Abstract

Fundo

O valor prognóstico de células tumorais circulantes (CTCs) em câncer de ovário tem sido investigado em estudos anteriores, mas os resultados são controversos. Por isso foi realizada uma meta-análise para avaliar sistematicamente esses dados e avaliar o valor de CTCs no câncer de ovário.

Materiais e Métodos

A pesquisa literária para estudos relevantes foi realizada em Embase, Medline e web of Science. Então reunidas as taxas de risco (h) para a sobrevivência, com intervalos de confiança de 95% (IC), análises de subgrupos, análises de sensibilidade, análise de meta-regressão e viés de publicação foram realizadas.

Resultados

Este meta- a análise é baseada em 11 publicações e compreende um total de 1129 pacientes. O valor prognóstico do estado CTC foi significativa na sobrevida global (OS) (HR, 1,61; 95% CI, 1,22-2,13) ​​e sobrevida livre de progressão (PFS) de sobrevivência /livre de doença (DFS) (HR, 1,44; 95 % CI, 1,18-1,75). Além disso, análise de subgrupo revelou que o valor do status CTC no OS foi significativa em “RT-PCR” subgrupo (HR, 2,02; IC 95%, 1,34-3,03), ao passo que não foi significativa em “CellSearch” subgrupo (HR, 1,15 IC 95% 0,45-2,92) e “outros ICC” subgrupo (HR, 1,09; IC 95% 0,62-1,90). A presença de CTC também foi associado com um aumento da CA-125 (OR, 4,07; IC 95%, 1,87-8,85).

Conclusão

Nosso estudo demonstra que o estatuto CTC está associada a OS e PFS /DFS no cancro do ovário

Citation:. Zhou Y, Bian B, Yuan X, Xie G, Ma Y, Shen L (2015) valor prognóstico da circulação células tumorais no câncer de ovário: a Meta-Analysis . PLoS ONE 10 (6): e0130873. doi: 10.1371 /journal.pone.0130873

editor: Jeffrey Chalmers, The Ohio State University, Estados Unidos

Recebido: 16 de dezembro de 2014; Aceito: 26 de maio de 2015; Publicação: 22 de junho de 2015

Direitos de autor: © 2015 Zhou et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Disponibilidade de dados: Todos os dados relevantes estão dentro do papel e seus arquivos de suporte de informação

Financiamento:.. Este trabalho foi financiado pela National Science Foundation Natural da China (Lisong Shen 81.372.641, Yunlan Zhou 81.401.946, Xiangliang Yuan 81.472.244)

Competindo interesses: os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

o câncer de ovário é a segunda principal causa de morte entre malignidades ginecológicas no mundo [1] devido ao fato de que a maioria. dos pacientes são diagnosticados em fases tardias da doença [2]. Em tal cenário, identificando indicadores de prognóstico para pacientes com câncer de ovário é crucial. CA-125 é um biomarcador usado frequentemente no cancro do ovário, mas algumas condições não malignas também causar dosagem de CA-125 concentrações elevadas [3]. Assim marcadores prognósticos adicionais são urgentemente necessárias para câncer de ovário.

CTCs são células tumorais que derramaram na corrente sanguínea a partir dos tumores primários, recorrências, ou metástases, e possuem características antigênicas e genéticos específicos do tumor. Dois dos principais métodos de detecção foram usadas para identificar CTC, incluindo imunocitoquímica (ICC), reacção em cadeia da polimerase-transcriptase reversa (RT-PCR). US Food and Drug Administration (FDA) só aprovou o sistema CellSearch para uso clínico atualmente, o que enriquece e detecta CTC de origem epitelial, por meio de métodos ICC. Não há estudos de polimorfismo publicadas associadas com CTC em cancro do ovário em estudos anteriores.

CTC demonstraram ter valor prognóstico em pacientes com cancro da mama, colorectal, gástrico, de pulmão e pancreático em meta-análises anteriores [4 -8]. No entanto, o valor da CTC no cancro do ovário ainda permanece controverso. Alguns estudos não encontraram correlação entre o estado CTC e prognóstico. Em contraste, outros estudos revelaram associação entre o estado CTC e prognóstico. Depois de analisar os resultados contraditórios de estudos anteriores, foi realizada a primeira meta-análise para investigar o valor prognóstico de CTCs no OS e DFS /PFS em pacientes com câncer de ovário confirmado por exames histopatológicos. Além disso, as análises de subgrupo foram conduzidos para avaliar se o método de detecção e métodos de tratamento influenciar o valor prognóstico de CTCs.

Métodos

Estratégia de busca

A pesquisa literária para estudos de potencial foi realizada em Embase (de 1974 a 1 de Novembro, 2014), Medline (de 1966 a 1 de Novembro, 2014) e web of Science Bancos de Dados incluindo Science Citation Index Expanded, Ciências Sociais Citation Index, Arts Índice Humanities Citation, Conference Proceedings Citation Index-Science, Conference Proceedings Citation Index Social-Science Humanidades, Current Chemical Reactions (de 1985 a 01 de novembro de 2014). combinações de termos de pesquisa foram “cancro do ovário”, “O câncer de ovário”, “carcinoma do ovário”, “carcinoma do ovário”, “carcinoma ovário”, “células tumorais circulantes”, “células tumorais circulantes”, “células cancerígenas circulantes”, “câncer circulando célula “,” CTCs “e” CTC “no título /resumo. artigos relevantes também foram selecionados manualmente para evitar a omissão de qualquer pesquisa. Se os dados em estudos eram insuficientes, entramos em contato com os autores por e-mail. E posteriormente foram excluídos os estudos quando os autores não pôde ser contatado

Critérios de selecção e avaliação da qualidade

Os estudos foram selecionados a partir de pesquisa inicial utilizando os seguintes critérios de inclusão:. (1) dados de sobrevivência foram analisadas para o valor prognóstico de CTCs no câncer de ovário; (2) dados suficientes foram fornecidos para determinar RH com intervalo de confiança de 95% (Cl); (3) quando a mesma população do estudo foi publicado em vários relatórios, apenas o mais completo foi selecionado para a nossa meta-análise; (4) mais de 30 pacientes foram incluídos em cada estudo; (5) relatórios em Inglês eram elegíveis. Estudos com comentários, cartas, editoriais, resumos, comentários e relatos de casos também foram excluídos.

avaliados dois investigadores, independentemente da qualidade dos estudos incluídos, utilizando a Escala de Newcastle-Ottawa (NOS). Uma pontuação de zero pontos significava o estudo teve a pior qualidade, enquanto uma pontuação de nove pontos significava o estudo teve a melhor qualidade. Quando discordâncias ocorreu, eles foram resolvidos por discussão. Realizamos, também, subgrupo e análises de sensibilidade para avaliar a qualidade do estudo

Os dados de extração

seguintes detalhes foram extraídos do estudo incluiu:. Nome do primeiro autor, ano de publicação, país dos pacientes, número de pacientes , estágio da doença, métodos de detecção CTC, gene antígeno /target alvo, corte definindo positividade do CTC, o HRS com IC de 95% para PFS, DFS, OS. Horas e ICs de 95% foram extraídos a partir de análises multivariadas. Quando não foram extraídos directamente do estudo original, que foram calculados pelo método de Tierney et al. [9]. Quando mais de uma amostra de sangue por paciente foi detectado em diferentes pontos de tempo, tais como linha de base, no meio da terapia e pós-terapia, que só investigou valor basal da CTC no câncer de ovário.

Análise estatística

à medida que os métodos de detecção de CTCs e as taxas de detecção de CTC em pacientes eram muito diferentes entre os estudos, foi utilizado um modelo de efeitos aleatórios para o cálculo do HR reunidas [10,11]. Para avaliar potenciais fontes de heterogeneidade, as análises dos subgrupos foram realizadas por métodos de detecção e métodos de tratamento. A análise estratificada em relação à população não foi realizada porque a maioria dos estudos incluídos eram de países do Cáucaso. análises de regressão-Meta também foram utilizados para avaliar as potenciais causas de heterogeneidade (um valor de p 0,05 foi considerado estatisticamente significativo). Para avaliar a influência de estudos individuais sobre os RHs agrupados, foi realizada uma análise de sensibilidade através da estimativa do FC média na ausência de cada estudo. Para investigar se um viés de publicação pode ter afetado a validade das estimativas [12], foi realizado gráfico de funil de Begg e teste de Egger de regressão linear (um valor de p 0,05 foi considerado estatisticamente significativo). STATA versão 12.0 foi realizada para processar todos os dados.

Resultados

Características dos estudos identificados

O estudo seguiu os critérios para revisão sistemática e meta-análise de associação genética estudos (S1 e S2 listas de verificação). O fluxograma da estratégia de busca de artigos é apresentado na Figura 1 e S1 Tabela. 295 artigos relacionados com as palavras-chave foram inicialmente revisto. Desses artigos, 280 foram excluídos após a exibição de títulos, palavras-chave e resumos, porque eles estavam obviamente irrelevantes estudos, duplicatas, revisões, resumos e comentários. Mais 4 artigos foram excluídos depois de analisar os textos completos por causa de dados insuficientes, várias publicações e pequeno tamanho da amostra, deixando 11 estudos elegíveis [13-23]. publicados entre 2002 e 2014. Tal como mostrado na Tabela 1, um total de 1129 pacientes (variando de 30 a 216 para estudos individuais) foram incluídos na nossa meta-análise. A taxa de detecção de CTC nestes doentes variaram de 12% a 83%. A maioria dos estudos eram de países do Cáucaso [13-16,18,20-23]. Um estudo era de países asiáticos [17] eo outro era do multi-país [19]. Métodos utilizados para detectar CTCs foram sistema CellSearch, outra ICC eo RT-PCR. 64 mulheres com cancro foram incluídos no estudo de Judson [15], mas apenas 51 pacientes com diagnóstico novo foram incluídos nas distribuições de Kaplan-Meier. 60 pacientes foram incluídos no estudo de Behbakh, ao passo que apenas 43 pacientes foram incluídos nas distribuições de Kaplan-Meier PFS para CTCs de pré-tratamento [14]. Horas com IC de 95% foram diretamente extraídas de artigos originais em três estudos [17,19,23]. Horas com IC de 95% não estavam diretamente relatada em oito estudos [13-16,18,20-22] e calculados a partir de curvas de Kaplan-Meier sugeridos por Tierney et al. [9]. avaliação da qualidade dos estudos incluídos é mostrada na Tabela 2.

CTC e OS

HR agrupada.

horas para PFS /DFS foram disponível em dez estudos [13,15-23]. O HR reunidas demonstraram um risco significativamente aumentado de mortalidade em pacientes com grupo positivo CTC (HR, 1,61; IC 95%, 1,22-2,13; Fig 2). Heterogeneidade entre os estudos não foi observada (P = 0,207 e eu

2 = 25,7%).

OS = sobrevida global.

análises de subgrupos.

quando se trata de métodos de detecção CTC, os pacientes apresentam CTC apresentaram um risco significativamente aumentado de mortalidade no “RT-PCR” subgrupo (HR, 2,02; IC 95%, 1,34-3,03; Fig 3), ao passo que não foi significativa no subgrupo “CellSearch” (HR, 1,15; IC 95% 0,45-2,92) e “outros ICC” subgrupo (HR, 1,09; IC 95% 0,62-1,90). A heterogeneidade estatística não foi encontrado no “RT-PCR” subgrupo “, CellSearch” subgrupo e “outros ICC” subgrupo (I

2 = 46,7%, P = 0,131; I

2 = 42,9%, P = 0,186 e I

2 = 0,0%, P = 0,771, respectivamente). Além disso, nós também investigou o valor prognóstico de CTCs para pacientes que receberam diferentes métodos de tratamento. Os pacientes receberam quimioterapia isoladamente em dois estudos e cirurgia (cirurgia sozinho ou cirurgia e quimioterapia) nos outros oito estudos. Os resultados mostraram o valor prognóstico de CTCs para OS foi significativa no “Cirurgia” subgrupo (HR, 1,70; IC 95%, 1,23-2,36; Fig 4) e não foi significativa no “Quimioterapia” subgrupo (HR, 1,15; 95% IC 0,45-2,92). A heterogeneidade estatística não foi encontrado em ambos os subgrupos “Cirurgia” e “Quimioterapia” subgrupo (I

2 = 28,8%, P = 0,199 e eu

2 = 42,9%, P = 0,186, respectivamente).

Subgrupo com base em diferentes métodos de detecção de CTC. OS = sobrevida global; ICC = imunocitoquímica; RT-PCR = RT-PCR-; CTC = células tumorais circulantes.

A análise de subgrupos baseados em diferentes métodos de tratamento. OS = sobrevida global.

CTC e PFS /DFS

HR agrupada.

horas para PFS /DFS estavam disponíveis em dez estudos [13-16,18 -23]. A FC reunidas estimado mostrou um aumento no risco de progressão da doença em pacientes com grupo positivo CTC (HR, 1,44; IC de 95%, 1,18-1,75; Figura 5). A heterogeneidade entre os estudos não foi observada (P = 0,918, eu

2 = 0,0%)

DFS = sobrevida livre de doença.; PFS = sobrevida livre de progressão

Meta-análises de regressão

Realizamos a análise de meta-regressão com base nos seguintes co-variáveis:. Percentagem de estágio avançado (estágio IV ou estágio III) , método de detecção (ICC vs. RT-PCR), ano de publicação, tipo de tratamento (cirurgia vs. quimioterapia) eo tamanho da amostra ( = 90 vs. 90). Como mostrado na S2 Mesa, nenhuma associação significativa pode ser observada na percentagem de fase avançada (p = 0,645), método de detecção (0,118), ano de publicação (0,619), tipo de tratamento (0,469) eo tamanho da amostra (0,059).

CTC e CA-125

CA-125 é também um marcador tumoral prognóstico útil para a sobrevivência no cancro do ovário. Cinco estudos relataram dados sobre correlação entre a presença de CTC e elevado CA-125. Destes, um estudo [17] confirmaram a correlação entre o CTC e CA-125. Por outro lado, quatro estudos [18-20,22] sugeriu nenhuma correlação entre CTC e CA-125. resultados obtidos a partir de cinco estudos demonstraram uma forte correlação entre a presença de CTC e aumento da CA-125 (OR, 4,07; IC 95%, 1,87-8,85; Fig 6)..

CTCs = células tumorais circulantes

as análises de sensibilidade e viés de publicação

a fim de avaliar a influência de estudos individuais sobre os RHs agrupados, foi realizada uma análise de sensibilidade através da estimativa do FC média na ausência de cada estudo. Os resultados indicaram que não há estudos individuais influenciou significativamente os RHs em pool (Fig 7). gráfico de funil de Begg (P = 1, Fig 8) e teste de regressão linear de Egger (P = 0,806) não apresentaram evidência de viés de publicação.

A análise foi realizada através da estimativa do FC média na ausência de cada estudo . índices HR = perigo; OS = sobrevida global

CTCs = células tumorais circulantes.; OS = sobrevida global.

Discussão

Muitos estudos têm relatado o valor prognóstico de CTCs em pacientes com câncer de ovário, e esta é a primeira meta-análise que avalia o valor de CTCs no estes pacientes. No geral, nossos resultados demonstraram que os pacientes do grupo CTC-positiva teve um OS pior e PFS /DFS em comparação com o grupo negativo CTC; Além disso, a presença de CTCs foi associada com elevada CA-125.

A análise de subgrupo mostraram que subgrupo “RT-PCR”, apresentado associação significativa entre CTCs e OS, ao passo que não foi significativa no subgrupo “CellSearch” e subgrupo “Outros ICC”. Mas o método de detecção não influenciou as estimativas de RH na meta-regressão (P = 0,118). Embora o sistema CellSearch que usa EpCAM para isolamento de células é o único teste CTC aprovado pelo FDA dos EUA para o uso clínico atualmente, ele tem algumas limitações. EpCAM podem ser reprimidos por células-tronco cancerosas no processo de transição mesenquimal epitelial [24]. Assim, este sistema sofre de sensibilidade relativamente baixa, os métodos de detecção inovadoras adicionais podem revelar mais células tumorais [25]. Por outro lado, o sistema de CellSearch também pode apresentar fraca especificidade devido a não especificidade biológica [26]. Portanto, as metodologias que não utilizam marcadores epiteliais sozinho para o isolamento de células podem ser mais propensos a associar com OS de acordo com nossa análise de subgrupo.

Além disso, análise de subgrupo com base em métodos de tratamento mostraram o valor prognóstico de CTCs para OS foi significativa no subgrupo “Cirurgia”, enquanto ele não foi significativa no subgrupo “quimioterapia”. No entanto, é difícil determinar se a métodos de tratamento de influenciar o valor prognóstico do CTC. A razão para a desvantagem é que não houve uma diferença notável no momento para a detecção CTC, resposta ao tratamento, os regimes de quimioterapia e planos operativos. Mais estudos são necessários para investigar o fator relevante prognóstico.

Para explorar potenciais causas de heterogeneidade, foi realizada meta-regressão para avaliar se percentagem de pacientes em estágio avançado (estágio IV ou estágio III) iria influenciar o valor prognóstico da CTCs. Nenhuma associação pode ser observada (p = 0,645), o que significava que o valor prognóstico de CTCs não foi associada com o estágio da doença. Além disso, nenhuma associação significativa pôde ser observado no ano de publicação (0,619) Tipo de tratamento (0,469) eo tamanho da amostra (0,059).

A nossa meta-análise também confirmou a presença de CTC foi intimamente associado com elevada CA-125 , sendo que ambos são conhecidos por ser ferramenta de prognóstico no câncer de ovário.

Nosso estudo tem algumas limitações. Em primeiro lugar, os métodos de detecção CTC foram diferentes entre os estudos incluídos, que podem influenciar em parte o significado em análises de sobrevivência. Em segundo lugar, não há consenso sobre o corte ideal de CTCs para prever o resultado clínico em câncer de ovário. A baixa de corte de ≥2 CTC /7,5 ml de sangue com o sistema CellSearch foi utilizado em três estudos [14,16,19], e outros estudos utilizaram diferentes pontos de corte. Embora Fan et al. apresentaram maior contagem CTC poderia refletir doença fase posterior e superior CA-125 níveis [20], poucos estudos tinham avaliados pelo valor prognóstico de diferentes números de enumerar CTCs em pacientes com câncer de ovário. Mais estudos são necessários para avaliar os níveis de corte CTC relevantes prognósticos. Em terceiro lugar, alguns estudos incluídos na meta-análise foram pequena caixa-série, portanto, mais grandes estudos prospectivos devem ser realizados.

Em conclusão, esta meta-análise indica que o status CTC está associada a OS e PFS /DFS em pacientes com câncer de ovário. Para alcançar utilidade clínica de CTCs no câncer de ovário, mais grandes estudos prospectivos devem ser conduzidos antes da detecção CTC pode ser aplicada para a utilização clínica como indicação do prognóstico.

Informações de Apoio

S1 Checklist. . PRISMA lista

doi: 10.1371 /journal.pone.0130873.s001

(DOC)

S2 Checklist. Meta-análise sobre genética lista de verificação estudos de associação

doi:. 10.1371 /journal.pone.0130873.s002

(DOC)

S1 Table. Os artigos excluídos e os motivos da exclusão

doi: 10.1371. /Journal.pone.0130873.s003

(DOC)

S2 Table. Os resultados da análise de meta-regressão explorar fonte de heterogeneidade, com sobrevida global

doi:. 10.1371 /journal.pone.0130873.s004

(DOC)