Abstract
O MUC4 mucina é um alto peso molecular, membrana-limite, e altamente glicosilada proteínas. É uma proteína de múltiplos domínios, que é clivada em putativamente um grande subunidade do tipo mucina (MUC4α) e um factor de crescimento-C-terminal como subunidade (MUC4β). MUC4 desempenha um papel crítico em condições fisiológicas e patológicas e é sobre-expresso de forma aberrante em muitos tipos de cancro, incluindo os do pâncreas, cérvix, mama e pulmão. É também um biomarcador potencial para o diagnóstico, prognóstico e progressão de várias malignidades. Além disso, MUC4 desempenha diversos papéis funcionais na iniciação e progressão de cancro, como é evidente a partir do seu envolvimento na transformação oncogénica, a proliferação, a inibição de apoptose, motilidade e invasão, e a resistência à quimioterapia em células cancerosas humanas. Temos gerado previamente um anticorpo monoclonal 8G7, que é dirigido contra a região de TR MUC4, e tem sido amplamente utilizado para estudar a expressão de MUC4 em várias malignidades. Aqui, nós descrevemos a produção de anticorpos anti-MUC4 dirigidos contra as regiões não-TR de MUC4. Recombinante glutationa-S-transferase (GST) -fused fragmentos MUC4α, tanto a montante (MUC4α-N-Ter) e a jusante (MUC4α-C-Ter) do domínio TR, foram utilizados como imunogénios para imunizar ratinhos BALB /c. Após a fusão celular, os hibridomas foram pesquisados utilizando as proteínas recombinantes acima mencionados lisados de anúncios de linhas de células pancreáticas humanas. Três anti um anticorpos anti-MUC4α-C-ter MUC4α-N-Ter e foram caracterizadas por vários inmmunoassays incluindo um ensaio de imunossorvente ligado a enzima (ELISA), immunoblotting, immunofluorescene, citometria de fluxo e imunoprecipitao usando MUC4 expressando linhas de células de cancro pancreático humano. Os anticorpos também feito reagir com o MUC4 em secções de tumores pancreáticos humanos na análise imuno-histoquímica. Os novos anticorpos anti-MUC4 de domínio específico servirá como reagentes importantes para o estudo da relação estrutura-função de domínios MUC4 e para o desenvolvimento de diagnósticos e terapias baseadas em MUC4
Citation:. Jain M, Venkatraman G, Moniaux N, S Kaur, Kumar S, Chakraborty S, et al. (2011) Anticorpos monoclonais Reconhecendo a repetição regiões não Tandem da mucina MUC4 Humano no cancro do pâncreas. PLoS ONE 6 (8): e23344. doi: 10.1371 /journal.pone.0023344
editor: Dhyan Chandra, Roswell Park Cancer Institute, Estados Unidos da América
Recebido: 27 de junho de 2011; Aceito: 12 de julho de 2011; Publicado: August 23, 2011