Abstract
Objetivos
fosforilada AKT (p-AKT), ativação constitutiva de AKT, é um marcador de prognóstico e terapêutico alvo potencialmente interessante no cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC). No entanto, os resultados disponíveis de expressão p-AKT em NSCLC são heterogêneos. Por isso, foi realizada uma meta-análise de pesquisas publicadas investigando a relevância prognóstico da expressão p-AKT em pacientes com NSCLC.
Materiais e Métodos
Uma busca na literatura via PubMed, EMBASE e CNKI (China Knowledge Nacional de Infra-estrutura) bancos de dados foi realizada. Dados de estudos elegíveis foram extraídos e incluídos em meta-análise utilizando um modelo de efeitos aleatórios.
Resultados
Um total de 1049 pacientes de nove estudos foram incluídos na meta-análise. Nove estudos investigaram a relação entre a expressão da p-AKT e sobrevida global usando análise univariada, e cinco destes empreendeu análise multivariada. A taxa de risco de pool (HR) para a sobrevida global foi de 1,49 (intervalo de confiança de 95% (CI): 1,01-2,20) por análise uni e 1,02 (95% CI: 0,54-1,95) por meio de análise multivariada.
Conclusão
Nosso estudo mostra que a expressão positiva de p-AKT está associada com mau prognóstico em pacientes com NSCLC. No entanto, adequadamente desenhados estudos prospectivos precisa executar
Citation:. Qiu ZX, Zhang K, Qiu XS, Zhou M, Li WM (2013) o valor prognóstico da fosforilada AKT Expressão em Non-Small Cell Lung Cancer: Uma meta-análise. PLoS ONE 8 (12): e81451. doi: 10.1371 /journal.pone.0081451
editor: Srikumar P Chellappan, H. Lee Moffitt Cancer Center Research Institute, Estados Unidos da América
Recebido: 29 Julho, 2013; Aceito: 12 de outubro de 2013; Publicação: 05 de dezembro de 2013
Direitos de autor: © 2013 Qiu et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados
Financiamento:. Este trabalho foi apoiado por subsídios da Nature Science Foundation da China (30771227, 81241068), e Programa de Apoio à Tecnologia da Ciência e Tecnologia Departamento da província de Sichuan (2011SZ0194). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito
CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes
Introdução
o câncer de pulmão é um dos cânceres humanos mais comuns e a principal causa de mortes relacionadas ao câncer com câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC), representando aproximadamente 80% de todos os cânceres de pulmão primários. Apesar dos avanços na cirurgia, quimioterapia e radioterapia, a taxa de sobrevida em 5 anos de paciente com NSCLC é de apenas 15% [1]. Assim, a falta de grandes melhorias na taxa de sobrevida em 5 anos de NSCLC tem impulsionado a busca de novas estratégias destinadas a melhorar a gestão do cancro do pulmão. O conhecimento atual sobre NSCLC não é uma única doença, mas um conjunto de doenças com patogênese distintas por mecanismos moleculares. Mudanças de genéticas e epigenéticas desempenham um papel fundamental na transformação, promoção e progressão do câncer. Portanto, a compreensão da biologia do câncer de pulmão e encontrar os marcadores moleculares pode útil para prever a sobrevivência e auxiliando no manejo de pacientes com NSCLC [2].
A ativação do AKT proteína de transdução de sinal intracelular prosurvival, ou proteína quinase B , é uma proteína quinase serina /treonina, tem sido proposto como um evento de sinalização central na carcinogénese [3]. O papel de AKT na carcinogénese tem sido bem documentada e overexpressions de AKT são encontrados numa variedade de tipos de cancro humano [4,5]. Além disso, AKT tem sido associada com a iniciação da tumorigênese em gliomas [6] e cancro pancreático [7] e parece correlacionar-se com a fase e o grau do tumor no cancro da próstata [8]. AKT fosforilado (p-AKT) é a forma activação constitutiva de AKT que é um poderoso promotor da sobrevivência das células, uma vez que antagoniza e inactiva várias componentes da cascata apoptótica, tais como a caspase-9 [9], Bad [4], e a transcrição forkhead membros fator de família [10]. Além disso, AKT tem sido implicado na regulação da angiogénese [11] e metástase [12], os quais são dois processos importantes no desenvolvimento do tumor.
O efeito de anormalidades expressão de p-AKT tem sido investigada para NSCLC utilizando univariada ou análise multivariada, no entanto, o significado prognóstico da expressão de p-AKT em doentes com NSCLC permanece controverso. Com base nos resultados discordantes obtidos pelo número de estudos, foi conduzida esta meta-análise para quantificar o impacto prognóstico da expressão p-AKT sobre a sobrevida global em pacientes com NSCLC.
Materiais e Métodos
literatura Pesquisa
Uma busca na literatura via PubMed, EMBASE e CNKI (China Knowledge Nacional de Infra-estrutura) bancos de dados foi conduzida para encontrar artigos que avaliaram o papel em NSCLC (Última pesquisa foi atualizado em 7 de julho de 2013). As palavras-chave e palavras de texto foram usadas como se segue: (1) fosforilada AKT ou fosforilação de AKT ou de fósforo por AKT ou p-AKT, e (2) o cancro do pulmão de células não-pequenas ou NSCLC, e (3) análise ou expressão de prognóstico ou sobrevivência .
Critérios de Seleção
todas as línguas foram incluídos, e todos os artigos elegíveis que examinaram a associação entre a expressão de p-AKT e sobrevida global foram recolhidas. No entanto, os papéis que têm apenas resumos foram excluídos devido a dados insuficientes para meta-análise. Portanto, nós primeiro ler os títulos das publicações e os resumos para encontrar exatamente aqueles artigos que examinaram a relação entre o p-AKT e sobrevida global em pacientes com NSCLC. Após os resumos satisfeitas estas condições, foram analisados os textos completos e incluídos em nossa meta-análise de acordo com os seguintes critérios: (1) os estudos foram escritos como trabalho completo; (2) os níveis de p-AKT de expressão foram comparação com a sobrevivência global do paciente; (3) expressão das proteínas foram avaliados em tecidos de tumores por imuno-histoquimica (IHC) ou a transcrição e da reacção em cadeia da polimerase análise (RT-PCR) inverter; (4) As taxas de risco (HR) e 95% de CI para a sobrevida global foram ou poderiam ser calculado a partir dos dados suficientes; (5) se o mesmo grupo de pacientes foram utilizados para analisar mais de uma vez, a pesquisa mais completa foi selecionado para o nosso estudo.
Data Extraction
Dois revisores (Qiu Zhi-Xin e Kui Zhang) verificados de forma independente todos os artigos e extraíram os dados em bancos de dados separados. As seguintes informações foram coletadas de cada estudo: Nome do primeiro autor, ano de publicação, etnia, tamanho da amostra, a metodologia de laboratório, valor de corte, tabagismo, tipo histológico, estadiamento clínico e RH com IC 95%. Discordâncias foram resolvidas através de discussão entre os autores.
Análise Estatística
A intensidade da relação entre os níveis de p-AKT e sobrevida global de expressão foram descritas como horas. A expressão positiva de p-AKT indicado mau prognóstico em pacientes com NSCLC se HR 1 com o IC 95% não se sobrepõem 1. A partir de alguns estudos publicados, RH e IC 95% poderia ser obtido diretamente por meio de análise de sobrevivência univariada ou multivariada. Caso contrário, RH e 95% CI foram calculados pelas curvas de sobrevivência de Kaplan-Meier, usando o software Engauge digitador Versão 4.1 (https://digitizer.sourceforge.net/) eo método apresentado por Parmar et al. antes [13,14]. Em seguida, os dados extraídos foram utilizados para reconstruir o RH e sua variância (GraphPad Software, Inc, La Jolla, CA, EUA).
O HR reunidas correspondente ao IC 95% foi utilizado para avaliar o valor prognóstico da AKT ou p-AKT em pacientes. A heterogeneidade estatística foi testada pelo teste Q de Cochrane (teste do qui-quadrado; Chi
2) e inconsistência (I
2) [15,16]. Se não houve heterogeneidade óbvio, foi utilizado o modelo de efeitos fixos (método de Mantel-Haenszel) para estimar o HR reunida; caso contrário, foi utilizado o modelo de efeitos aleatórios (DerSimonian e método definido) [13]. gráfico de funil e do método de correlação de Begg foram projetados para avaliar o risco de viés de publicação. STATA 12.0 (Stata Corp., College, TX) foi utilizado para realizar a análise estatística.
Resultados
Estudo de seleção e Características
22, oito e dois artigos foram recuperados a partir PubMed, EMBASE e CNKI banco de dados eletrônico de acordo com as nossas palavras-chave definidas e palavras de texto, respectivamente (Figura
1 |). Em seguida, através de cuidadosa leitura dos resumos, 14 pesquisas que se concentravam sobre a associação entre a expressão de p-AKT e sobrevivência foram incluídos em nosso processo de revisão de texto completo. Depois de ler as pesquisas de texto completo, 5 trabalhos tiveram de ser excluídas porque os dados não foram extraível ou não poderia fornecer informações suficientes sobre a sobrevida global. Finalmente 9 estudos, incluindo 1049 casos estavam disponíveis para a nossa meta-análise. Entre todos os estudos incluídos, 7 papéis estavam em Inglês e 2 papéis eram chineses.
A característica individual das pesquisas elegíveis estão resumidos na Tabela 1, 5 estudos incluíram pacientes da Ásia, 2 da Europa e 2 da América, respectivamente. Expressões de p-AKT foram todos detectados por meio de IHC. De acordo com a análise univariada, 3 estudos, desde que o HR com 95% CI directamente, 6 estudos mostraram curvas de sobrevida que está disponível para calcular o HR. No entanto, 4 estudos, desde que o HR com 95% CI directamente, um estudo mostrou curvas de sobrevida que está disponível para calcular o HR, os outros 4 papéis não tinham dados disponíveis por meio de análise multivariada.
Primeiro Autor e ano
Etnia
Cases
P /N
Método
valor Cutoff
Tabagismo
tipo histológico
Stage
geral Survival
(Yes/No)
(SCC/ADC/
(Ⅰ/Ⅱ/
Univariate
Univariate
Others)
Ⅲ/Ⅳ)
HR Estimar
HR
95% CI
HR Estimativa
HR
IC 95%
Odile David2004America6114 /47IHC 0% NANANASur. Curve2.652.19-3.30NANANACappuzzo F.2004Italian10351 /52IHC≥2 scores84 /1921/57/25
0/0 /Tablet
Sur. Curve0.840.56-0.98HR 95% CI0.580.35-0.94Amit Shah2005Irishman8241 /41IHC 0% NA46 /22/14
47/18 /Tablet
Sur. Curve0.430.27-0.69HR 95% CI0.360.18-0.71Junji Tsurutani2007Japanese4644 /2IHC 0% 37/937/8/1
16/11 /Tablet
HR 95% CI1 .060.54-2.06Sur. Curve0.890.64-1.24Akihiko Yoshizawa2010America265209 /56IHC> TS2NA128 /137 /0NAHR 95% CI2.021.34-3.19HR 95% CI1.831.11-3.22Pu Rong2010Chinese13781 /56IHC 2 scoresNA61 /76/0
13/60 /
Sur. Curve2.781.18-4.67NANANADan Liu2011Chinese158118 /40IHC 2 scoresNA75 /77 /20NAHR 95%CI1.060.54-2.06NANANAChenYao-hua2011Chinese10358/45IHC 0%62/4162/34/7
16/40/
Sur. Curve1.791.55-2.13NANANAShe-Juan An2012Chinese9543 /52IHC> 0 scores60 /3824/62/12
47/14 /Tablet
Sur. . Curve3.541.63-5.94HR 95% CI3.3841.737-6.593Table 1. Principais características e resultados de estudos elegíveis
CSV Baixar
Abreviatura CSV: N, expressão P /expressão positiva /negativa; IHC, imuno-histoquímica; SCC, carcinoma de células escamosas; ADC, adenocarcinoma; HR, taxa de risco; NA, não disponíveis ou não aplicável.
-análise Meta
Nós avaliamos se os níveis de expressão de p-AKT foram associados com a sobrevida global em pacientes com NSCLC. Dos 9 ensaios avaliáveis para a avaliação sistemática, 4 não puderam ser incluídos na meta-análise de análise multivariada devido a dados insuficientes para estimar a FC e IC 95%.
Nove estudos, incluindo 1049 pacientes, relatou o efeito de p-AKT na sobrevida global usando análises sem ajuste para outros fatores de [17-24]. Como mostrado na Figura
2
, p-AKT foi significativamente correlacionada com sobrevida global pior de acordo com a análise univariada, com uma HR combinado de CI 1,49 (95%: 1,01-2,20,
P 0,05). O modelo de efeitos aleatórios (o método DerSimonian e Laird) foi usado por causa da heterogeneidade significativa foi observada entre essas pesquisas (
P
= 0.000, I
2 = 90,8%). Cinco estudos, demonstraram o efeito da p-AKT na sobrevida global usando análises ajustadas para outros fatores, incluindo 590 pacientes [18-21,24]. Como se mostra na Figura
3
, não estatisticamente significativa foi observada entre a expressão dos níveis de p-AKT e sobrevivência global, com uma HR combinada de 1,02 (95% CI: 0,54-1,95). O modelo de efeitos aleatórios (o método DerSimonian e Laird) foi usado por causa da heterogeneidade significativa foi observada entre essas pesquisas (
P
= 0.000, I
2 = 87,3%).
em seguida, realizamos análises de subgrupos para investigar se houve diferenças nos resultados em relação à etnia, ano de publicação e valores de corte em que o estudo foi realizado. No entanto, por causa do número limitado de estudos que não poderíamos obter os resultados estatisticamente significativos na sua maioria (
Tabela S1 e
Tabela
S2
). Assim, mais estudos devem ser realizados no futuro.
estatísticas viés de publicação foram determinadas usando o método de teste de Begg (Figura
4
). Não há vieses de publicação foram encontrados em nove estudos de sobrevida global utilizados para análise univariada (
P
= 0,509) e cinco estudos de sobrevida global utilizados para a análise multivariada (
P
= 0,786). análise de sensibilidade foi realizada para investigar o efeito de todos os estudos sobre a meta-análise global ao omitir um estudo de cada vez, e a omissão de qualquer estudo não fez nenhuma diferença significativa, demonstrando que nossos resultados foram estatisticamente confiável.
Discussão
O papel prognóstico de um marcador molecular específico é mais poderoso quando usado para ajudar a tornar a decisão terapêutica. Em estudos anteriores, vários tipos de alterações genéticas foram identificadas como factores de prognóstico, como HER-2 em carcinoma da mama e do gene EGFR em NSCLC. No entanto, a maioria dos outros marcadores moleculares clinicamente úteis que têm valor preditivo da resposta terapêutica e valor prognóstico não demonstrou utilidade em investigações subsequentes. Devido a uma grande quantidade de resultados controvérsia sobre as implicações de prognóstico de p-AKT em NSCLC continua, nós realizou uma meta-análise para determinar se p-AKT pode servir como um marcador de prognóstico para pacientes com NSCLC.
A nossa meta-análise incide sobre a expressão p-AKT em NSCLC ressecado. Nós também ter recolhido a informação sobre a relação entre a expressão de p-AKT e sobrevivência livre de progressão, ao mesmo tempo, mas não realizaram a meta-análise, por causa do insuficientes os dados poderiam ser usados. Embora os resultados de dois estudos [18,19] que relatou o impacto de expressão p-AKT na sobrevida global tem a conclusão oposta em comparação com os outros cinco estudos [17,21,22,24] na meta-análise, a nossa meta -Análise com dados acumulados sugerem que a sobre-expressão de p-AKT estava associado com menor tempo global de sobrevivência e previu pior prognóstico em doentes com NSCLC. A taxa de risco agrupados (HR) para a sobrevida global foi de 1,49 (95% de intervalo de confiança (IC): 1,01-2,20) por análise uni e 1,02 (95% CI: 0,54-1,95). Por meio de análise multivariada
AKT foi encontrada para desempenhar um papel na sobrevivência de células cancerosas na mama, próstata, ovário, e tecido cerebral [25-28]. Ele também foi identificada como uma quinase constitutivamente activa que promove a sobrevivência de células NSCLC [29]. Recentemente, um estudo clínico de expressão p-AKT em tecidos de pacientes com displasia epitelial brônquica e malignidade corrobora essa hipótese. Eles observaram forte coloração p-AKT em 12 de 44 amostras normais brônquicas biópsia, 4 de 9 amostras reactivas, 22 de 25 espécimes displásicas, e 25 de 76 amostras de NSCLC. Tsao et ai. [30] considerado que a activação AKT pode ser mais fortemente associadas com as fases iniciais de transformação maligna do que com a progressão para neoplasia franca [17].
Além disso, o significado prognóstico da expressão p-AKT foi examinado em muitos tipos de câncer, embora a evidência ainda é limitada. Ermoian et ai. [6] não encontraram associação entre p-AKT e sobrevida do paciente em gliomas; mas a expressão de PTEN prognóstico significativamente neste pacientes. No carcinoma de células renais, p-AKT estava associado com prognóstico pobre em univariada mas nenhuma análise multivariada [31]. No entanto, no cancro da mama, p-AKT não parece prever a sobrevida, mas não prever recaída do paciente [32,33]. Assim, as evidências sugerem que o p-AKT em outros tipos de tumor pode estar associado a fatores que predizem pior prognóstico, como histologia, estágio do tumor, grau, doença metastática. Em NSCLC, os resultados do valor prognóstico da p-AKT não são consistentes e não foram bem resumido.
A nossa meta-análise é baseada em dados publicados e foi realizada por meio de análise univariada, seguida de outra análise multivariada, que é a primeira vez para avaliar o efeito de p-AKT na sobrevivência global. existem algumas limitações em nosso estudo. Os riscos calculados em nossa meta-análise pode ser uma superestimativa devido à publicação e viés de relatórios. Os resultados positivos tendem a ser aceitos por revistas, enquanto que os resultados negativos, muitas vezes são rejeitados ou até mesmo não ser apresentado. Além disso, nós não incluem trabalhos inéditos e resumos em meta-análise porque os dados necessários só estava disponível nas publicações completas. Outra fonte potencial de polarização está relacionado com o método utilizado para extrapolar a AR. RH foi extraída a partir dos dados compreendidos no artigo ou directamente calculadas a partir das curvas de sobrevivência. Na verdade, o método de extrapolar HR a partir de curvas de sobrevivência parece ser menos confiável, pois essa estratégia não eliminar completamente a imprecisão nas taxas de sobrevivência extraídos. Além disso, pensamos também que diferentes estratégias de terapia nesses estudos têm impacto diferente sobre a sobrevida global, de modo que este fator deve ser levado em consideração. Infelizmente, apenas um destes estudos descreveu a estratégia de terapia os pacientes após ter diagnosticado o cancro do pulmão. Estes pacientes receberam gefitinib diariamente a uma dose de 250 mg. Outra pesquisa que acabamos de mencionar todos os pacientes receberam nenhuma terapia neoadjuvante antes que eles tenham a ressecção cirúrgica. Portanto, a investigação mais meticulosa deve ser conduzida. Além disso, os anticorpos diferentes podem ter uma influência sobre o estudo, de modo que a informação resumida das fontes de anticorpos na Tabela
S3
. Os anticorpos de p-AKT em cinco estudos foram comprados de “Sinalização Cell Technology, Beverly, MA”, nos outros três estudos foram comprados de empresas diferentes, e apenas um estudo não dar as informações da fonte de anticorpos. Em seguida, fizemos a análise estratificada, por causa do número limitado de estudos que os resultados não têm estatisticamente significativa. No entanto, nenhum viés de publicação foi detectada pelo teste de Begg (P 0,05), indicando que as estatísticas obtidas aproximar os resultados reais. análise de sensibilidade também foi realizado para investigar a influência de um único estudo sobre a meta-análise global ao omitir um estudo de cada vez, e a omissão de qualquer estudo não fez nenhuma diferença significativa, sugerindo que nossos resultados foram estatisticamente confiável.
em resumo, a sobre-expressão de p-AKT foi associado com menor sobrevida global em pacientes com NSCLC em análise univariada, mas a análise não multivariada. No entanto, os estudos clínicos mais prospectivos são necessários para explorar o valor prognóstico da expressão p-AKT em NSCLC.
Informações de Apoio
Checklist S1. Lista de verificação
PRISMA.
doi: 10.1371 /journal.pone.0081451.s001
(DOC)
Tabela S1.
As análises de subgrupos de análise univariada
doi:. 10.1371 /journal.pone.0081451.s002
(DOCX)
Tabela S2.
As análises de subgrupos de análise multivariada.
doi: 10.1371 /journal.pone.0081451.s003
(DOCX)
Tabela S3.
Informações de fontes de anticorpos.
doi: 10.1371 /journal.pone.0081451.s004
(DOCX)