Todas as secções foram lavadas com solução salina tamponada com fosfato (NaCl a 137 mM, cloreto de potássio 2,7 mM, fosfato de sódio 4,2 mM e fosfato de potássio 1,5 mM) e feito reagir com PLZF anti-anticorpo de ratinho (D-9; SC-28319, Santa Cruz Biotechnology , Santa Cruz, CA) durante 1,5 horas à diluição de 1: 500 em solução salina tamponada com fosfato contendo 1% de albumina de soro bovino (BSA) e soro de cabra normal a 5% à temperatura ambiente. As secções foram então incubadas durante 20 minutos com rábano EnVision + sistema de polímero marcado com peroxidase conjugada com o anticorpo secundário anti-ratinho biotinilada e o substrato de 3,3′-diaminobenzidina. Todas as lâminas foram contrastadas com hematoxilina, desidratadas, ea tampa escorregou.

3. Análise de imuno coloração

próstata adenocarcinoma, estroma, bem como células luminais e células basais de glândulas prostáticas benignas foram analisados ​​para PLZF imunorreactividade de uma forma semiquantitativa. Apenas coloração nuclear de PLZF foi considerado positivo. Com base na extensão e intensidade da imunorreactividade, a coloração foi classificada as- (negativo /ausente), 1 (fraca), 2 (moderada) ou 3 (forte /intensa). Cada padrão individual de Gleason foi avaliada separadamente para a sua rotulagem nuclear com PLZF de tumor na próstata, e pela simplicidade, padrão 4 de Gleason (G4) e de Gleason 5 (G5) foram combinados em análise. A pontuação de Gleason não foi utilizado para CaP metastático. A coloração celular lunimal forte e células basais fracos ou não-reativos (ver seção de resultados para o detalhe) foram utilizados como controle positivo e negativo, respectivamente.

4. A análise estatística

O Teste Jockheere-Terpstra [15] foi utilizado para avaliar a tendência entre a pontuação expressão da proteína e do tipo de câncer. O teste determinou se as fileiras esperados para as pontuações de expressão de proteínas e tipos de câncer mudou monotonamente. Após o teste de tendência, comparações de pares foram olhou para a expressão da proteína em colapso em Negativo /Weak (negativo e 1) e moderada /forte (+2 e +3) e associando isto com pares de tipos de câncer usando teste exato de Fisher 2-atado . Todas as análises foram realizadas utilizando software /STAT SAS, versão 9.3 do sistema SAS (Copyright: © julho de 2011, SAS Institute Inc) em uma plataforma Windows 7.

Resultados

1. Expressão de PLZF no epitélio glandular prostática benigna

Entre as 83 biópsias de próstata, setenta e sete contido benigna da próstata epitélio glandular. PLZF foi expresso moderadamente ou fortemente nos núcleos das células luminais das glândulas prostáticas benignas, contudo, fraca ou nenhuma expressão foi detectada em qualquer um dos núcleos ou citoplasma das células basais ou de células do estroma em todos os 77 casos (Fig. 1a).

A. glândulas prostáticas benignas com imunoreactivity forte nuclear em células luminais (seta) e rotulagem fraco ou negativo nas células basais (seta). B. mancha forte no padrão de 3 + 3 glândulas CaP de Gleason. C. mancha forte nas glândulas G3 PCA (seta), mas mancha fraco ou negativo nas glândulas G4 PCA (seta). D. Perda de PLZF nas glândulas G4 de padrão de Gleason 4 + 4 PCA (seta). glândulas benignas com forte coloração em células luminais (seta). E. mancha forte no G3 CaP glândulas (seta) e mancha ausente em glândulas G5 CaP (seta) de padrão de Gleason 3 + 5 CaP. F. mancha negativa no tipo Comedo PCA (G5). G. mancha negativa em um caso representativo de metástase óssea do CaP. H. mancha negativa em um caso representativo de metástases em linfonodos do CaP. I. mancha negativa em um caso representativo de metástases hepáticas. hepáticos benignos também mostra mancha PLZF nuclear. J. mancha negativa em um caso representativo de metástase pulmonar. K. PLZF expressa em G3, mas não G4 glândulas de CaP primária de uma prostatectomia. L. O metástases em linfonodos paralela mostra morfologia semelhante e mancha PLZF negativo para as glândulas G4 PCA as principais glândulas G4 APC no K.

2. Expressão de PLZF no câncer de próstata primário da próstata biópsia

Entre os CaP primária nas biópsias da próstata, houve um total de 70 indivíduos Gleason 3 e 70 individuais padrão de Gleason 4/5. Gleason padrões 4 e 5 foram analisados ​​em conjunto, principalmente devido ao seu comportamento biológico semelhante, bem como a ausência de diferença imunocoloração óbvia entre estes dois padrões. PLZF foi expressa diferencialmente em intensidade no adenocarcinoma da próstata primário de padrões de Gleason 3 e 4/5. Semelhante às células luminais das glândulas prostáticas benignas, PLZF foi moderadamente ou fortemente expressa em todas as glândulas tumorais de padrão de Gleason 3 (Fig 1B.): 45 apresentaram imunorreactividade 3 e 25 apresentaram duas positividade. Em 3 casos, a maioria do G3 CaP glândulas apresentados com mancha PLZF forte, mas minoritária com reactividade PLZF fraco ou negativo focal. Em contraste, entre os 70 CaP primária de padrão de Gleason 4/5, 24 (34%) apresentaram +3, 28 (40%), com 2 e 12 (17%) com fraco (+1) imunorreactividade. perda completa da expressão PLZF foi visto em 6 (9%) destes casos (Fig. 1D-F). Houve 5 casos, em que a maioria do G4 /5 glândulas PCA apresentaram com mancha PLZF fraco ou negativo, mas uma minoria tinha focal moderada a reactividade PLZF forte. Estes APC com expressão fraca ou perda de PLZF representaram 18/83 (22%) de todos os casos de CaP primárias e 18/70 (26%) de alto grau (Gleason 7-10) CaP primário.

3. Expressão de PLZF em metastático cancro da próstata

A grande maioria do APC metastático não fez ou teve apenas fracamente expressão PLZF (Fig. 1G-J). Dos 43 CaP metastático, 29 não tinham expressão PLZF (15 osso, 8 linfonodo, 5 ao vivo e um pulmão), 7 apresentaram expressão PLZF fraco (5 osso, 1 fígado e 1 de pulmão), moderada a forte imunorreactividade do PLZF foi visto em 7 casos (2 ósseas, três nodos linfáticos, um fígado, um pulmão). Em geral, a perda ou diminuição da expressão significativamente de PLZF foi observada em 84% de adenocarcinoma da próstata metastático independentemente do local metastático.

4. Os resultados da análise estatística

O Teste Jockheere-Terpstra revelou uma tendência negativa (Z = -9,1568, p 0,0001), indicando que o câncer metastático mais agressivo tiveram as piores pontuações de expressão de proteínas, enquanto Gleason pontuação de 3 ou 4 /5 tiveram escores mais elevados de expressão de proteína. Da mesma forma, as associações negativos altamente significativas foram encontradas quando a pontuação proteína recolhido foi comparado entre G3 e G4 /5, G3 e cancro metastático, e G4 /5 e cancro metastático. (Todos p. 0,0001, Tabela 2, Fig 2)

5. Expressão de PLZF em CaP metastático de linfonodos e seu paralelo primária CaP

Para olhar para qualquer correlação entre a expressão PLZF em CaP primário e metastático APC, oito emparelhado CaP primária em amostras de prostatectomia e sua correspondente metastático CaP na linfa nós foram estudados para a expressão imuno-histoquímica de PLZF. Os resultados mostraram que a expressão de PLZF na próstata variaram em diferentes graus com moderada a expressão mais elevada em baixo grau (G3) CaP e diminuído ou perdido a expressão em foco /focos de alto grau (G4 /5) PCA (Fig. 1K) o foco /focos de CaP primária com expressão diminuída ou perdida de PLZF correspondeu à CaP metastático emparelhado no linfonodo através da partilha de perda PLZF semelhante /diminuir, bem como padrões morfológicos semelhantes (Fig. 1D). A imunofenotipagem e dados patológicos do APC primário e metastático dos oito prostatectomies radicais com dissecção de linfonodos pélvicos estão resumidos na Tabela 3.

Discussão

Apesar de enormes esforços têm sido dedicados em busca de biomarcadores de prognóstico eficazes que são capazes de prever a agressividade do câncer de próstata, pouco progresso tem sido feito para o uso prático. De longe, o biomarcador mais estudado para este fim é PTEN, um supressor de tumor conhecido [16-23]. deleções genómica do locus de PTEN em 10q23, mais vulgarmente identificado por FISH, ocorrer em 10% a 70% dos cancros da próstata, dependendo da população estudo examinou [16-23]. Alguns estudos têm demonstrado a perda genômico de PTEN a ser associado com comportamento mais agressivo, a progressão de tumores e metástases cedo, mas outros não encontraram tal associação [23-25]. Tendo em conta que o teste FISH é incómoda e não detecta epigenética, bem como a expressão do gene de pós-transcricional alteração relacionada, ensaios de imuno-histoquímica têm recentemente sido usada para avaliar a expressão de PTEN no cancro da próstata e a sua relação com a agressividade do tumor. Os resultados inconsistentes no entanto foram relatados [21, 23, 26-33]. A falta de anticorpos fiáveis ​​contra PTEN tem sido considerado como um dos factores que atribuam. PTEN imunorreactividade foi mostrado no núcleo e citoplasma das células epiteliais, bem como nas células do estroma de tecido da próstata [28] e não houve qualquer consenso sobre a pontuação imunocoloração, bem como sobre a interpretação dos resultados imunohistoquímicos PTEN; quando a correlação com os parâmetros clínico-patológicas é realizada, coloração PTEN citoplasmática é utilizado por alguns autores [27, 34], enquanto que a reatividade nuclear é usado por outros [23]. Além disso, a imunocoloração promíscuo no núcleo e citoplasma das células epiteliais, bem como células do estroma pode também têm tornado difícil distinguir específica de reacções inespecíficas. Além disso, a qualidade da preservação de tecido, um fator freqüentemente negligenciado, tem sido conhecido por afetar os resultados de imuno-histoquímica [35, 36]. A fim de correlacionar os resultados de expressão de PTEN para o estágio do tumor, a maioria dos estudos anteriores amostras de prostatectomia utilizado, incluindo o tecido prostatectomia derivado TMA (tissue microarray). Como referido acima, glândula da próstata é principalmente um órgão fibromuscular sólido com uma baixa permeabilidade ao fixador; Portanto, a menos que seja dada atenção especial, fixação do tecido abaixo do ideal é um problema comum para espécimes de prostatectomia, que, posteriormente, possam afetar a preservação antígeno do tecido e pode, pelo menos em parte, explicar os resultados inconsistentes em alguns dos estudos de imuno-histoquímica de PTEN em CaP. Como resultado, o valor clínico de PTEN imunohistoquímico na avaliação da agressividade do cancro da próstata é ainda sob avaliação.

PLZF, um modulador do gene semelhante a PTEN, funciona como um repressor de transcrição. Estudos anteriores de PLZF foram focado principalmente em seu papel na espermatogénese, caule manutenção de células e leucemia promielocítica [6,7,11,12]. O nosso estudo em próstata demonstraram que, em comparação com o moderada a forte expressão imuno-histoquímica em células luminais benignas da próstata e de baixo grau (padrão 3 de Gleason) do cancro da próstata, a expressão de PLZF foi significativamente diminuído ou perdido em grande maioria (84%) de câncer de próstata metastático e em 26% dos high primária grau CaP. Estes resultados indicaram que a perda de PLZF foi um passo importante na progressão de tumores e metástases. Uma fracção (26%) de alto grau primário (G4 /5) cancro da próstata apresentada com uma perda significativa de expressão PLZF também parecer encaixar no cenário clínico real, em que apenas uma parte de alta progresso Gleason CaP e desenvolver metástases ao longo dos seus cursos . O 26% destes primária de alto grau CaP com diminuição ou perda da expressão PLZF em nosso estudo significativa poderia, portanto, na verdade, representam uma parcela do CaP agressivo que desenvolvem metástases no momento mais tarde. Havia ocasionalmente casos com expressão PLZF variável nas mesmas glândulas Gleason ‘score PCA a mesma biópsia, o que é consistente com a heterogeneidade intratumoral do CaP.

Para melhor elucidar se a diminuição ou perda da expressão PLZF em CaP primária correlacionada com a do CaP metastático, estudou-se o padrão de expressão de imuno-histoquímica de PLZF em ambos CaP primário na próstata e o emparelhado CaP metastático em dissecados nódulos linfáticos pélvicos do mesmo paciente. Os nossos resultados mostraram que as alterações de expressão de PLZF, bem como a morfologia do foco /focos de alto grau primário CaP na próstata foi correlacionada com a do nódulo linfático pélvico CaP metastático. Esta descoberta reforçou a associação de perda PLZF com a progressão da APC e implicado um valor prognóstico de perda PLZF em CaP primária na previsão de seu potencial metastático. Na prostatectomia e linfonodo dissecação emparelhado, o PLZF expressão variável (- /+ 1 /+ 2 /+ 3) no G4 primário /5 glândulas CaP pode refletir a variabilidade da apresentação de antígenos devido à fixação abaixo do ideal dos espécimes de prostatectomia, no entanto, , proporcionalmente, o PLZF nos focos de G4 /5 CaP são menos expressos do que a focos de G3 CaP.

Como demonstrado neste estudo, PLZF foi expressa quase que exclusivamente no núcleo das células luminais e fraco ou ausente nas células basais e células estromais da próstata. Este fundo limpo não só tornou mais fácil para interpretar os resultados de positividade, mas também serviu como excelentes controles positivos e negativos. Estas foram as vantagens óbvias de PLZF sobre PTEN. Além disso, em comparação com a perda de PTEN em 10-70% de CaP [16-23], a sensibilidade de perda de PLZF de CaP metastático foi de 84% no nosso estudo, enquanto que a especificidade de perda de PLZF em prever nenhuma metástase de baixa qualidade (Gleason 3) foi 70/70 (100%) ou, no mínimo, 67/70 (94%) quando se leva em conta a perda focal menor. Precisamente quantos do alto grau (G4 /5) APC não conseguem desenvolver metástase é quase impossível de verificar, em casos humanos; No entanto, se uma parte do princípio que todo o grupo de 52 (74%) G4 /5 casos de CaP primárias que não apresentam perda de PLZF carece potencial metastático, a especificidade de PLZF em previsão de metástases seria muito mais elevada do que a relatada 50% para PTEN [ ,,,0],37].

Nós examinamos a expressão de PLZF usando Oncomine (Life Technologies), bem como os dados subjacentes GEO em cinco conjuntos de dados de câncer de próstata estratificadas pelo grau de Gleason. Nenhuma associação aparente é evidente, nem ao examinar os diagramas de caixa expressão estratificadas (S1 fig.), Nem os dados subjacentes quando vestia como parcelas cachoeira (S2 Fig.). Da mesma forma, quando se examina cinco conjuntos de dados acessíveis ao público em cBioPortal [38, 39], não há forte associação entre a pontuação de Gleason (S3 Fig., Três principais conjuntos) ou T-estágio (S3 Fig., Fundo dois conjuntos) e deleção homozigótica, amplificação, nem a mutação do gene que codifica a PLZF (ZBTB16) pode ser discernido. Além disso, não houve associação aparente foi observada entre as alterações no número de cópias e a expressão de ARNm putativos PLZF nestes conjuntos de dados acedidos através cBioportal (dados não mostrados). A discrepância entre os dados genômicos e de expressão e nossos resultados de coloração imuno-histoquímica sugere um envolvimento de epigenética e /ou alterações pós-transcricional no câncer de próstata agressivo e suporta um papel mais informativa para análise proteômica imuno-histoquímica do produto final de um gene em elucidar sua função /biológica das consequências na compreensão e previsão do comportamento do tumor.

Embora o papel exato do PLZF no epitélio da próstata é desconhecida, a expressão constitutiva de PLZF nas células luminais e ausente em células basais das glândulas prostáticas benignas é uma reminiscência de andrógeno receptor, e infere fortemente uma associação de PLZF com receptor de andrógeno. De fato, em um

in vitro

estudo de linhas de células APC, PLZF é encontrado para ser um gene andrógeno responsivo prostática [40]. PLZF é regulada por androgénio na linha celular LNCaP que responde-androgénio, mas não na linha celular negativa do receptor de androgénio DU145 [41]. A sobre-expressão de PLZF na linha celular LNCaP inibe a proliferação celular tanto na ausência e na presença de androgénios [40]. PLZF expressão endógena está ausente na linha celular independente de androgénios CaP DU145 e a sua expressão pode ser restaurada pela expressão ectópica do receptor de androgénio, mas isso não é verdade na linha celular dependente de androgénio LNCaP [41, 42]. Os resultados destes estudos in vitro de linhas de células apoiam uma relação entre PLZF e a actividade do receptor de androgénio, e indicam que o equilíbrio entre o receptor de androgénio pró-proliferativa e acção inibidora de PLZF pode desempenhar um papel crucial na manutenção da homeostase da próstata benigna epitélio. A perda de actividade de PLZF em APC, pode resultar na actividade do receptor de androgénio for controlada, que conduza a um crescimento proliferativo. Embora os mecanismos subjacentes da perda de PLZF e progressão tumoral relacionada, bem como o seu papel na CaP independência de androgénio ainda têm de ser investigadas, estes dados nos motivou para examinar a expressão PLZF em cancros da próstata com vários graus (escores de Gleason), bem como de próstata metastático cancros.

em resumo, nosso estudo demonstra que a perda de imuno-histoquímica de PLZF é um biomarcador sensível e específico na detecção de CaP agressivo e metastático. No entanto, nós também gostaríamos de salientar que o âmbito do presente estudo é limitado e é necessário um estudo maior escala para validar os resultados. Se ainda validado, devido à simplicidade e custo-efetividade, teste imuno-histoquímico de expressão PLZF em CaP terá um impacto significativo e ser de utilidade clínica na gestão e no atendimento personalizado dos pacientes CaP na prática diária. PLZF imuno-histoquímica também pode ser combinado com PTEN para fornecer maior poder de predição da progressiva CaP. Prospectivamente restaurar PLZF nestes CaP agressivo também pode ter valores terapêuticos potenciais, invertendo seus cursos.

Informações de Apoio

S1 Fig. Não há alterações no mRNA PLZF no câncer de próstata.

PLZF expressão (ZBTB16) foi examinada em cinco conjuntos de dados de câncer de próstata estratificadas pelo grau de Gleason, disponível em Oncomine. Apenas conjuntos de dados com 10 ou mais casos de Gleason 8 e 9 foram analisados. Os diagramas de caixa retratam expressão, estratificada por pontuação Gleason dizer. Estratificação em colunas por Gleason pontuação indicada na legenda abaixo (com número de casos indicados entre parênteses). Note-se que a comparação adequada é entre Gleason score 7 e mais baixo contra a escala de Gleason 8 e ou 9, e não a primeira coluna para conjuntos de 1-4, que mostra amostras para as quais uma pontuação não estava disponível

doi:. 10.1371 /journal .pone.0121318.s001

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S2 Fig. Sem aumento da frequência de casos de reduzida expressão de mRNA PLZF no câncer de próstata de alto grau.

PLZF expressão (ZBTB16) foi examinada em cinco conjuntos de dados de câncer de próstata estratificadas pelo grau de Gleason, disponível em Oncomine. Apenas conjuntos de dados com 10 ou mais casos de Gleason 8 e 9 foram analisados. parcelas Cachoeira retratar os dados individuais subjacentes analisados ​​no S1 Fig. e retratam a expressão média, estratificada por escore de Gleason. Estratificação em colunas por Gleason pontuação indicada na legenda abaixo (com número de casos indicados entre parênteses). Note-se que a comparação adequada é entre Gleason score 7 e mais baixo contra a escala de Gleason 8 e ou 9, e não a primeira coluna para conjuntos de 1-4, que mostra amostras para as quais uma pontuação não estava disponível

doi:. 10.1371 /journal .pone.0121318.s002

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S3 Fig. Não há mutações ou alterações genéticas PLZF no câncer de próstata.

Rompimentos da PLZF gene que codifica (ZBTB16) foram examinados nos indicados cinco conjuntos de dados disponíveis em cBioportal. As alterações são indicadas em parcelas abaixo do nome estudo: a eliminação homozyogous (barras azuis); amplificação (barras vermelhas); mutação (barras verdes). Soma de todas as alterações detectadas foi de 0%, 4%, 1%, 2% e 4% (de cima para baixo) nos estudos descritos

doi:. 10.1371 /journal.pone.0121318.s003

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Reconhecimentos

Agradecemos ao Sr. Xing Qiu da Bioestatística Programa-Universidade de Rochester por sua assistência na análise estatística.