Abstract

Purpose

Para avaliar se o tempo T

1 relaxamento da Os tumores podem ser usadas para avaliar a resposta à terapia anti-angiogénica bevacizumab. Procedimentos: 12 ratinhos nus do sexo feminino com tumores ovarianos SKOV3ip1-LC subcutâneas foram administradas bevacizumab (6.25ug /g, n = 6) ou PBS (controlo, n = 6) terapia duas vezes por semana durante duas semanas. T

1 mapas de tumores foram gerados antes, dois dias, e 2 semanas após o início da terapia. O peso do tumor foi avaliada por MR e na necropsia. Histologia de densidade de microvasos, proliferação e apoptose foi realizada

Resultados

Bevacizumab tratamento resultou na inibição do crescimento do tumor. (P 0,04, n = 6), o que confirma a eficácia terapêutica. Tumor vezes t

1 relaxamento aumentado em ratinhos tratados bevacizumab 2 dias e 2 semanas após o início da terapia (p 0,05, n = 6). densidade de microvasos diminuiu 59% e a proliferação celular (Ki67 +) diminuiu de 50% no grupo de tratamento com o bevacizumab (p 0,001, n = 6), mas não apoptose

Conclusões

Os resultados sugerem que. aumentou tumor tempo T

1 relaxamento é associado com a resposta à terapêutica bevacizumab no modelo de cancro do ovário e pode servir como um indicador precoce de resposta

Citation:. Ravoori MK, Nishimura M, Singh SP, Lu C, Han G, Hobbs BP, et ai. (2015) Tumor T

1 Tempo de abrandamento para avaliar resposta ao Bevacizumab Anti-angiogénicos terapia em um modelo de cancro do ovário mouse. PLoS ONE 10 (6): e0131095. doi: 10.1371 /journal.pone.0131095

editor: Chryso Kanthou, da Universidade de Sheffield, Reino Unido

Recebido: 18 de julho de 2014; Aceito: 28 de maio de 2015; Publicação: 22 de junho de 2015

Direitos de autor: © 2015 Ravoori et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Disponibilidade de dados: Todos os dados relevantes estão dentro do papel e seus arquivos de suporte de informação

Financiamento:. Este trabalho foi financiado por doações do NIH (CA109298, CA159042, P50CA083639, U54CA151668, CA016672). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

a angiogênese é o processo de novo crescimento dos vasos sanguíneos a partir de vasos pré-existentes e é crucial para o crescimento de células cancerígenas. vasos angiogénicos tendem a ser anormal, por exemplo, que têm estrutura heterogénea e desorganizada [1] e um aumento da permeabilidade. O processo é regulado por um equilíbrio de fatores pró-angiogénico e antiangiogênicos, que, mediante o interruptor de células tumorais a um fenótipo angiogênico, leva ao crescimento e progressão tumoral. A lógica da terapêutica anti-angiogénica é baseado no conceito de que a normalização da vasculatura tumoral, a poda de vasos anormais, e bloqueio da nova angiogénese provoca a estabilização do tumor [2,3]. A família do factor de crescimento endotelial vascular (VEGF) de proteínas e receptores desempenham um papel chave neste processo.

O bevacizumab (Genentech, Inc., South San Francisco, CA) é um anticorpo humanizado anti-VEGF IgG1 monoclonal que inibe a via de VEGF. Ele foi aprovado pela U.S. Food and Drug Administration (FDA) em 2004 para o tratamento de câncer colorretal avançado, em combinação quimioterapia padrão. Posteriormente, foi aprovado para o tratamento de câncer avançado de pulmão não pequenas células, cancro do rim e glioblastoma [4-12].

O câncer de ovário é o mais letal entre as neoplasias malignas ginecológicas e terapias para além da cirurgia não são muito eficazes . Terapias enfocadas na estroma, tais como inibidores da angiogénese, representam novas abordagens. No câncer de ovário, ensaios clínicos prospectivos foram realizados utilizando Bevacizumab [13-16]. Entre estes, o maior ensaio único agente, Gynecologic Oncology Group (GOG) 170D julgamento, encontrou uma taxa de resposta de 21% em pacientes com câncer ovariano recorrente; e, 40% dos pacientes foram a progressão livre em 6 meses [13]. resposta prevendo que a seleção aide paciente para a eficácia e evitar a terapia fútil e suas complicações. O mecanismo de bevacizumab é ligar VEGF circulante, o que inibe a sua ligação aos seus receptores em células endoteliais, assim, alterar a sua função e crescimento. As alterações funcionais, tais como diminuição da permeabilidade capilar e redução morfológica em número de micro-vascular deve resultar em características de tecidos alterados, tais como a constante de tempo de relaxação spin-rede (T

1). A ressonância magnética (MRI) fornece excelente resolução de imagem e contraste, sem radiação ionizante. Ele baseia-se na medição da distribuição espacial dos núcleos de hidrogénio, como ponderadas por processos de relaxação que se baseiam no seu ambiente local e molecular num campo magnético. T

1 caracteriza a taxa de retorno do sinal longitudinal ao equilíbrio. T

1-ponderada imagens são geralmente vistos clinicamente, mas geralmente não são obtidos quantitativamente. Neste trabalho, nós empregamos quantitativa T

1 avaliação. Os tecidos têm constantes de tempo de relaxação característicos que podem ser alteradas ou pela doença fisiologicamente [17-19]. Assim, a terapia também tem potencial para alterar a t

1. Usando T

1 para prever a resposta à terapia angiogénicos está sob investigação [20, 21]. Se o t

1 tempos de relaxação de tumores pode ser usado para avaliar a resposta a terapia angiogénica com bevacizumab não é conhecida para o cancro do ovário. Foi avaliado se o T

1-valor de tumores poderia ser usado para avaliar a resposta ao bevacizumab terapia anti-angiogénicos num modelo de xenoenxerto de cancro do ovário humano.

Material e Métodos

cultura celular

A linha de células de cancro do ovário SKOV3ip1-LC derivada de um adenocarcinoma de ovário foi cultivada em meio RPMI-1640 suplementado com 10% FBS e antibióticos (50 ug /ml de sulfato de gentamicina, Cellglo, Medlatech, Inc. Manassas VA) a 37 ° C numa atmosfera de dióxido de carbono a 5%.

Animais

ratinhos nus atímicos fêmea (NCr-nu) foram adquiridos a partir do Instituto Nacional do Câncer, Cancer Research Frederick e Centro de Desenvolvimento (Frederick, MD ) e mantidas em condições específicas isentas de patogénios. Os animais foram tratados de acordo com as diretrizes estabelecidas pela Associação Americana de Acreditação do Laboratório Animal Care e da Política de Serviço de Saúde Pública dos Estados Unidos no cuidado humano e Uso de Animais de Laboratório. Todos os estudos com ratos foram aprovados e supervisionados pela University of Texas-M.D. Comité Institutional Animal Anderson Cuidado e Uso (protocolo 01-12-01331). O protocolo incluiu sacrifício de animais moribundos ou que têm a carga tumoral em excesso.

1×10

6 células foram injectadas subcutaneamente em 12 camundongos nu feminino no flanco perto da espinha para mitigar moção sobre MR subsequente. Duas semanas depois, ressonância magnética foi realizada para avaliar o tamanho do tumor e para obter T

1 Mapas pré-terapia. Posteriormente, os animais foram divididos aleatoriamente em dois grupos de seis cada um. O grupo de tratamento receberam uma injecção intraperitoneal de bevacizumab (6.25ug /g em 200 ul de solução salina tamponada com fosfato, PBS), duas vezes por semana durante duas semanas. O grupo controle recebeu injeções intraperitoneais de PBS no mesmo horário. RM também foi realizada dois dias e duas semanas após o início da terapia. Duas semanas após o início do tratamento, os ratinhos foram sacrificados, o peso do tumor foi registado, e o tecido dividido para fixação em formalina ou foram congelados em temperatura de corte óptima (OCT) meios de comunicação.

Imagem por Ressonância Magnética

ressonância magnética foi realizada de pré-terapia, em seguida, dois dias e duas semanas após o tratamento inicial. Todos os estudos foram realizados de MR utilizando um scanner 4.7T (Bruker Biospec, 47/40 USR, Bruker Biospin, Billerica, MA) com um gradiente de inserção de 60 mm e um ressonador de volume com um diâmetro interno de 35 mm. Os animais foram anestesiados com 2% de isoflurano e colocado de cabeça e propenso em um trenó de posicionamento. Ortogonais scans de escoteiros 3-plano foram adquiridos inicialmente para confirmar o posicionamento animal. colocação de animais e localização do tumor foram confirmadas usando imagens axiais e coronais ponderadas em T2 (tempo de repetição = 2750 ms, tempo de eco efetiva (TE) = 50 ms, echo train = 8; campo de visão (FOV) = 4 centímetros x 3cm, espessura de corte = 1 mm, de imagem matriz = 128 x128, número de médias de sinal = 2). T quantitativa foi realizada

uma avaliação. Uma sequência de saturação de recuperação de spin-eco rápido (TR = 110-10,000 MS [110ms de demora, 200ms, 400ms, 600ms, 1,000ms, 2,000ms, 4,000ms, 6,000ms, 10,000ms]; TE = 50 ms; echo train = 8 ; campo de visão (FOV) = 4 centímetros x 3cm; imagem matriz = 128 x128; número de médias de sinal = 1) foi utilizado para medir a T

1 do tecido tumoral utilizando regiões de interesse (do ROI) abrangendo todo o tumor. T

2 imagens ponderadas foram usadas para identificação assessor de margens tumorais. Paravision versão 4 foi usada para calcular a T valores

1 de relaxamento por encaixe de forma exponencial do sinal como uma função de TR. regiões extraídas manualmente de interesse em cada imagem contendo tumor ponderada em T2 foram usadas para derivar peso do tumor, como descrito anteriormente [22]. Resumidamente, utilizando o software Image J. (National Institutes of Health, EUA), em cada imagem que contém um tumor, a periferia da massa foi rastreada e foi calculada a área da região traçada. As áreas foram então multiplicado pela espessura da fatia mais pular para obter o volume de tumor em cada fatia e estes volumes adicionados. Assumindo que uma densidade do tecido de 1 g /mL, para derivar o peso, o volume em milímetros

3 foi multiplicado por 0,001 g de tecido /mm

3.

A imuno-histoquímica

imuno coloração de Ki67 e CD31 foi realizada. Para a coloração de Ki67, amostras de tecido embebidas em parafina fixadas com formalina foram cortadas em secções de 5 | im. Após desparafinização, recuperação de antigénio foi realizada por aquecimento da corrediça numa panela de vapor durante 10 minutos em 0,2 M de tampão Tris, pH 9,0. CD31 foi manchado [23] usando lâminas congeladas. peróxido endógena foi bloqueada com 3% H

2O

2 em metanol durante 12 minutos. Depois de bloco de proteína com cavalo normal e soro de cabra, as lâminas foram incubadas com anticorpo primário de Ki67 (Thermo Scientific, Fremont, CA) ou CD31 (PECAM-1, 1: IgG de rato 800, Pharmingen, San Diego, CA) em solução de bloqueio durante a noite a 4 ° C. Após lavagem três vezes com PBS, adicionou-se o anticorpo secundário anti-ratinho conjugado com HRP (Dako, Carpinteria, CA) em solução de bloqueio durante uma hora à temperatura ambiente. As lâminas foram coradas com substrato DAB (Phoenix Biotechnologies, Huntsville, AL) e contrastadas com hematoxilina Gils No. 3 (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Para quantificar a densidade micro-vasos (MVD), o micro-vasos dentro de cinco selecionados aleatoriamente 0,159 mm

2 campos de 100X foram contados. Um único micro-vaso foi definida como um conjunto discreto ou, pelo menos, três células coradas positivas para CD31. Foi necessária a presença de um lúmen para pontuar como um micro-vaso. O índice de marcação de Ki67 foi determinada por contagem de pelo menos 1000 células de tumor e o índice foi calculado como uma percentagem. TUNEL foi realizada como descrito [23].

A análise estatística

Para grupos comparando, 2 testes t pareados foram realizadas utilizando o software de planilhas (Microsoft Office Excel 2003, Microsoft, Seattle, WA) . Mínimos quadrados de regressão linear foi utilizada para avaliar o grau de dependência linear entre MR derivado peso do tumor e retirado o peso do tumor. medidas repetidas ANOVA foi utilizado para comparar a extensão da mudança relativa no T

1 tempo de relaxamento (pré-tratamento de follow-up scans às 48 horas e 2 semanas) entre ratos bevacizumab e controle. intercepta aleatórios foram usados ​​para ajustar a inferência para heterogeneidade inter-mouse, representando a interdependência entre os três varreduras repetidas intra-rato. Duas faces testes de Wald utilizando o método de estimação robusta descrito por Koller e Stahel [24] foram aplicadas para efeitos fixos caracterizam a diferença média entre bevacizumab e controlo no ponto de mudança relativa em t

um tempo de relaxamento em cada um dos dois follow-up scans. Este teste não assume uma distribuição de Gauss, possibilitando a avaliação de dados, mesmo com não-normal, enviesada distribuição. teste de Bonferroni foi utilizado para controlar a taxa de erro de Tipo I familywise ao nível de significância de 0,05 entre os dois testes para as diferenças na extensão da mudança relativa em cada varrimento de seguimento, induzindo um limite de significância de 0,025 para cada teste. ANOVA foi implementado utilizando a versão 3.0 estatística software R (R Development Core Team, https://www.r-project.org) usando o

robustlmm

pacote.

Resultados

o tamanho do tumor

Foi avaliado o efeito do bevacizumab no crescimento do tumor. inibiu o crescimento tumoral bevacizumab tratamento em comparação com o controlo, como visto por ressonância magnética (Fig 1). Antes da terapia, não houve diferença estatisticamente significativa no peso do tumor entre os dois grupos, como medido nas imagens de RM. Dois dias e duas semanas de pós-tratamento, os ratinhos tratados com o bevacizumab tinham tumores significativamente menores do que os ratos de controlo (p 0,04, n = 6) por medição tanto in vivo como ex vivo MR na necropsia (Figura 2). Nenhuma diferença foi observada em pesos dos tumores nos grupos de tratamento pré-terapia versus 2 dias ou 2 semanas após o início da terapia bevacizumab. Os pesos dos tumores derivados de In vivo de imagens MR correlacionada altamente com os pesos de tumores excisados ​​(r

2 = 0,99, P 0,001, n = 12, figura 3).

representativos imagens axiais MR de ratinhos pré -therapy (A, B) ou duas semanas após o início da terapia (C, D) com veículo (A, C) ou bevacizumab (B, D). mapas axial T1 dos mesmos tumores (E, F, G, H). As imagens de RM axiais representativos de ratos pré-terapia (E, F) ou duas semanas após o início do tratamento (G, H) com o veículo (E, G) ou bevacizumab (F, H).

O peso do tumor derivado das imagens de RM antes e duas semanas após o início da terapia, e, por necropsia duas semanas após o início da terapia. *, P 0,05. As barras de erro representam o desvio padrão.

T

1 Valores

O

1 tempo de relaxamento T foi significativamente aumentada no grupo bevacizumab tratados em relação aos controles, tanto dois dias (2302 ± 567, média ± desvio-padrão, vs 1.729 ± 209) e duas semanas (2146 ± 276 vs. 1847 ± 112) após o início da terapia (p 0,05, n = 6, Figura 4). Houve variação nos

1 valores T (S1 FIG); portanto, para ajustar o potencial de assimetria nestas comparações, frente e verso Wald testes utilizando o método de estimativa robusta descrito por Koller e Stahel [24] foram aplicadas. diferenças significativas na extensão da T

1 relaxamento modificação tempo eram evidentes entre bevacizumab e controlar coortes em cada varredura de acompanhamento após o ajuste para a multiplicidade. Estatisticamente, inferência robusta estima que a extensão da mudança relativa no tempo T

1 relaxamento foi de 16,1% (p≤0.011) maior, em média, para os ratos tratados bevacizumab quando comparados com ratinhos de controlo após 48 horas. O resultado manteve significância estatística após 2 semanas, onde o tempo T

1 relaxamento foi aumentada em 14,5% (p-value≤0.021), em média, para os ratos tratados bevacizumab. Antes do tratamento, o tempo T

1 relaxamento foi 1,877 ± 60 para os tumores de murganhos que foram subsequentemente tratadas com bevacizumab. Em comparação, o

valor T 1 não se alterou em relação aos níveis de pré-terapia (1875 ± 57) no grupo de controlo, apesar de aumento no tamanho do tumor.

valores T1 dos tumores pré, 48 horas, e dois semanas após a terapia. *, P 0,05. As barras de erro representam o desvio padrão.

Histologia

média densidade de vasos, a proliferação e apoptose foram avaliados como biomarcadores histológicos dos efeitos do bevacizumab Às duas semanas após o início da terapia. CD31 coloração foi usado para marcar os vasos. A densidade de vasos média média diminuiu em 59% no grupo de tratamento com o bevacizumab em comparação com o grupo de controlo (p 0,001, n = 6, Figura 5A). Ki67 foi usada como um marcador de proliferação celular. O índice de marcação de Ki67 foi diminuída em 50% no grupo de tratamento com o bevacizumab (p 0,0001, figura 5B) comparado com o grupo de controlo. Por outro lado, o índice de apoptose, avaliada por meio da coloração TUNEL, não foi diferente entre os dois grupos (Fig 5C).

A) coloração imuno-histoquímica para CD31 (esquerda) e densidade de microvasos (direita). B) coloração imuno-histoquímica de Ki67 (esquerda) e índice de marcação Ki67 (direita). coloração C) TUNEL (esquerda) e índice apoptótico (direita). As barras de erro representam o desvio padrão.

Discussão

A terapia anti-angiogénico com resultados bevacizumab em resposta ao tratamento em um subgrupo de pacientes com câncer de ovário. Marcadores de resposta são necessários para analisar os doentes que podem beneficiar da terapia versus terapia fútil para pacientes que estariam em risco de complicações, sem benefício terapêutico. A terapia anti-angiogênico altera a função e morfologia dos vasos sanguíneos no tecido tumoral. Os nossos dados sugerem que o aumento da t

um tempo de relaxação do tecido tumoral, fornece uma indicação precoce de resposta ao bevacizumab terapia anti-angiogénica. Este é o primeiro relatório que estamos cientes que avalia T

1 tempo de relaxamento no contexto do tumor de ovário terapia anti-angiogénico.

O exame histológico do tecido tumoral mostrou diminuição da densidade de microvasos e proliferação do bevacizumab grupo de tratamento. O crescimento do tumor foi também inibida. Estes resultados são consistentes com a arquitectura do tumor alterada e alteração funcional no crescimento do tumor. Em contraste, a taxa de apoptose não foi alterada. Estes resultados são consistentes com os dados de Rapisarda et ai. [25] que relataram que a densidade microvascular foi reduzida e expressão hipóxia inducible factor-1 (-1 HIF) gene dependente foi aumentada após o tratamento de U251 (glioblastoma) tumores com bevacizumab, mas apoptose não foi induzida.

Abnormal vasos sanguíneos e linfáticos, incluindo fraca selectividade permeabilidade devido ao alto resultado da permeabilidade vascular num aumento tumor pressão do fluido intersticial (IFP) [26]. O tratamento anti-angiogénicos resulta numa diminuição da densidade de microvasos, a permeabilidade vascular e a pressão do fluido intersticial (IFP) [27]. Em pacientes com câncer retal, com média de IFP diminuiu 15,0 mm Hg após o tratamento com bevacizumab [28]. Este parâmetro pode afectar sensível fluido t

1 [26] uma vez que está relacionada com o IFP líquido no espaço extracelular-extravascular.

anti-angiogénese terapia foi avaliado num certo número de ensaios clínicos que utilizam contraste dinâmico melhorado RM e estes têm geralmente demonstrado diminuição do coeficiente de transferência direccional para a frente, k

trans, e inicial área sob a curva, IAUC, e, em alguns estudos, o fluxo unidireccional constante K

i, mas poucos têm sido associados a sobrevida livre ou global aumentou a progressão [29]. Para bevacizumab, diminuiu K

trans foi observado [30] e, embora este é um parâmetro complexo, a descoberta sugere diminuição da permeabilidade. Este parece ser um achado comum e também tem sido sugerida em vários modelos de tumor [31-33].

Assim, a terapia bevacizumab tem efeitos de vários parâmetros vasculares que estrutura tumoral e comportamento. Isso pode afetar as características de imagem de tumores. Por exemplo, em pacientes que receberam terapia citotóxica mais bevacizumab por 2-3 meses, tumor alteração da morfologia por CT, incluindo baixa atenuação homogênea e fronteiras nítidas de metástases hepáticas colorretais correspondeu à diminuição tumor residual [34]. MR tem o maior contraste de tecidos moles do que a TC. A maioria dos tumores envolvendo o fígado tem um tempo T

1 de fígado normal, assim, a maioria das metástases parecem ser de sinal mais baixo em D

1-RM ponderadas. Padrão t

uma imagem ponderada é qualitativa e pode ser influenciada por um número de parâmetros, tais como efeitos relacionados de hardware, e parâmetros de carregamento de bobina de sequência, por outro lado, a percepção de mudança é dependente de janelas e nivelamento de imagens; Em comparação, o t

1 relaxometria dá resultados mais quantitativa e pode resultar no aumento da sensibilidade ao tecido alterações bioquímicas e estruturais com patologia [35]. T

1 mapeamento avalia tecido T

1 efeitos, a remoção de contaminação, tais como densidade de prótons, T

2, e sensibilidade bobina que influenciam T

1 imagem ponderada normal [35].

A diferença no T

uma relaxividade de tecido permite a diferenciação de diferentes tipos de tecidos. Doença de um tecido pode alterar tempo t

1 relaxamento, por exemplo, que está aumentada em pacientes com cirrose do fígado em comparação com o normal ou hepatite crónica [36], o que sugere que a mudança de arquitectura fibrótica no fígado alonga este valor. T

um tempo de relaxação foi usado em pacientes para derivar teor em água no cérebro [19] e aumentou t

um tempo de relaxação foi encontrada a correspondência com o aumento do edema no miocárdio [37], isto é, aumento de fluido no extravascular-espaço extracelular. Teoricamente, por diminuição da pressão intersticial, a quantidade de líquido no espaço extravascular-extracelular deve diminuir com a terapia de bevacizumab resultando em diminuição da t

um tempo de relaxamento. No entanto, o bevacizumab tem vários outros efeitos, tais como a poda navio e normalização, e, como se observou, diminuição da proliferação de células tumorais. Notamos um aumento no tempo T

1 relaxamento em dois dias e duas semanas após a terapia, sugerindo que outros efeitos do bevacizumab em parâmetros de tecido tais como sobre o fluxo sanguíneo, celularidade, arquitetura e drenagem linfática pode ter contribuído para o aumento da T

1 vez relaxamento que oprimido a diminuição teórica no tempo T

1 relaxamento esperado de inibir a permeabilidade vascular sozinho.

T

1 tempo de relaxamento foi avaliada em estudos com ratos anteriores no ambiente de quimioterapia. McSheehy et ai. avaliaram vários agentes quimioterapêuticos que provocam o encolhimento de tumores e encontrou decréscimo na t

um tempo de relaxamento com a resposta, incluindo um inibidor da angiogénese PTK /ZK em murino B16 /tumores de melanoma BL6 [38]. Weidensteiner et ai. a partir do mesmo grupo também encontrou decréscimo na t

um tempo de relaxamento em resposta a um inibidor de mTOR em RIF-1 e tumores de fibrossarcoma diminuição na Ki67, mas não significa que a densidade de vasos [39]. Estudos mais antigos notaram aumento ou diminuição de T

1 tempo de relaxamento com o tratamento [40-43]. As diferenças podem ser devido ao modelo terapêutico, de animais e diferentes métodos de cálculo T

um tempo de relaxamento. Além disso, o aumento de tumores fraccionada resultados do teor de água em maior t

1, e embora as correlações não são muito fortes, necrose pode resultar em mais curtos t

1 que se pensa ser devido à libertação de iões paramagnéticos complexados /proteínas com desenvolvimento de necrose [43,44]. Notamos nenhuma diferença no tamanho do tumor ou tempos de T

1 de relaxamento entre os grupos tratados e não tratados pré-terapia, e sem terapia, a T

1 tempo de relaxamento não mudou, apesar de tumores em crescimento. Com a terapia de bevacizumab, o crescimento do tumor foi inibido; e, nestes tumores, tão cedo quanto dois dias após a terapia, T

tempo de 1 relaxamento aumentado. Em duas semanas, o crescimento foi ainda inibido em comparação com o grupo sem terapia e T time

1 relaxamento ainda foi aumentada. Mecanisticamente, o aumento da t

um tempo de relaxação corresponde com proliferação diminuída e diminuição da densidade média de navio, como visto na figura 5, o que sugere que o espaço extra-vascular mais extra-celular tornou-se disponível para o fluido. Uma limitação deste estudo é que o espaço extra-vascular extra-celular não foi medido diretamente, no entanto, os relatórios anteriores também sugerem que o aumento da T

1 sugere aumento do volume extracelular [45]. Uma limitação potencial deste trabalho é a utilização de tumores subcutâneos. Embora os modelos ortotópicos são comumente usados, assim são os modelos subcutâneos [46-49]. Um problema para imagiologia intra-abdominal do rato por MR é que é propenso a artefactos de movimento devido à respiração. Devido aos tempos de aquisição relativamente longos necessários para T

1 mapeamento, nós quisemos limitar o potencial de artefatos de movimento interferem com a T

1 cálculo. Por isso, foi utilizado um modelo subcutânea em que o tumor poderia ser colocado perto da espinha para mitigar movimento. Métodos para T

1 mapeamento em tempos clinicamente viáveis ​​estão sendo abordados [50].

No futuro, este proporciona o potencial para geração de imagens multiparamétrico incluindo imagens de contraste dinâmico para avaliar a permeabilidade vascular, imagens ponderadas em difusão para avaliar movimento molecular, e T

1 mapeamento para avaliar o t

1-relaxividade para prever a resposta à terapia anti-angiogénica. Métodos para quantificação simultânea de densidade de prótons relativa, T

1, e T

2 em prazos acessíveis para uso clínico [50] sugerem o potencial de se expandiu multiparamétrico MR quantitativa, incluindo T

1 relaxamento medições de tempo, para ser aplicada em pacientes com câncer de ovário.

Conclusão

Os resultados sugerem que o aumento do tumor T

1 tempo de relaxamento é associado com a resposta à terapêutica bevacizumab no modelo de cancro do ovário e pode servir como um indicador precoce de resposta.

Informações de Apoio

S1 Fig. Diferença de valor T1-map dia 2 ou semana 2 vs pré-terapia para tumores individuais em grupos de tratamento a partir da Figura 4.

doi: 10.1371 /journal.pone.0131095.s001

(TIF)