Sumário
Fundo
factor de crescimento de fibroblastos básico (bFGF) é conhecido por estimular a angiogénese e assim a influenciar a proliferação, migração e sobrevivência das células tumorais. Muitos estudos examinaram a relação entre a superexpressão bFGF humano e sobrevivência em pacientes com câncer de pulmão, mas os resultados têm sido mistos. Para resumir sistematicamente a função de prognóstico clínico de bFGF no cancro do pulmão, realizamos esta revisão sistemática com meta-análise.
Método
Os estudos foram identificados por uma busca eletrônica da PubMed, EMBASE, China National Infra-estrutura do Conhecimento e bases de dados Wanfang, incluindo publicações anteriores a agosto de 2014. As taxas de risco Pooled (HR) para a sobrevida global (OS) foram agregados e analisados quantitativamente por meta-análise.
resultados
Vinte e dois estudos (n = 2154) foram avaliados na meta-análise. Combinada HR sugeriu que bFGF superexpressão teve um impacto negativo na sobrevida de pacientes com cancro do pulmão (CI HR = 1.202,95%, 1,022-1,382). Nossa análise de subgrupo revelou que o HR combinada avaliação da expressão bFGF no OS no cancro do pulmão de células não pequenas operável (NSCLC) foi 1,553 (IC 95%, 1,120-1,986); o HR combinado no cancro do pulmão de pequenas células (CPPC) foi 1,667 (IC 95%, 1,035-2,299). Não houve impacto significativo da expressão de bFGF na sobrevivência em NSCLC avançado.
Conclusão
Esta meta-análise mostrou que bFGF superexpressão é um potencial indicador de pior prognóstico para pacientes com NSCLC operável e SCLC, mas não está associada com o resultado em NSCLC avançado. Os dados sugerem que a alta expressão de bFGF é altamente relacionada com mau prognóstico. No entanto, mais estudos de alta qualidade deve ser realizada a fim de fornecer a evidência adicional para o valor prognóstico do bFGF no cancro do pulmão
Citation:. Hu M, Hu Y, Ele J, Li B (2016) Valor Prognóstico de fator básico de fibroblastos crescimento (bFGF) em Câncer de pulmão: uma revisão sistemática com meta-análise. PLoS ONE 11 (1): e0147374. doi: 10.1371 /journal.pone.0147374
editor: Rafael Rosell, Instituto Catalão de Oncologia, ESPANHA
Recebido: 01 de dezembro de 2014; Aceito: 04 de janeiro de 2016; Publicação: 29 de janeiro de 2016
Direitos de autor: © 2016 Hu et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados
Data Availability:. Todos relevante os dados estão dentro do papel e seus arquivos de suporte de informação
financiamento:.. os autores não têm apoio ou financiamento para relatar
CONFLITO dE iNTERESSES:. os autores declararam que não existem interesses conflitantes
Introdução
o cancro do pulmão tornou-se um grande problema de saúde pública em todo o mundo. O prognóstico para pacientes com câncer de pulmão é pobre, com uma taxa de sobrevida em 5 anos global de cerca de 15%, e pouca melhoria tem sido feita em décadas recentes [1,2]. Além disso, há um subconjunto de pacientes que têm um prognóstico particularmente pobre, mesmo entre aqueles na mesma fase da doença. cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC) é uma doença heterogénea: a sua história natural é único em cada paciente, como heterogeneidade relacionado com o tumor, incluindo histológica e características moleculares, afecta os resultados do tratamento. Existe uma necessidade urgente de indicadores de confiança para adicionar a informação de prognóstico e gerar tratamento personalizado para além do tumor, nó, metástase (TNM) sistema de estadiamento actualmente utilizado.
A angiogénese, que é a formação de novos vasos sanguíneos a partir de o endotélio da vasculatura existente, desempenha um papel central no crescimento de tumores, progressão e metástase [3]. Uma série de factores angiogénicos são sobre-expressos em tumores, tais como o factor de crescimento endotelial vascular (VEGF) e os seus receptores, factor de crescimento de fibroblastos (FGF) e seus receptores, factor de crescimento de hepatócitos (HGF), interleucinas (IL-1, 6, e 8 ) e de células do estroma derivadas fator 1, transformando factorβ de crescimento (TGF) e endotelina [4]. Existem 18 ligandos de FGF de mamíferos e 4 receptores de FGF (FGFR1-4) [5,6]. FGF básico (bFGF), também conhecido como FGF-2, o péptido é mais extensamente estudado. bFGF é capaz de se ligar FGFR1, FGFR2, FGFR3 e, levando a auto-fosforilação de resíduos de tirosina intracelulares, os quais são envolvidos em instigar proliferação de células tumorais e invasão em vários tipos de tumores [7]. A expressão da MMP-1, HGF, Bcl2, survivina, MMP-9 e MMP-13 é regulada para cima por meio de bFGF e resulta num ganho de propriedades invasivas e anti-apoptóticos [8-11]. A desregulação da sinalização do FGF em tumores tem sido relatada em diferentes tipos de tumores. Um número de estudos exploraram o valor prognóstico do bFGF em pacientes com cancro do pulmão, mas os resultados são contraditórios, e, por conseguinte, um consenso não foi atingido. Não encontramos dados de meta-análise sobre a correlação de expressão bFGF com a sobrevivência em pacientes com câncer de pulmão. Assim, decidimos realizar uma meta-análise para investigar a associação entre bFGF superexpressão e sobrevida global (OS) no câncer de pulmão, de modo a lançar luz sobre terapia personalizada de pacientes com câncer de pulmão.
Materiais e Métodos
estratégia de procura e selecção
Foram pesquisados PubMed, EMBASE, Infra-estrutura China National Conhecimento e bases de dados Wanfang para artigos relevantes publicados até 1º de agosto de 2014. Busca de palavra chave incluído “fator básico de crescimento de fibroblastos” “bFGF”, “FGF-2”, “câncer de pulmão”, e “o prognóstico ou a sobrevivência ou o resultado”. As referências citadas pelos estudos potencialmente elegíveis foram também verificados manualmente. artigos elegíveis foram selecionados os seguintes critérios: (1) ensaios estudaram pacientes com câncer de pulmão; foi avaliada (2) associação entre bFGF e sobrevivência; (3) bFGF foi dicotomizada como uma variável categórica; (4) Os ensaios foram publicados na íntegra como um estudo completo em Inglês ou chinês para a recolha de dados; (5) apenas o mais completo ou a pesquisa recente foi incluído no caso de várias publicações. Em última análise, 22 estudos com 2154 pacientes foram incluídos na meta-análise (Fig 1).
Extração de dados e qualidade de avaliação
Cada artigo elegíveis foi avaliada de forma independente por dois investigadores (MMH e YH). As discrepâncias foram reconhecidas e amplamente discutidos. Os dados foram obtidos a partir de texto completo, incluindo o primeiro autor, ano de publicação, periódico de publicação, fonte do paciente, o tamanho da coorte, desenho do estudo, estágio da doença, histologia, método de teste, informações sobre os principais reagentes, o valor de corte, o tempo de seguimento e sobrevivência de dados. Se autores relataram ambos os resultados de análise de sobrevida univariada e multivariada, este último foi incluído na nossa análise. avaliação de qualidade foi realizado por dois investigadores independente, usando uma pontuação de qualidade de acordo com o método de Steele [12], que é a escala metodológica dos fatores prognósticos biológicos utilizados para o câncer de pulmão pelo Partido European Lung Cancer Trabalho (ELCWP). Quatro categorias são marcados, incluindo a concepção científica, metodologia laboratorial, generalização e análise. pontuações finais foram expressos em porcentagem, com valores mais altos indicando uma metodologia melhor.
Métodos estatísticos
Testes não paramétricos (Mann-Whitney) foram utilizados para comparar a distribuição dos escores de qualidade de acordo com o valor de uma variável discreta. Para a agregação quantitativa dos resultados de sobrevivência, taxa de risco (HR) e intervalos de confiança de 95% (IC) foram utilizados como valores eficazes para medir os efeitos de bFGF superexpressão na sobrevivência de pacientes com câncer de pulmão. Para os estudos sem RHs publicados ou ICs de 95%, nós tentamos entrar em contato com os autores solicitando mais detalhes, mas não tenho respostas. Por isso, utilizamos um método amplamente utilizado para estimar horas e ICs de 95% [13]. A heterogeneidade estatística entre os estudos incluídos foi avaliada usando I
2 e a estatística de Cochran Q. Para o I
2 estatística, a heterogeneidade foi interpretada como ausente (I
2 25%), moderada (I
2 = 25% -50%), ou extrema (I
2 = 50 % -100%). Para a estatística Q, p 0,10 foi considerado estatisticamente significativo para heterogeneidade. Se heterogeneidade significativa foi indicado por um valor de p 0,10, modelos de efeitos aleatórios foram usadas para relatar HRs; de outra forma, modelos de efeitos fixos foram usadas para estimar o HR reunidas quando não foi observada uma heterogeneidade substancial. Por convenção, uma HR pool 1 implícita pior sobrevida para o grupo com aumento da expressão bFGF. Para validar a robustez dos resultados da meta-análise, foi realizada análise de sensibilidade através da remoção de um estudo, por sua vez. viés de publicação foi avaliada pelo teste de Begg. análise de subgrupo foi realizada para explorar a influência do tipo histológico, estágio da doença e desenho do estudo sobre os resultados. Todos os cálculos foram realizados utilizando STATA versão 12.0 (Stata Corporation, College Station, TX). A p . 0,05 (frente e verso) foi considerada estatisticamente significativa
Resultados
Estudos elegíveis
No total, 22 estudos [14-35] publicados entre 1996 e 2014 foram elegíveis para esta meta-análise, incluindo NSCLC e cancro do pulmão de pequenas células (CPPC). O número total de pacientes incluídos foi 2154, variando de 31 a 335 pacientes por estudo (média de 98). As principais características dos 22 publicações elegíveis são relatados na Tabela 1.
IHC, imuno-histoquímica; ELISA, ensaio de imunoabsorção enzimática; AC, adenocarcinoma; SCC, carcinoma de células escamosas; Não SCC, não carcinoma epidermóide; HR, ração perigo; ED, doença extensa fases; LD, limitado-estágio da doença; NA, não aplicável; NSCLC, cancro do pulmão de células não-pequenas; SCLC, cancro do pulmão de pequenas células.
Estas publicações seguiram vários grupos de pacientes diferentes. Entre os 22 estudos, 4 estudos incluíram doentes com CPPC, enquanto 18 estudos incluíram pacientes com NSCLC. Os grupos NSCLC continham todos os subtipos de cancro de pulmão (n = 12), os adenocarcinomas (n = 3), carcinomas de células escamosas (SCC) (n = 1), ou os carcinomas não-escamosas (n = 2). Doze estudos no grupo NSCLC incluídos pacientes com NSCLC operáveis, enquanto os pacientes com NSCLC 4studiesincludedadvanced. Nos estudos incluídos, 10 estudos utilizados imuno-histoquímica (IHQ) e 12 estudos utilizados ELISA para determinar a expressão bFGF. Cinco estudos foram desenhados de forma prospectiva e 17 estudos foram concebidos de forma retrospectiva. Em 14 dos 22 estudos, bFGF superexpressão mostrou impacto estatisticamente significativo sobre o sistema operacional, um indicador de mau prognóstico em 7 estudos, e apenas 1 estudo identificou-o como um indicador de maior OS.
Avaliação da qualidade
a pontuação global geral variou de 45% a 71,25%, com uma média de 57,5%. Em relação à pontuação global, não houve diferença estatisticamente significativa entre os 8 estudos significativos e 14 estudos não significativos (média de 58,9% versus 56,8%, p = 0,608). Não houve diferença estatisticamente significativa foi demonstrada entre os estudos asiáticos e não-asiáticos de acordo com a pontuação global (média de 54,4% versus 59,6%, respectivamente, p = 0,105). Da mesma forma, não houve diferença no método de exame (ELISA contra IHC) ou tipo histológico (NSCLC contra SCLC) (média de 58,4% versus 56,4%, p = 0,468; média de 57,5% versus 57,4%, p = 1,00, Tabela 2 ). Devido à ausência de diferença entre os grupos classificados por as variáveis acima, foi realizada uma agregação quantitativa de todos os resultados de sobrevivência.
Pontuação distribuições são expressos pelos valores médios. IHC, imuno-histoquímica; ELISA, ensaio de imunoabsorção enzimática; NSCLC, cancro do pulmão de células não-pequenas; SCLC, cancro do pulmão de pequenas células; Significativa fator, importante fator prognóstico para sobrevida (P 0,05); Não significativo, fator prognóstico não é significativo para a sobrevivência (P 0,05).
Meta-análise
A heterogeneidade dos estudos selecionados foi examinada de acordo com o I
2 Estatística e p-valor. heterogeneidade moderada foi encontrada em todos os estudos elegíveis (I
2 = 31,03%, p = 0,073), com uma HR combinada de 1,025 (IC 95%, 0,872-1,179) conforme calculado pelo modelo de efeitos aleatórios. A análise de sensibilidade foi conduzida para explorar a heterogeneidade (Fig 2). O estudo IHC por Behrens
et al
., Que investigou a expressão bFGF no carcinoma espinocelular, foi a principal fonte de heterogeneidade [31]. Sem heterogeneidade foi encontrado entre outros estudos, quando o estudo de Behrens
et al
. foi excluído (I
2 = 0%, p = 0,630). O modelo de efeitos fixos foi aplicado para calcular o HR de 21 trabalhos. O HR combinada avaliar bFGF superexpressão no OS foi 1,202 (IC 95%, 1,022-1,382, Fig 3). Os resultados mostraram que a expressão elevada de bFGF foi associada com a má SO no cancro do pulmão. Além disso, a análise de subgrupo foi realizada de acordo com o tipo histológico (NSCLC contra SCLC). O HR para OS favoreceu pacientes com baixa expressão bFGF em SCLC (HR = 1,667, IC 95%, 1,035-2,299, eu
2 = 0%), enquanto que a expressão bFGF não teve impacto OS no grupo NSCLC como um todo ( HR = 1,16, 95% CI, 0,973-1,348, eu
2 = 0%, Fig 4). Além disso, não houve evidência que mostra a heterogeneidade em ambos os grupos. No subgrupo de NSCLC, a alta expressão de bFGF indicou pior prognóstico quando o tumor foi considerado numa fase operacional (HR = 1,553, IC 95%, 1,120-1,986, eu
2 = 0%), mas não teve influência no estágio avançado (HR = 1,060, IC 95%, 0,828-1,293, eu
2 = 0%, Fig 5). Além disso, foi realizada análise de subgrupos de acordo com a estudar design. Nenhuma heterogeneidade foi encontrada em ambos os grupos. O HR combinada avaliar bFGF superexpressão no OS em estudos retrospectivos foi de 1,37 (IC 95% 1,07-1,67). No entanto, em estudos prospectivos, bFGF superexpressão não apresentaram impacto na sobrevida (HR = 1,11, 95% CI 0,89-1,33, Fig 6).
o viés de publicação
plot funil de Begg foi realizada para avaliar o viés de publicação desta meta-análise. Estudos elegíveis investigando pacientes com NSCLC em estágio operacional e SCLC rendeu pontuação no teste de um Begg de p = 0,938 e p = 0,849, respectivamente. No viés de publicação óbvia foi encontrado em ambos os estudos retrospectivos ou prospectivos (p = 0,787 ep = 0,327, respectivamente, Arquivo S2).
Discussão
Emergentes dados sobre a via de sinalização bFGF provocou vários as empresas farmacêuticas a desenvolver medicamentos que têm como alvo bFGF e FGFR. Os esforços para desenvolver agentes anti-FGF ou FGFR também estão em andamento no tratamento do cancro [36], incluindo um novo antagonista de bFGF antiangiogénico, o que poderia potencialmente bloquear a actividade de vários ligandos para FGF e receptores, e exercer ambos os efeitos anti-angiogénicos e anti-proliferativas [37 ]. Além disso, a via de FGF-FGFR pode funcionar como um mecanismo de resistência para o tratamento anti-VEGF. Dezenas de ensaios clínicos estão sendo realizados para tratar vários tipos de câncer com brivanib como monoterapia ou em combinação com outros agentes [38,39].
SCLC é inicialmente quimiossensíveis, mas rapidamente recaídas com chemoresistance, e tem um sistema operacional de 5%. Nos últimos anos, várias novas terapias têm sido desenvolvidos para NSCLC, mas não mais do que em CPPC. A nossa análise sugeriu que a inibição da angiogénese mediada por bFGF pode também ser um tratamento eficaz para SCLC. O inibidor de FGFR blocos PD173074 crescimento SCLC
in vitro
e
in vivo
[40]. BIBF1120 é um novo inibidor angiokinase triplo predominantemente blocos FGFR, VEGF e PDGFR. Um ensaio clínico de fase II está em andamento para avaliar a eficácia da BIBF1120 em pacientes com SCLC recorrente.
Nesta meta-análise, critérios explícitos foram criados para examinar estudos elegíveis. avaliação da qualidade foi realizada independentemente por dois investigadores de acordo com a escala ELCWP projetado para fatores prognósticos biológicos. agregação quantitativa dos resultados de sobrevida foi realizada uma vez que não houve diferença significativa entre os estudos significativos e não significativos de acordo tothe pontuação global. Da mesma forma, não houve diferença na pontuação entre os estudos agrupados por análise de métodos, populações de pacientes ou tipos histológicos.
Em primeiro lugar combinado 22 estudos elegíveis e encontrou uma HR de 1.025 (95% CI, 0,872-1,179), indicando que o OS não foi associada com a expressão bFGF. No entanto, houve heterogeneidade moderada em todo o grupo (I
2 = 31,03%, P = 0,073). Um estudo que acompanhou pacientes exclusivamente SCC foi encontrado para ser a principal fonte de heterogeneidade por meio de análise de sensibilidade. O HR e 95% CI combinado não alterou significativamente quando exclusão de qualquer estudo, mas este. Nós comparamos este artigo com atenção com os outros, e nós inferir que pode haver duas razões para esta heterogeneidade. Em primeiro lugar, adenocarcinoma e SCC não são homogêneos, embora ambos são classificados como NSCLC. Neste trabalho, bFGF, FGFR1 e FGFR2 expressão foi examinada em adenocarcinoma e SCC, e expressão alta bFGF foi encontrado para ser um bom preditor de OS no SCC. No entanto, o efeito da expressão bFGF em adenocarcinoma não foi mencionado (sem qualquer descrição de texto, dados ou gráfico). Em outros relatórios, o tipo histológico inscritos foi NSCLC, não SCC ou adenocarcinoma. Além disso, o método de avaliação dos resultados IHC neste artigo foi diferente da dos outros. De acordo com Behrens
et al., Expressão citoplasmática e nuclear expressão foram calculados por diferentes métodos. superexpressão Nuclear de FGFR1 e FGFR2 significativamente correlacionada com um resultado pior. Em contraste, a sobre-expressão citoplasmática de bFGF e FGFR2 significativamente correlacionada com melhor OS. No estudo de Zhao
et al
. [27], citoplasmática e /ou coloração nuclear de células de tumor foi avaliada pelo mesmo critério simultaneamente. Os restantes 8 artigos usados IHC para avaliar a expressão de bFGF de acordo com a intensidade de coloração citoplasmática de bFGF e /ou a percentagem de células tumorais bFGF-positivos. Portanto, foram excluídos do estudo Behrens a partir da análise final. Não houve heterogeneidade nos restantes 21 estudos (I
2 = 0%, p = 0,630) e do AR reunidas era 1.202 (95% CI, 1,022-1,382), indicando um pior prognóstico com expressão alta bFGF. No entanto, em subgrupos por tipo histológico e estágio da doença, expressão bFGF permaneceram significativamente associados com o OS no CPPC e operável NSCLC, mas não em NSCLC avançado.
Foram também analisadas as possíveis razões para a diferença entre operável NSCLC e NSCLC avançado . Em primeiro lugar, foi observado que as células do sangue foram analisados em quatro estudos de NSCLC avançado, enquanto nos dez relatórios sobre NSCLC operável, expressão de bFGF foi avaliada no tecido do tumor. Existem várias fontes possíveis de bFGF no sangue, tais como plaquetas, mastócitos, macrófagos e células cancerosas [41-44]. expressão de bFGF em que o tumor é um indicador mais directa e robusta da carga tumoral do que o sangue periférico. Portanto, nós pensamos que o impacto prognóstico da expressão bFGF no sangue contra o tecido do tumor poderia explicar a diferença de associação entre os estágios de NSCLC. Em segundo lugar, a angiogénese é um processo importante e um evento biológico relativamente cedo durante a oncogénese do cancro do pulmão [45]. Em NSCLC avançado, existem muitos mais factores envolvidos na angiogénese do que no início de NSCLC. Portanto, nós especulamos que o bFGF, como um importante indutor de angiogênese, pode exercer mais influência no início de NSCLC do que em NSCLC avançado. Em 4 artigos sobre SCLC, expressão bFGF no sangue foi examinado eo HR combinado é 1,667 (IC 95%, 1,035-2,299, eu
2 = 0%). No entanto, havia apenas 4 artigos no grupo SCLC, e cada um tinha um tamanho de amostra pequena, por isso são necessários mais estudos bem projetados para tirar conclusões em SCLC.
é necessário para a identificação de um fator prognóstico molecular melhorar a previsão do prognóstico do cancro do pulmão; pode facilitar a avaliação individualizada risco-benefício para estratégias de tratamento. Mais terapia intensiva pode ser necessário para pacientes com expressão elevada para bFGF operável NSCLC e SCLC. A identificação fiável de um factor angiogénico-relacionado seria desejável, não só para a avaliação de risco, mas também para a implementação de angiogênese alvo de tratamento. Actualmente, vários inibidores da via de bFGF-FGFR são submetidos a ensaios clínicos, em particular em NSCLC. Estes agentes que visam a FGF via de sinalização, em combinação com terapia adjuvante ou neoadjvant, poderia prolongar a sobrevida de pacientes com NSCLC submetidos a ressecção cirúrgica curativa.
plot funil de Begg indicaram que o viés de publicação não estava presente na nossa análise. No entanto, o viés de publicação não pode ser totalmente evitado:. Limitamos nossa análise aos artigos publicados em Inglês ou chinês, que provavelmente introduzido viés, e não poderia ter sido um viés de publicação para positiva sobre os resultados negativos
No entanto, o nosso estudo tem várias limitações, como não podíamos impedir que todos viés potencial entre estes estudos. Apesar de 21 estudos foram incluídos na análise final, o tamanho médio da amostra foi pequeno (média de 98). Para artigos sem RH e 95% CI, entramos em contato com o autor correspondente, mas não recebeu resposta. Consequentemente, nós extrapolados essas métricas a partir dos dados ou curvas nestes artigos indiretamente, que poderia ser outra fonte potencial de viés. Diferentes métodos de examinar expressão bFGF, fonte de anticorpo primário e concentração, e valores de corte de limiar pode introduzir mais preconceito também. IHC é uma técnica relativamente complicado com muitos passos e é dependente do observador. Além disso, nossos dados de meta-análise não incluiu informações sobre a idade, tabagismo, tamanho do tumor e outros fatores, o que pode resultar em viés de confusão. Por último, foram incluídos estudos que dicotomizados expressão bFGF para o grupo de expressão alta e baixa. Outros estudos que incluíram expressão bFGF como uma variável contínua foram excluídos porque os dados não foi extraível
.
Apesar das limitações acima, a nossa meta-análise revelou que bFGF superexpressão tem um impacto significativo na sobrevida em pacientes com câncer de pulmão. Para pacientes com NSCLC e SCLC operáveis, bFGF superexpressão é um fator prognóstico desfavorável e poderia ser útil na otimização de esquemas terapêuticos. No entanto, mais estudos precisam ser realizados para investigar o valor prognóstico do bFGF a outros tipos de câncer.
Informações de Apoio
Arquivo S1. . PRISMA 2009 Checklist
doi: 10.1371 /journal.pone.0147374.s001
(TIF)
S2 Arquivo. gráfico de funil de Begg para estudos incluídos nesta meta-análise.
Funil enredo para viés de publicação de OS no câncer operável pulmão de não pequenas células (NSCLC) (Figura A no arquivo S2). gráfico de funil para o teste de viés de publicação de OS no cancro do pulmão de pequenas células (CPPC) (Figura B no Arquivo S2). gráfico de funil para o teste de viés de publicação de OS em estudos retrospectivos (figura C do Arquivo S2). gráfico de funil para o teste de viés de publicação de OS em estudos prospectivos (Figura D no arquivo S2)
doi:. 10.1371 /journal.pone.0147374.s002
(TIF)