Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA, é um immunoeassay altamente sensível que é usado no lugar de radioimunoensaio, uma vez que não envolve procedimentos de manuseamento e eliminação especiais que requerem trabalhos com substâncias radioactivas. O ELISA baseia-se os anticorpos para detectar a presença de antigénios em amostras líquidas, alterando, assim, a partir de um líquido límpido com uma cor. Porque eles são à base de anticorpos, ELISA são chamados imunoensaios. ELISAs pode detectar pequenas quantidades de agentes de doenças em amostras em tais como fluidos corporais, antes que o corpo tinha tido a oportunidade de montar uma resposta imune. Ao experimentar utilizando um ELISA, os anticorpos presentes nas amostras se ligam à placa de antigénio e após a remoção do excesso de anticorpo, o anticorpo ligado pode ser detectado por adição de anticorpo secundário conjugado com enzima.
O objetivo deste estudo é examinar duas coisas: em primeiro lugar, há a ligação em uma placa que contém dois anticorpos diferentes específicos para dois antigénios diferentes antígeno-anticorpo: galinha do ovo lisozima (HEL) e albumina de soro bovino ( BSA), e em segundo lugar, a quantidade da ligação está presente na placa? Para analisar estas questões, utilizando um ensaio imunoenzimático Enzyme-Linked para ajudar a tela para hibridomas secretoras de anticorpos, o que é altamente sensível e razoável para executar. O procedimento de usar um ELISA aumentou entendimentos de ligações de antigénio ao anticorpo de tais testes, como o HIV, drogas (maconha), gravidez, etc.
O objetivo de um ELISA é determinar se determinadas ligações antígeno-anticorpo estão presentes numa amostra; Se existem anticorpos que se ligam a antigénios presentes, um ELISA ajuda a determinar a quantidade de. Há duas variações principais com este método; um é para que possamos definir a quantidade de ligação antígeno-anticorpo e o outro, como anteriormente referido, é assim que nós podemos ver o quanto o anticorpo está presente em nossa amostra. Nesta experiência de laboratório, que tenham um revestimento de micro-placa com poços com antigénios. O antigénio é fortemente absorvido pelo plástico e permanece ligado à superfície do poço durante todo o procedimento. Depois de revestimento e além dos anticorpos, fomos capazes de determinar a ligação antígeno-anticorpo.
Na maioria dos experimentos, os pesquisadores usam BSA e HEL como antígenos não relacionados para controlar a reactividade do antigénio não específico. Por exemplo, os poços revestidos com antigénio HEL não deve mostrar sinais positivos quando os anticorpos anti-BSA presentes, e vice-versa. Isto significa que a quantidade de anticorpo conjugado com enzima ligado em cada poço é capaz de hidrolisar um substrato incolor para se obter um produto colorido.
Em conclusão, os resultados de um ELISA utilizando deve concluir que se ligam a antigénios de anticorpos, com os antigénios fornecidos presente. O anticorpo secundário é ligado a uma enzima que modifica quimicamente o substrato da enzima, transformando-o de uma solução incolor para uma solução amarela. Uma nota no entanto, poços branco sem antígenos devem ser subtraídos da placa de controle, mas não formam uma das placas revestidas com antigénio. Isto resulta no anticorpo secundário covalentemente ligado, conjugado, a uma enzima que catalisa uma reacção química, quando o substrato de enzima é adicionado. Isto iria produzir uma mudança de cor, se a amostra de soro continha anticorpos para as bactérias, porque a enzima ligada do anticorpo secundário que se ligam ao anticorpo primário já ligada ao antigénio nos poços.