Abstract
Os métodos baseados em tempo real reação em cadeia da polimerase (PCR) pode acelerar o diagnóstico de aspergilose invasiva, mas são limitados por uma falta de padronização. Avaliou-se o ensaio MycAssay ™ Aspergillus comercialmente disponíveis para o diagnóstico de aspergilose invasiva em pacientes sem cancro hematológica. Nós prospectivamente coletadas 322 amostras do trato respiratório inferior (novembro de 2009-Janeiro 2011) de 175 pacientes com infecção do trato respiratório inferior e as seguintes condições predisponentes: câncer sólido (16,8%), cirrose (16,8%), corticoterapia (71,7%), HIV infecção (15,6%), doença pulmonar obstrutiva crónica (DPOC, 52,6%), transplantes de órgãos sólidos (rim [1,2%], coração [3%], fígado [4,6%]), ou nenhum (3,5%). As amostras foram obtidas quando clinicamente indicado e analisadas no laboratório de microbiologia.
Aspergillus
DNA foi extraído e amplificado por meio de MycXtra® e MycAssay ™ Aspergillus.
Aspergillus spp
. Isolou-se a partir de 65 amostras de pacientes (31). De acordo com a Organização Européia para Pesquisa e Tratamento do Câncer e critérios de Bulpa (para pacientes com DPOC), 15 tinham provável aspergilose invasiva. Resultados MycAssay ™ Aspergillus foram negativos (n = 254), positivo (n = 54), ou indeterminada (n = 14). A sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo, valor preditivo negativo, e as probabilidades de diagnóstico relação entre o MycAssay ™ (primeira amostra /qualquer amostra) foram 86,7 /93, 87,6 /82,4, 34,1 /34,1, 92,2 /100, e 48 /68,75. As diferenças entre a proporção de amostras com as determinações positivas de PCR (63%) e a proporção de amostras com
Aspergillus spp
. isolamento (75%) não atingiu significância estatística (
P
= 0,112). O tempo médio entre a cultura de exemplo para visualização de crescimento dos fungos foi de 3 dias, em comparação com ~ 4 horas para MycAssay ™ Aspergillus PCR. MycAssay ™ Aspergillus apresentou alta sensibilidade para o diagnóstico de aspergilose invasiva em pacientes sem câncer hematológico. Sensibilidade aumentada quando foram utilizadas várias amostras. Em comparação com a cultura fúngica, PCR reduziu significativamente o tempo de diagnóstico
Citation:. Guiné J, Padilla C, Escribano P, Muñoz P, Padilla B, Gijón P, et al. (2013) Avaliação do MycAssay ™ Aspergillus para o diagnóstico de Invasiva pulmonar aspergilose em pacientes sem cancro da hematológica. PLoS ONE 8 (4): e61545. doi: 10.1371 /journal.pone.0061545
Autor: David R. Andes, da Universidade de Wisconsin Medical School, Estados Unidos da América
Recebido: 21 Dezembro, 2012; Aceito: 11 de março de 2013; Publicação: 19 de abril de 2013
Direitos de autor: © 2013 Guiné et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados
Financiamento:. Este estudo foi parcialmente financiado por doações do Fondo de Investigación Sanitaria (FIS) CP09 /00055 e PI09 /1257 (Instituto de Salud Carlos III) e por doações de Myconostica. Jesús Guinea (MS09 /00055) e Pilar Escribano (CD09 /00230) são suportados pela FIS. Os kits MycXtra® e MycAssayTM Aspergillus utilizados para a realização do estudo foram gentilmente apoiado por Izasa (Barcelona, Espanha). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito
Conflito de interesses:. Os autores declaram que os kits MycXtra® e MycAssayTM Aspergillus foram gentilmente fornecidos a partir Izasa ( Barcelona, Espanha). Isto não altera a adesão dos autores para todas as políticas de PLoS One sobre os dados e materiais de compartilhamento.
Introdução
aspergilose invasiva é uma infecção oportunista que afeta pacientes com vários graus de imunossupressão. Os pacientes com neutropenia profunda e prolongada têm tido tradicionalmente o maior risco de aspergilose invasiva [1], [2], [3], [4], [5]. Outros grupos de risco incluem receptores de transplantes de órgãos sólidos, os pacientes com doença pulmonar obstrutiva crónica (DPOC), os pacientes que receberam corticosteróides ou outros agentes imunossupressores, e pacientes com cirrose hepática [6], [7].
O número dos pacientes sem doenças malignas hematológicas que são afetadas por aspergilose invasiva está aumentando. Mortalidade neste grupo é alta, provavelmente por causa do baixo índice de suspeita da infecção eo consequente atraso no diagnóstico [8], [9], [10], [11]. Como um resultado favorável depende de terapêutica antifúngica rápido e adequado, o diagnóstico rápido é cada vez mais importante
A detecção de galactomanana no soro tem se mostrado útil para o diagnóstico de aspergilose invasiva em pacientes com neutropenia.; Infelizmente, a sua sensibilidade é inferior a 50% em pacientes sem neutropenia [12], [13], [14], [15], [16]. Detecção de galactomanano em amostras de lavado broncoalveolar (LBA) é mais sensível do que a detecção em amostras de soro, amostras de BAL embora nem sempre estão disponíveis [15]. O isolamento de
Aspergillus
em amostras do trato respiratório inferior de doentes não neutropénicos é muitas vezes a primeira evidência microbiológica de aspergilose pulmonar invasiva. No entanto, como a cultura é lenta, a detecção de
Aspergillus
em amostras clínicas é atrasada.
Os métodos baseados na reacção em cadeia da polimerase em tempo real (PCR) pode acelerar o diagnóstico de aspergilose invasiva, mas são limitada pela falta de padronização [17], [18]. MycAssay ™ Aspergillus é uma técnica de PCR em tempo real recentemente comercializado para a detecção de
Aspergillus
DNA em amostras do trato respiratório inferior. Este ensaio foi estudado principalmente em amostras de LBA de pacientes com doenças hematológicas ou aqueles internados em unidades de terapia intensiva [19].
No presente estudo, avaliou-se o teste MycAssay ™ Aspergillus em amostras respiratórias, incluindo BAL, expectoração espontânea e aspirado brônquico, para o diagnóstico de aspergilose invasiva em pacientes sem câncer hematológico.
Materiais e Métodos
pacientes e amostras clínicas
de novembro de 2009 a janeiro de 2011 , que recrutou 175 pacientes com um ou mais baixa amostras respiratórias submetidas ao laboratório de microbiologia. A maioria dos pacientes (96,5%) teve suspeita clínica de infecção do tracto respiratório inferior e, pelo menos, um factor de acolhimento aspergilose pulmonar invasiva, excluindo o cancro hematológica. Um total de 322 amostras foram recolhidas. As amostras com resultados indeterminados foram novamente testados, e o segundo resultado foi escolhido. As amostras que mostram um resultado indeterminado de PCR de confirmação foram excluídos da análise (n = 14; 4,3%). O número de amostras estudadas /recolhido foi como se segue: expectoração espontânea (n = 142/145), aspirado brônquico (n = 104/111), BAL (N = 61/65), e o cateter escova protegida (N = 1/1 ).
Dois pacientes tiveram uma única amostra, cada qual com um resultado indeterminado, e foram excluídos da análise. Os 173 pacientes restantes foram classificados como tendo ou não tendo aspergilose invasiva pulmonar ou outra infecção molde de acordo com os critérios revistos da Organização Europeia para Pesquisa e Tratamento do Câncer (EORTC) [20], [21] ou critérios de Bulpa (exclusivamente para pacientes com DPOC) [20], [21]. A colonização foi definida como o isolamento de
Aspergillus spp
. em amostras respiratórias inferiores em pacientes que não satisfazem o EORTC ou critérios de Bulpa. A cirrose foi incluído como um fator de acolhimento, uma vez que aspergilose invasiva foi encontrado em pacientes criticamente doentes com cirrose e há outras condições predisponentes [8]. As condições que predispõem para a aspergilose invasiva foram cancro activo sólido (16,8%), cirrose (16,8%), o consumo de corticosteróides (71,7%), infecção por VIH (15,6%), DPOC (52,6%), transplantes de órgãos sólidos (rim [1,2%] , coração [3%], fígado [4,6%]), neutropenia (4,6%), ou nenhum (3,5%). Uma elevada percentagem dos pacientes (90%) foram consumir antibióticos quando a amostra foi recolhida.
Todas as amostras foram obtidas apenas quando clinicamente indicado, e não há amostras adicionais foram solicitados para o estudo. As amostras foram coletados prospectivamente e prontuários dos pacientes foram analisados retrospectivamente. Os médicos estavam cegos para o resultado PCR, que não foi incluído como critério de diagnóstico microbiológico.
O processamento da amostra, genômica
Aspergillus
extração de DNA, e amplificação usando MycAssay ™ Aspergillus
As amostras foram divididas para a cultura de fungos e extração de DNA. Todas as amostras foram processadas para
detecção de DNA Aspergillus
, ea maioria (n = 298/308; 97%) foram cultivadas em ambas as bactérias e media fúngicas. amostras de BAL (1 mL) foram centrifugadas a 3000
g
durante 10 minutos. As pelotas concentrados obtidos foram processados para cultura de fungos e semeadas em placas de cultura de mídia. Expectoração e aspirado brônquico foram convertidos ao fluido pela adição de acetilcisteína (Pharmazam, Espanha) e adicionados às placas de agar utilizando uma ansa estéril (10 mL). Os meios de cultura de fungos foram agar Sabouraud-dextrose com cloranfenicol e infusão de agar cérebro-coração com agentes antibacterianos. Os meios de cultura bacteriana foram ágar sangue de carneiro e ágar chocolate. isolados de fungos filamentosos foram identificados de acordo com os procedimentos morfológicos convencionais.
As amostras para a extracção do ADN foram armazenadas congeladas a -20 ° C até à análise do lote. amostras de muco espesso, tal como expectoração e aspirado brônquico, foram convertidos ao fluido pela adição de BBL ™ ™ MycoPrep Reagente (Becton Dickinson, Shannon, Irlanda). Estas amostras e amostras de BAL (1 mL) foram, então, centrifugadas a 3000
g
durante 20 minutos. Os peletes obtidos foram processados para
Aspergillus
extracção de ADN utilizando o kit de ADN fúngico Manual MycXtra® extracção (Myconostica, agora uma empresa Lab21, Cambridge, Reino Unido), que inclui um passo de ruptura mecânica. sobrenadantes LBA foram armazenados para determinação galactomanano.
purificado extraído genômica
Aspergillus
DNA foi amplificado usando o kit MycAssay ™ Aspergillus (Myconostica, agora uma empresa Lab21, Cambridge, UK) no Cepheid SmartCycler ® plataforma (Cepheid, Sunnyvale, Califórnia, EUA). MycAssay ™ Aspergillus foi concebido para a detecção de DNA genômico a partir de 18
Aspergillus
espécies diferentes (incluindo
A. Fumigatus
,
A. Flavus
,
A. Terreus
, e
A. niger
), utilizando modelos moleculares. O ensaio tem como alvo o gene de rRNA 18S e contém um controlo interno de origem vegetal para evitar resultados falso-negativos, devido à presença de inibidores de PCR.
Resumidamente, 10 uL do ADN extraído foi misturado com os reagentes de amplificação em um volume de reacção final de 25 ul. Os resultados da PCR para cada amostra foram relatados como negativos (amostras sem
Aspergillus
amplificação de DNA com a amplificação positiva do controle interno), positivos (amostras com
Aspergillus
amplificação do DNA), ou indeterminados (amostras com
Aspergillus
amplificação de DNA negativo e falha da amplificação do controlo interno). O estojo de extracção de ADN e MycXtra® MycAssay ™ Aspergillus foram aplicados de acordo com as instruções do fabricante [22]. O ponto de passagem (Cp) foi o número ciclo no qual o teste de PCR em tempo real tornou-se positiva
A análise dos dados
Nenhum dos pacientes tinha provado aspergilose pulmonar invasiva.; apenas provável aspergilose invasiva foi considerado ser uma verdadeira infecção. Calculou-se a sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo (VPP), valor preditivo negativo (NPV), razão de probabilidade de um resultado positivo (LR +), razão de probabilidade para um resultado negativo (LR) e razão de chances de diagnóstico (DOR) do da PCR para o diagnóstico de aspergilose pulmonar invasiva. Como várias amostras respiratórias foram estudados em vários pacientes, os valores de diagnóstico da PCR foram calculados com base em ambos os resultados da primeira amostra submetida ao laboratório de microbiologia e sobre os resultados de uma amostra a partir do mesmo paciente. PCR e cultura de fungos foram descritas e comparadas pelo teste do qui-quadrado e um método binomial padrão para cálculo de intervalos de confiança de 95%.
Ética declaração
Este estudo foi aprovado pelo comitê de ética local (Comité Ético de Investigação Clínica (CEIC-A1)). Os participantes desde que o seu consentimento informado por escrito para participar no estudo. Todos os dados dos pacientes foram anónimos após a coleta.
Resultados
Os 173 pacientes estudados eram em sua maioria do sexo masculino (76,3%) e tinham uma idade média de 60,8 ± 19,5 (2-96) anos. Os pacientes foram classificados como tendo provável aspergilose invasiva (n = 15; 8,7%), possível aspergilose invasiva (n = 3; 1,7%),
Aspergillus
colonização (clinicamente não significativa
Aspergillus
isolamento [n = 21; 12,2%], scedosporiosis pulmonar [n = 1; 0,6%]), ou infecção molde não-invasiva. Os 15 pacientes com provável aspergilose invasiva são resumidos na tabela 1. No momento da coleta da amostra, todos os pacientes tiveram febre que não respondeu aos antibióticos de largo espectro, e 80% de admissão necessária para a unidade de cuidados intensivos. Uma proporção elevada (40%) tinham DPOC como a condição de predisposição subjacente. Em 14 dos 15 casos, o pulmão era o único órgão infectado. determinação galactomanano soro só foi positiva em 5 (35,7%) dos 14 pacientes nos quais foi aplicado.
Aspergillus spp
. foram isolados em 63/308 (22%) amostras de 31 pacientes. A distribuição das espécies foi a seguinte:
A. fumigatus
(n = 45),
A. niger
(n = 10),
A. terreus
(n = 7),
A. flavus
(n = 5), e outra (n = 3) spp.
Aspergillus spp
. Isolou-se em uma ou mais amostras clínicas dos 15 pacientes com provável aspergilose invasiva.
MycAssay ™ Aspergillus foi positivo em 54/254 (17,5%) das amostras, e em pelo menos uma amostra a partir de 14 dos 15 pacientes com aspergilose invasiva. valores Cp de determinações PCR positivos foram menores em amostras de pacientes com aspergilose provável do que em amostras de pacientes com clinicamente não significativa
Aspergillus
(30,18 ± 3,3 vs 33 ± 2,66;
P
= 0,001). Esta constatação indicou uma maior carga de
Aspergillus spp
. em pacientes com aspergilose invasiva do que naqueles sem.
Como esperado, a proporção de amostras com
Aspergillus
isoladamente ou com resultados positivos de PCR foi maior em pacientes com aspergilose invasiva (Tabela 2). A concordância entre a cultura de fungos e a PCR foi alta em todas as amostras e em amostras de pacientes com ou sem aspergilose invasiva (83,9%, 86,5%, e 83,5%, respectivamente). As discrepâncias foram encontrados principalmente em amostras rendendo
Aspergillus
sem amplificação do DNA (aproximadamente 10% das amostras). Curiosamente, a maioria das discrepâncias foram encontrados em amostras de pacientes sem aspergilose invasiva (resultados PCR-negativo /cultura positiva, 86%; resultados PCR-positivo /cultura negativa, 94,4%). As amostras com resultados PCR-positivo /cultura negativa apresentaram valores Cp mais elevadas do que as amostras em que a cultura e PCR foram concordantes. A análise de amostras de pacientes com aspergilose invasiva indicou que a proporção de amostras em que o resultado de PCR foi positiva (63%) não diferiu da proporção de amostras em que
Aspergillus spp
. foi isolado (75%) (
P
= 0,615). Os resultados da comparação de PCR e cultura de fungos com LBA, expectoração, e amostras de aspirado brônquico são mostrados na Tabela 3. O desempenho de PCR e cultura de fungos não diferiram com o tipo de amostra estudada (
P 0,05)
a sensibilidade, especificidade, VPP, VPN LR +, LR, e DOR do ™ Aspergillus MycAssay e cultura de fungos para o diagnóstico de aspergilose pulmonar invasiva realizada em baixa. amostras respiratórias de pacientes são apresentados nas Tabelas 4 e 5. a sensibilidade foi maior quando várias amostras por paciente foram estudadas; No entanto, a análise de amostras múltiplas não afecta a especificidade para qualquer extensão. A fim de estudar como o valor diagnóstico da PCR podem ser afetados em diferentes situações, os pacientes foram divididos nos seguintes grupos: pacientes com DPOC (n = 91), pacientes com infecção não melhorar com antibióticos (n = 28), e os pacientes na unidade de terapia intensiva com pneumonia (n = 35). Sensibilidade e especificidade permaneceram inalterados por esta estratificação. resultados MycAssay ™ Aspergillus estavam disponíveis cerca de 4 horas após a recepção da amostra. Em contraste, o número de dias para visualização do crescimento fúngico nas placas de cultura microbiológica foi como se segue: média, n = 4,3 ± 4,1; mediana, n = 3; e o modo, n = 2.
Em 14 dos 15 pacientes com provável aspergilose pulmonar invasiva, as amostras foram tomadas antes do início do tratamento antifúngico, e há amostras adicionais foram estudados durante tratamento antifúngico. As amostras seriadas do paciente restante (. nº 15, Quadro 1) foram estudados; uma das cinco amostras tomadas durante o tratamento antifúngico, três foram positivos para MycAssay e dois foram negativos. Curiosamente, após as amostras tornaram-se negativos para MycAssay, a condição clínica do paciente melhorou. Dos três pacientes com possível aspergilose invasiva, um recebeu voriconazol e melhorado, e dois não receberam tratamento antifúngico e morreu. O resultado do MycAssay ™ Aspergillus foi negativo para as amostras dos três pacientes com possível aspergilose invasiva.
Discussão
O espectro de pacientes com risco de aspergilose pulmonar invasiva tem se expandido nos últimos anos por causa de um aumento no número de pacientes com outras doenças hematológicas condições que predispõem. Esta expansão foi ilustrado em estudos realizados em grandes hospitais terciários onde a coleta caso não se restringiu às unidades da divisão de hematologia e de terapia intensiva e onde um grande número de autópsias são realizadas [6], [8], [23].
aspergilose invasiva em pacientes com doenças malignas não hematológicas é caracterizada por alta mortalidade (60-100%) [6], [10], [11], o que provavelmente reflete as limitações das ferramentas atuais de diagnóstico baseado em radiologia ou microbiologia e o baixo índice de suspeita clínica.
o diagnóstico da aspergilose invasiva é baseado em uma combinação de achados clínicos compatíveis em pacientes com fatores de risco, juntamente com a evidência histopatológica de invasão, achados radiológicos, o isolamento de
Aspergillus
spp em amostras do tracto respiratório inferior, ou a detecção de marcadores circulantes em fluidos. O exame histopatológico é necessário para obter um diagnóstico definitivo, apesar de biópsias pulmonares raramente são obtidos [24]. Em comparação com a cultura e testes de diagnóstico molecular, a precisão do diagnóstico histomorfológico é na melhor das hipóteses 80% [25]. Os achados radiológicos que são comuns em pacientes com neutropenia e aspergilose invasiva são raros em doentes não neutropénicos [8], [26]. Cultura de amostras do trato respiratório inferior de pacientes com suspeita clínica ainda é amplamente utilizado, embora seja lento e limitado pela baixa sensibilidade e especificidade [27]. Além disso, a detecção de galactomanano circulante em amostras de soro de pacientes não neutropénicos tem uma baixa sensibilidade para o diagnóstico de aspergilose invasiva [6], [14], [16].
Neste cenário, o desenvolvimento de procedimentos diagnósticos rápidos, sensíveis e específicos para detectar
Aspergillus
em amostras do trato respiratório de pacientes sem doenças hematológicas é atraente. Um dos novos procedimentos mais encorajador é DNA
Aspergillus
detecção por ensaios de PCR em tempo real. Em nosso estudo, a PCR estavam disponíveis tão rapidamente quanto 4 horas após a coleta da amostra, que é uma reviravolta deve mais rápido do que os 3 dias necessários para observar o crescimento da
Aspergillus
em cultura. No entanto, o tempo de cultura da amostra e a detecção do crescimento dos fungos pode ser reduzida através da inspecção placas de cada dia, mesmo no fim de semana. Além disso, a amplificação simultânea de DNA em amostras respiratórias e cultura de fungos nos permitirá identificar isolados ao nível de espécie e realizar testes de susceptibilidade antifúngica sobre isolados.
Detecção de
Aspergillus
DNA em amostras de LBA está incentivando e confirma o diagnóstico de aspergilose invasiva em mais pacientes do que os procedimentos convencionais [28]. Tem sido estudada principalmente em pacientes com desordens hematológicas [29], [30], [31]. Uma recente meta-análise mostrou uma sensibilidade e especificidade de 0,91 e 0,92, respectivamente, mas destacou a falta de padronização [32]. No entanto, o papel de PCR em amostras do tracto respiratório de pacientes não-hematológicos requer avaliação. amostras de LBA foram coletadas em 4 dos 15 pacientes com provável aspergilose invasiva. Em todos os casos, as concentrações de galactomanano LBA foram acima de 0,5 ng /ml
A falta de padronização do
Aspergillus
PCR até à data tem dificultado a sua introdução nos critérios de definição para aspergilose provável [20. ]. MycAssay ™ Aspergillus é um real-time PCR comercialmente disponíveis para a detecção dos mais relevantes clinicamente
Aspergillus
espécies [22]. Como um teste com a marca CE totalmente padronizada com controles completos de qualidade de fabricação, MycAssay ™ Aspergillus cumpre os requisitos para a padronização da
Aspergillus
PCR necessários para confirmar um diagnóstico de aspergilose invasiva. MycAssay ™ Aspergillus foi previamente testado em amostras de BAL [19], amostras de escarro [33], [34], e amostras de tecidos [35]. MycAssay pode ser realizada no laboratório de microbiologia clínica por pessoal treinado em tecnologia de biologia molecular; o custo estimado do teste por determinação em Espanha é € 25-30.
Foram avaliados MycAssay ™ Aspergillus em amostras do trato respiratório inferior (incluindo BAL, expectoração espontânea e aspirado brônquico) de pacientes com condições predisponentes que não seja malignidade hematológica e suspeita clínica de aspergilose invasiva. Descobrimos que os três tipos de amostras do tracto respiratório inferior estudados eram adequados para a detecção de
Aspergillus spp
. ADN. Nosso padrão-ouro foi clínico em que classificamos pacientes utilizando os critérios propostos pela EORTC [20], [21] ou por Bulpa [20], [21]. A sensibilidade da PCR foi elevada e aumentada quando várias amostras por paciente foram estudadas; especificidade não foi afetada pela inclusão de várias amostras por paciente. A sensibilidade também foi elevada em pacientes com DPOC, uma condição predisponente em uma grande proporção dos pacientes estudados. MycAssay ™ Aspergillus mostrou um alto VPN, sugerindo que um resultado PCR-negativos em nenhuma das amostras do trato respiratório inferior de um doente sem câncer hematológico poderia ser útil para afastar a aspergilose invasiva. Em contraste, o VPP do ensaio foi baixa. Uma explicação para este achado é que MycAssay ™ Aspergillus é capaz de detectar
Aspergillus
DNA em amostras de pacientes colonizados ou de pacientes com outras formas de aspergilose, incluindo crônica e aspergilose pulmonar alérgica [36], [37] ( tabela 5). Outra explicação pode ser a baixa prevalência de aspergilose pulmonar invasiva encontrada na população em estudo.
A principal limitação do nosso estudo é que não fomos capazes de incluir casos comprovados histologicamente, porque não há biópsias pulmonares foram recolhidos ou post-mortem exames realizados. Esta é uma limitação comum em estudos que avaliam o papel das novas ferramentas de diagnóstico para o diagnóstico de aspergilose invasiva. Portanto, os doentes foram diagnosticados com aspergilose invasiva com base em dados microbiológicos ou radiológicas. O fato de que
Aspergillus
foi isolado a partir de amostras do trato respiratório inferior em todos os pacientes poderiam explicar a alta correlação encontrada entre a cultura de fungos e PCR. Em nossos pacientes, MycAssay ™ Aspergillus não nos permitem diagnosticar novos casos que poderiam ser perdidas com a cultura fúngica. Outra limitação é que classificamos nossos pacientes utilizando os critérios do IBPC, que foram desenvolvidos especificamente para pacientes com câncer. critérios do IBPC foram escolhidos na ausência de critérios específicos para pacientes não-cancerosas.
Nós concluímos que MycAssay ™ Aspergillus realizada em amostras do trato respiratório inferior apresentou alta sensibilidade para o diagnóstico de aspergilose invasiva em pacientes sem câncer hematológico. A sensibilidade aumentada quando várias amostras foram analisadas. Sensibilidade foi de alta para pacientes com DPOC, que é uma população de risco emergente em alguns hospitais. MycAssay ™ Aspergillus provou ser particularmente útil para descartar o diagnóstico de aspergilose invasiva e reduziu significativamente o tempo de diagnóstico em comparação com a cultura fúngica convencional. MycAssay ™ Aspergillus deve ser usado simultaneamente com a cultura fúngica das amostras do trato respiratório inferior, a fim de fornecer dados adicionais sobre a susceptibilidade antifúngica e garantir a identificação precisa dos isolados.
Reconhecimentos
Gostaríamos de agradecer Thomas O’Boyle para edição e revisão do artigo. Agradecemos as valiosas sugestões de David W. Denning depois de sua revisão crítica do manuscrito. Este estudo foi apresentado em parte, no 21º Congresso Europeu de Microbiologia Clínica e Doenças Infecciosas (ECCMID) e 27 Congresso Internacional de Quimioterapia (ICC), Milão, Itália, 2011 (P-2095).