Abstract

Fundo

-Leucina rica alfa-2-glicoproteína (LRG1) foi encontrado para ser diferencialmente expressos em soros de pacientes com cancro do ovário epitelial (EOC). O objetivo deste estudo é investigar o desempenho de LRG1 para a detecção de EOC, incluindo EOC fase inicial, e avaliar se LRG1 pode complementar CA125, a fim de melhorar a detecção de EOC usando dois conjuntos de amostras cegas independentes.

Métodos e resultados

Serum LRG1 e CA125 foram medidos por imunoensaios. Todos os ensaios foram realizados desconheciam os dados clínicos. Usando os dois conjuntos de amostras independentes (156 participantes para amostra ajustaram 1, e 233 para a amostra set 2), LRG1 foi diferencialmente expressos em casos EOC, em comparação com controles saudáveis, cirúrgicos, e benignos, e seu desempenho não foi afetado pelas condições de coleta de sangue. As áreas sob a curva ROC (AUC) para LRG1 em diferenciar casos EOC de não-casos foram 0,797 e 0,786 para a amostra conjunto 1 e 2. Para diferenciar casos EOC de controles saudáveis, os valores da AUC para LRG1 foram 0,792 e 0,794. Em uma especificidade fixa de 95%, LRG1 detecta 52%, e 53,5% dos casos EOC de controlos saudáveis ​​para a amostra 1 e fixados 2. Ao combinar LRG1 e CA125, o valor de AUC aumentada para 0,927, o qual foi melhorado em comparação com CA125 (AUC = 0,916) (

p

= 0,008) sozinho em distinguir casos EOC de não-casos. Mais importante, LRG1 também mostrou desempenho potencial em diferenciar EOC fase inicial de não-casos, com uma AUC de 0,715 para a amostra ajustaram 1, e 0,690 para a amostra definida 2. A combinação de LRG1 e CA125 resultou em uma AUC de 0,838, o que supera CA125 (AUC = 0,785) (

p

= 0,018) na detecção de casos estágio EOC início dos não-casos usando o conjunto de amostra maior.

Conclusões

LRG1 poderia ser um útil biomarcador isoladamente ou em combinação com CA125 para o diagnóstico do cancro do ovário

citação:. Wu J, Yin H, J Zhu, Buckanovich RJ, Thorpe JD, Dai J. et al. (2015) Validação de LRG1 como um potencial biomarcador para a detecção de epitelial cancro do ovário por um estudo cego. PLoS ONE 10 (3): e0121112. doi: 10.1371 /journal.pone.0121112

Editor do Academic: Anthony Federação das Índias Ocidentais Lo, Queen Mary Hospital, HONG KONG

Recebido: 14 de novembro de 2014; Aceito: 28 de janeiro de 2015; Publicação: 23 de março de 2015

Direitos de autor: © 2015 Wu et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Disponibilidade de dados: Todos os dados relevantes estão dentro do papel e seus arquivos de suporte de informação

Financiamento:. Este trabalho foi apoiado por W81XWH 10-1-0233-programa de investigação do cancro do ovário DOD (https://cdmrp.army.mil/ocrp/default. shtml) para DML e P50CA083636 e U01CA152637 Instituto Nacional do Câncer (https://www.cancer.gov/researchandfunding) para NU. Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

Com uma estimativa de 21,980 novos casos de câncer de ovário e 14.270 mortes em 2014, o câncer de ovário é classificado como a quinta causa de morte por câncer entre as mulheres nos Estados Unidos [1]. O aumento da mortalidade associada ao cancro do ovário refere-se principalmente à falta de sintomas específicos da doença, especialmente para câncer de ovário fase inicial. A taxa de sobrevida em 5 anos para pacientes com câncer de ovário avançado (estágio III /IV) é de apenas 15% -20%, enquanto a taxa de cura para a doença em estágio inicial (fase I /II) pode se aproximar 90% [2]. Portanto, marcadores de diagnóstico para o cancro do ovário fase inicial tem o potencial para melhorar a taxa de sobrevivência global para esta doença.

soro CA125 identificados em linhas celulares de carcinoma do ovário humano [3], é o biomarcador no plasma mais amplamente utilizado para a detecção de câncer de ovário. Embora os níveis elevados de CA125 são frequentemente observadas em fase de cancro avançado do ovário, uma série de limitações de CA125 utilizado como marcador de diagnóstico ou de prognóstico para cancro do ovário foram demonstradas em vários estudos [4]: ​​CA125 é elevada em menos de 50% de início fase cancros do ovário [5], CA125 pode ser elevada devido a uma série de condições benignas e malignas não relacionadas com o cancro do ovário [6], e ao mesmo tempo os elevados níveis de CA125 estão fortemente associados com tumores serosos, é menos sensível à não- histologia serosa [7].

Atualmente, as modalidades de rastreamento mais utilizados para a detecção de câncer de ovário são ultra-som transvaginal (TVS) e o nível de marcador de soro CA125 [8]. No entanto, os resultados recentemente publicados do ensaio PLCO que incluiu 34,261 mulheres saudáveis, não conseguiram demonstrar uma redução da mortalidade com a seleção anual com CA125 e TVS e relatou um aumento substancial na utilização de procedimentos médicos invasivos alguns dos quais resultaram em morbidades desnecessários [9 -10]. Assim, existe uma necessidade crucial de identificar biomarcadores adicionais que complementam não invasivos CA125, a fim de conseguir um melhor desempenho na detecção de cancro do ovário.

Numerosos estudos têm sido realizados para descobrir candidatos biomarcador de soro para detecção do cancro do ovário utilizando espectrometria de massa proteómica baseados, ensaio imunoabsorvente ligado a enzima (ELISA), micromatrizes de expressão do gene /proteína, e imunoensaios baseados em grânulos multiplex. Vários promissores candidatos a biomarcadores, incluindo proteína humana epidídimo 4 (HE4) [11], mesothelin [12], apolipoproteína A1 (Apo A1) [13], receptor de factor de crescimento epidérmico [14], e transferrina [15] foram descobertos nestes estudos . A partir destes e outros marcadores, um número de painéis MultiMarker promissores foram recentemente desenvolvidos, que mostrou maior sensibilidade e especificidade para diferenciar o cancro do ovário fase precoce em comparação com CA125 sozinho [16-18]. No entanto, a maioria destes biomarcadores ou painéis MultiMarker ainda não foram mostrados para reduzir a mortalidade, e estes marcadores mostraram um fraco desempenho quando validado em amostras de pré-diagnóstico [19]. Portanto, melhores biomarcadores são necessários, a fim de reduzir a mortalidade por câncer de ovário através da detecção precoce.

Em nosso trabalho anterior, identificamos um painel de glicoproteína biomarcadores para a detecção de EOC usando uma plataforma integrada contendo espectrometria de massa e microarray lectina e LRG1 foi encontrado para ser diferencialmente expressos em casos estágio EOC início [20-21]. Recentemente, através da análise peptidoma de urina a partir de 6 pacientes com câncer ovariano e 6 controles saudáveis, Smith

et al

. [22] encontrou a alta abundância de peptídeos LRG1 em todas as amostras de doentes com cancro do ovário, e apenas um peptídeo de um controle saudável, indicando LRG1 pode servir como potencial biomarcador de urina para a detecção de câncer de ovário, após uma validação adicional usando um número maior de amostras de urina.

no presente estudo, buscou-se validar o desempenho de LRG1 na diferenciação EOC, incluindo EOC fase inicial de controles saudáveis ​​e não-casos, e para testar se LRG1 pode complementar CA125, a fim de melhorar a detecção de EOC usando dois conjuntos de amostras cegas independentes, um dos quais incluíram amostras pareadas coletadas no momento da cirurgia e na clínica antes da cirurgia para identificar possíveis vieses introduzidos por diferenças sistemáticas nas condições de coleta de sangue entre os casos e controles [23].

Materiais e Métodos

Materiais

kit ELISA para LRG1 foi comprado à IBL Internacional (Hamburgo, Alemanha). kit CA125 ELISA foi adquirido de Genway (San Diego, CA, EUA).

população de pacientes e Estudo Design by

As amostras para este estudo são fornecidas pelo Pacific Ovarian Cancer Research Consortium /SPORE no ovário câncer (POCRC, www.pocrc.org) [24]. O POCRC mantém um repositório de amostras biológicas de mulheres com e sem câncer de ovário para fins de pesquisa. Todos paciente recrutamento e inscrição, recolha de amostras e processamento das amostras são realizadas através do POCRC. Estas actividades foram revistos pelo FHCRC Institutional Review Board e são aprovados com números de arquivos FHCRC IR # 4771 e # 4563. Este estudo também é aprovado pela Universidade de Michigan (IRB00005467).

Dois bancos de soro foram usados ​​aqui. A primeira amostra definida para a verificação preliminar incluiu 156 amostras de soro de 35 controles aparentemente saudáveis ​​(mulheres saudáveis, livre do câncer), 16 controles de mulheres submetidas à cirurgia para condições benignas, não ovários relacionadas, tais como miomas uterinos (controles cirúrgicos), 43 das mulheres submetidas à cirurgia para a doença ovariana benigna, como um cystadenoma benigna seroso ou endometriose (controles benignos), 20 fase I /II casos EOC, e 42 estágio III /IV casos EOC. Para avaliar se os marcadores individuais são afectadas pelas condições da colheita de sangue, o conjunto de amostra 1 espécimes inclui emparelhados recolhidos 1 ou mais dias antes da cirurgia (amostras pré-cirurgia) e no dia da cirurgia, após a anestesia foi administrada e antes da cirurgia procedimento (espécimes cirúrgicos) de 33 indivíduos, incluindo 19 casos, 13 controles benignos, e 2 controles cirúrgicos. Entre os casos EOC, os espécimes pré-cirúrgicos foram coletados entre 2 e 18 dias antes da cirurgia (média: 7 dias). Cada grupo controle foi de mesma faixa etária dos casos, e, como resultado, idade assunto não está associado com o estado de caso /controle (

p Art 0,05, Tabela 1).

o segundo conjunto de amostras, um conjunto maior de confirmação cego, é composta de 233 pacientes, incluindo 77 controles saudáveis, 32 controles cirúrgicos, 53 doenças benignas, 27 casos de AOE II fase I /, e 44 estágio III /IV casos EOC. As amostras foram distribuídos aleatoriamente em três placas para ensaios de ELISA. Todo o trabalho de laboratório foi realizada cego e os dados de amostragem fixado 1 foi fornecido aos investigadores somente após o trabalho de laboratório foi concluída. Conjunto de amostras 2 nunca foi unblinded. As análises estatísticas foram realizadas por um estatístico do POCRC (J.D.T).

ELISA

Os ensaios de ELISA foram realizados de acordo com as instruções do fabricante. Os valores de absorvância foram lidos num comprimento de onda de 450 nm. As curvas de calibração foram construídos usando padrões de proteínas purificadas. As concentrações de proteínas avaliadas foram calculados a partir de suas curvas de calibração específicos.

Análise Estatística

Testes não paramétricos de Wilcoxon e comparações múltiplas de Dunn foram usadas para determinar se CA125, LRG1 e idade participante diferiu entre controles saudáveis , controles cirúrgicos, doença benigna e EOC e entre fase inicial e EOC fase tardia. Para todas as comparações estatísticas,

p Art 0,05 foi considerado como estatisticamente significativa

análises de energia retrospectivos foram conduzidos para um determinado tamanho da amostra, a variabilidade de expressão de biomarcadores e as diferenças observadas.. Para um teste bilateral ao nível de significância de 0,05, o poder de identificar diferenças sistemáticas na expressão de LRG1, e CA125 eram mais do que 99%, o que fornece a base estatística para o número de amostras incluídas no nosso estudo.

para avaliar o desempenho desses marcadores, o receiver operating characteristic (ROC) foram construídos e a área sob a curva ROC (AUC) e os intervalos de confiança de 95% (Cl) foram utilizados para avaliar os desempenhos globais do marcadores. A análise multivariada foi realizada por regressão logística para encontrar o modelo multivariada mais apropriado para cada grupo de comparação. O máximo de sensibilidade (SE) e especificidade (SP), que reflete a intenção de maximizar a taxa de classificação correta foi usado como um padrão ideal para encontrar os melhores valores de corte [25], onde a sensibilidade e especificidade correspondente foram calculados sob estes valores de corte . A precisão AUC para a curva ROC da análise combinada foi verificada por 10 vezes validação cruzada.

Resultados

determinação das concentrações séricas de biomarcadores em pacientes com EOC por ELISA

em trabalhos anteriores, encontramos a expressão anormal de LRG1 no cancro do ovário, inclusive nos casos em estágio inicial [20]. Aqui, nós ainda validados os nossos resultados usando duas amostras cego independente conjuntos para avaliar o desempenho de LRG1 ou em conjunto com CA125 na detecção de câncer de ovário. As amostras de soro foram randomizados antes do envio para o laboratório e os ensaios foram realizados cegos para o status caso.

A distribuição dos valores de marcação por casos EOC e não casos em 156 amostras de soro a partir da confirmação preliminar conjunto 1 é mostrada na Tabela 1. LRG1 e CA125 são elevados em relação aos grupos de controle, em ambos os casos EOC fase precoce e tardia (

P

0,01 para todas as comparações par a par), como mostrado na Fig. 1-A. Além disso, a expressão CA125 diferiu significativamente entre os subtipos histológicos (

p

= 0,002, Fig 1b.), Enquanto LRG1 não diferiu entre os diferentes subtipos de EOC (

p Art 0,05).

(a) os níveis de CA125 e LRG1 foram examinados no soro de controles saudáveis, controles cirúrgicos, doenças benignas, a fase I /II EOC e fase III /IV EOC. *

p Art 0,05 indica uma diferença significativa entre comparações de pares (todos os casos contra todos os controles; casos precoces contra todos os controles; casos fase tardia contra todos os controles). (B) distribuições marcador para os pacientes EOC de amostragem fixado 1 com diferentes subtipos histológicos.

Nem LRG1 nem CA125 foram encontrados para diferem significativamente entre as amostras pré-cirúrgicos e cirúrgicos, indicando concentrações LRG1 e CA125 eram que não foi afectada pelas condições de recolha de sangue (Figura S1 no arquivo S1). LRG1 e CA125 ambos mostraram bom desempenho na diferenciação de casos de controles independentemente de espécimes foram desenhadas em cirurgia ou antes da cirurgia (Figura S2 no arquivo S1).

A expressão diferencial de LRG1 entre casos e não-casos foi ainda validado usando uma amostra cega maior independente ajustaram 2, e consistente com os resultados utilizando amostra ajustaram 1, LRG1 foi elevada em casos EOC, incluindo casos de palco tanto precoce e tardio, em comparação com os não-casos (Fig. 2A). Resultados semelhantes que mostram que CA125 é significativamente diferencialmente expressos entre os vários histologia foi observada em amostras ajustaram 2, e LRG1 não foi encontrado para diferir por histologia (

p Art . 0,05, Fig 2b).

(a) a proteína mudanças de nível de CA125 e LRG1 foram confirmados na amostra maior definir 2. (b) distribuições marcador para os pacientes EOC com diferentes subtipos histológicos.

as concentrações de LRG1 e CA125, e as características clínicas de cada participante a partir da amostra definida 1 e amostragem fixado 2 estão apresentados na Tabela S1 e S2 Table.

ROC Análise de Desempenho para os marcadores candidatos para diferenciar casos EOC de não-casos

foram construídas curvas ROC para comparar a sensibilidade e especificidade de cada marcador para distinguir entre os casos EOC, incluindo os casos precoce e em estágio final de não-casos (saudáveis, cirúrgica e controles benignos) como mostrado na Fig. 3-A. As AUC para CA125 e LRG1 foram 0,916 e 0,797, respectivamente. Utilizando um corte que maximiza a sensibilidade + especificidade, CA125 fornecida uma sensibilidade de 79% e especificidade de 98% em um cut-off de 81 U /mL, enquanto LRG1 apresentou uma sensibilidade de 70% e especificidade de 76% em um cut-off de 18,75 mcg /mL para diferenciar casos EOC de não-casos. No% de especificidade 95, as sensibilidades para CA125 e LRG1 foram 80,6% e 46,8%, respectivamente.

(a) analisa ROC para CA125 e LRG1 para diferenciar EOC de não-casos. (B) análise ROC para CA125 e LRG1 para diferenciar EOC fase inicial de não-casos.

Para distinguir EOC fase inicial de não-casos, CA125 teve uma AUC de 0,821 e LRG1 teve uma AUC de 0,715 (Fig. 3b). Pelo corte óptimo que maximiza a sensibilidade + especificidade, CA125 fornecida uma sensibilidade de 78% e especificidade de 86% em um cut-off de 34,4 U /ml, enquanto LRG1 apresentou uma sensibilidade de 78% e especificidade de 63% a um corte -off de 17 mcg /mL para diferenciar EOC fase inicial de não-casos.

Desempenho de marcadores candidatos na diferenciação EOC de não-casos foi ainda confirmada usando amostragem fixado 2. consistente com os resultados da amostra ajustou 1 , as AUC para CA125 e LRG1 foram 0,915 e 0,786 para diferenciar casos EOC de não-casos (Figura S3 no arquivo S1). Para distinguir casos EOC início dos não-casos, as AUC para CA125 e LRG1 foram 0,785 e 0,690 usando o exemplo de conjunto 2 (Figura S4 no arquivo S1).

Performance ROC dos marcadores candidatos para distinguir os casos EOC controles de

saudável

Os valores da AUC para CA125, e LRG1 distinguir EOC de controles saudáveis ​​foram 0,916 e 0,792, respectivamente (Fig. 4a). Pelo corte óptimo que maximiza a sensibilidade + especificidade, CA125 fornecida uma sensibilidade de 90% e especificidade de 89% em um cut-off de 30,9 U /ml, enquanto LRG1 apresentou uma sensibilidade de 57% e especificidade de 91% em um corte -off de 23,64 ug /ml para diferenciar EOC de controlos saudáveis. Em uma especificidade fixa de 95%, CA125 detecta 82,3%, e LRG1 detecta 52% dos casos de EOC (Fig. 4a). Para diferenciar EOC fase inicial de controles saudáveis, os valores da AUC para CA125, e LRG1 foram 0,825 e 0,705 (Fig. 4b).

(a) analisa ROC para CA125 e LRG1 para diferenciar EOC de controles saudáveis. (B) análise ROC para CA125 e LRG1 para diferenciar EOC fase inicial de controles saudáveis.

O desempenho dos LRG1 para discriminar EOC de controles saudáveis ​​também foi confirmado na amostra cega maior set 2. A AUC valores para CA125 e LRG1were 0,938 e 0,794, respectivamente, e a uma taxa de falso-positivo de 5%, CA125 detecta 80,3%, e LRG1 detecta 53,5% dos casos de AOE (Figura S5 em Arquivo S1).

Painel de MultiMarker análise

regressão logística

multivariada foi utilizada para identificar os coeficientes ideais para combinar CA125 e LRG1 em um painel de marcadores. A combinação de LRG1 e CA125 teve uma AUC de 0,927 (OR

LRG1 = 1.053,

p

= 0,016; OR

CA125 = 1.011,

p

= 0,001), o que supera CA125 (AUC = 0,916) (

p = 0,008

, LR de teste) em distinguir EOC de não-casos (Fig. 5), indicando que LRG1 pode fornecer valor diagnóstico independente, além de CA125. Usando a amostra maior conjunto 2, um resultado similar foi obtido onde a combinação de LRG1 e CA125 teve uma AUC de 0,933 (OR

LRG1 = 1,062,

p

= 0,013; OR

CA125 = 1.361 ,

p Art 0,001), o que supera CA125 (AUC = 0,915) (

p = 0,009

, LR de teste) em distinguir EOC de não-casos. Além disso, para distinguir EOC fase inicial de não casos, a combinação de LRG1 CA125 e resultou em uma AUC de 0,838 (OU

LRG1 = 1,058,

P

= 0,018; OR

= 1,211 CA125 ,

P

= 0,001), o qual foi melhorado em comparação com CA125 (AUC = 0,785) (

P

= 0,018, teste LR), como mostrado na Fig. 5.

O desempenho dos painéis MultiMarker em distinguir EOC /EOC fase inicial de não-casos utilizando amostragem fixado 1e amostra set 2.

Discussão

CA125 é o biomarcador sorológica mais promissor para a avaliação pré-operatória de pacientes com massas pélvicas, para o acompanhamento dos pacientes após o tratamento, e para avaliar a resposta à quimioterapia de câncer de ovário [8]. No entanto, CA125 não é uma ferramenta de rastreio eficaz, onde os níveis são elevados em apenas 50 a 60% das mulheres com cancro do ovário fase inicial e um número de condições benignas podem causar a elevação dos níveis de CA125 [26]. Assim, buscou-se identificar biomarcadores úteis ou marcadores complementares para CA125 para melhorar seu desempenho no diagnóstico da EOC, especialmente na detecção de EOC fase inicial.

LRG1 humano é uma glicoproteína sérica, com cinco potenciais locais de glicosilação, e tem sido encontrado para ser elevado em câncer pancreático [27] e câncer de pulmão [28]. No entanto, existem poucos relatos sobre LRG1 na detecção de EOC, especialmente na detecção de EOC fase inicial. Neste estudo, usando dois conjuntos de amostras independentes medimos o nível de proteína de LRG1 nos soros de pacientes EOC utilizando um ensaio de ELISA, e foi avaliado o desempenho de LRG1 ou em conjunto com CA125 nos casos de AOE distintivas de não casos.

Além disso, nós introduzimos um conjunto de amostras incluindo emparelhados espécimes cirúrgicos pré-cirúrgicos e em a fim de evitar o resultado de validação falsa que pode ser causada por vieses em condições de coleta de sangue. Usando este conjunto de amostras, encontramos LRG1 não foi afetada pelas condições de coleta de sangue, e mostrou um bom desempenho para diferenciar EOC dos controles independentemente de soro foram coletadas no momento da cirurgia (AUC = 0,784) ou em um curto intervalo antes da cirurgia (AUC = 0,839), como mostrado na Figura S2 no ficheiro S1. Para excluir outras possíveis erros causados ​​por condições de operação, tais como a anestesia, e stress [23], que também introduziu controles cirúrgicos para a amostra conjunto 1 e da amostra definida 2. Com estes dois conjuntos de amostras, LRG1 não mostraram alterações significativas entre controles saudáveis e controles cirúrgicos (Figs. 1a e 2a), que também indicou que LRG1 elevada é específico para malignidade.

Actualmente, não existem marcadores candidatos individuais que podem superam CA125 na detecção de câncer de ovário. Portanto, mais estudos têm-se centrado no desenvolvimento de painéis mutlimarker que podem melhorar a sensibilidade e especificidade na detecção de câncer de ovário em comparação com somente CA125 [16, 29]. Em nosso estudo, descobrimos que a combinação de CA125 e LRG1 mostrou melhor desempenho para distinguir EOC fase inicial de não-casos, em comparação com somente CA125.

Curiosamente, usando tanto set1 amostra e amostra ajustaram 2, descobrimos que LRG1 não variou na expressão entre os subtipos histológicos investigados. Em contraste, CA125 diferiu significativamente entre os subtipos de (

P

0,01), consistente com estudos anteriores que relatam que os níveis elevados de CA125 são mais fortemente associado com tumores serosos [7]. Embora a identificação de marcadores específicos de subtipo para o diagnóstico de câncer de ovário tem sido abordada em diversos estudos [30], marcadores uniformes que pode detectar todas as principais subtipos de câncer são essenciais na triagem ampla aplicação.

Conclusão

em resumo, utilizando dois conjuntos de amostras independentes cegos, LRG1 foi encontrado para ser um candidato promissor marcador para a detecção de EOC e também mostrou que o potencial de se tornar um biomarcador útil para o diagnóstico de EOC fase precoce. A combinação de LRG1 e CA125 mostrou melhor desempenho para distinguir EOC incluindo EOC fase inicial de não-casos, em comparação com CA125. O desempenho do LRG1 para a detecção de EOC, EOC fase especialmente no início, bem como o seu desempenho em diferentes subtipos histológicos deverá ser ainda validado usando uma amostra maior definir a partir de vários locais de estudo, e em amostras pré-clínicos obtidos de mulheres assintomáticas.

Informações de Apoio

S1 Arquivo. arquivo combinado de apoiar figuras

Figura S1:. níveis LRG1 e CA125 classificados por populacional e estado cirúrgica na amostra definida 1. Figura S2: análises ROC para CA125 e LRG1 para diferenciar casos EOC de não-casos por condições de coleta de sangue. Figura S3: análises ROC para CA125, e LRG1 para diferenciar casos EOC de não-casos utilizando amostragem fixado 2. Figura S4: análises ROC para CA125, e LRG1 para diferenciar casos EOC início dos não-casos utilizando amostragem fixado 2. Figura S5: analisa ROC para CA125, e LRG1 para diferenciar casos EOC de controles saudáveis ​​utilizando amostragem fixado 2.

doi: 10.1371 /journal.pone.0121112.s001

(DOCX)

S1 Table. características e LRG1 clínicos, níveis de CA125 para cada participante a partir da amostra definida 1.

doi: 10.1371 /journal.pone.0121112.s002

(XLSX)

S2 tabela. As características clínicas e LRG1, níveis de CA125 para cada participante a partir da amostra definida 2.

doi: 10.1371 /journal.pone.0121112.s003

(XLSX)

Reconhecimentos

Agradecemos Kathy O’Briant para gerenciar o repositório espécime Pacific Ovarian Cancer Research Consortium.