Abstract
Fixa, (FPE) tecidos embebidos em parafina são um recurso potencialmente rico para estudar o papel da NOTCH1 no cancro e outras patologias, mas os testes que detectam de forma fiável NOTCH1 activado (NICD1) em amostras do FPE tem faltado. Aqui, nós colmatar esta lacuna através do desenvolvimento de uma coloração imuno-histoquímica (IHQ) que detecta a neoepitope criado pelo evento de clivagem proteolítica que ativa NOTCH1. Após a validação usando cancros xenoenxerto e tecidos normais com padrões conhecidos de ativação NOTCH1, foi aplicado o teste para tumores ligados a sinalização Notch desregulado por estudos mutacionais. Como esperado, foi observada coloração NICD1 frequente em T leucemia /linfoma linfoblástico, um tumor em que a activação
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mutações são comuns. No entanto, quando IHC foi utilizado para medir a ativação NOTCH1 em outros cancros humanos, várias descobertas inesperadas surgiram. Entre os tumores de células B, NICD1 coloração era muito mais frequente na leucemia linfocítica crónica do que seria previsto com base na frequência de
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mutações, enquanto que o linfoma de células do manto e linfoma difuso de grandes células B não mostraram evidência de ativação NOTCH1. NICD1 também foi detectado em 38% dos linfomas de células T periféricas. De interesse, coloração NICD1 em células de leucemia linfocítica crônica e no linfoma angioimunoblástica foi consistentemente mais pronunciado nos gânglios linfáticos do que em tecidos moles adjacentes, implicando fatores no microambiente nodal na ativação NOTCH1 nestas doenças. Entre carcinomas, difusa forte coloração NICD1 foi observada em 3,8% dos casos de câncer de mama triplo negativo (3 de 78 tumores), mas estava ausente de 151 carcinomas de pulmão de células não-pequenas e 147 carcinomas ovarianos. coloração frequente do endotélio normal também foi observada; Em linha com esta observação, forte coloração NICD1 também foi visto em 77% dos angiossarcoma. Estes resultados complementam insights de estudos sequenciação genómica e sugerem que o IHC coloração é uma valiosa ferramenta experimental que pode ser útil na selecção de pacientes para ensaios clínicos
citação:. Kluk MJ, Ashworth T, Wang H, Knoechel B, Mason EF, Morgan EA, et al. (2013) Aferição NOTCH1 Activation em Câncer Usando imunohistoquímica. PLoS ONE 8 (6): e67306. doi: 10.1371 /journal.pone.0067306
editor: Jose Angel Martinez Climent, da Universidade de Navarra, Centro de Investigação Médica Aplicada, Espanha