Abstract
Objectivo
IL-17A peças um papel importante em muitas doenças inflamatórias e cancros. Nosso objetivo foi examinar o efeito de IL-17A sobre a invasão das células cancerosas do colo do útero e estudar seus mecanismos relacionados.
Métodos
ensaios de cura e transpo� matrigel ferida foram utilizados para examinar o efeito da IL -17 sobre a migração de células de câncer do colo do útero e da invasão por um painel de linhas celulares de cancro do colo do útero. Os níveis de metaloproteinases de matriz (MMPs) e inibidor de tecido de metaloproteinases (TIMPs) foram investigados utilizando Western blotting. A atividade da p38 e (NF-kB) via de sinal fator-kappa B nuclear foi detectada também.
Resultados
Aqui, mostramos que a IL-17A poderia promover a migração e invasão de colo do útero células cancerosas. Outras análises moleculares mostraram que a IL-17A pode regular positivamente as expressões e atividades de MMP2 e MMP9, e para baixo-regular a expressão de TIMP-1 e TIMP-2. Além disso, a IL-17A também activa via de sinalização de p38 e p50 e p65 aumentado expressão nuclear. Além disso, o tratamento de células de cancro cervical com os inibidores farmacológicos de p38 /NF-kB via de sinal, SB203580 e PDTC, potentemente restaurado os papéis de invasão e a regulação positiva de MMP induzida por IL-17A.
Conclusão
IL-17A poderia promover a migração e invasão de células de câncer do colo do útero através de up-regulação MMP2 e MMP9 expressão, e para baixo-regulação TIMP-1 e TIMP-2 expressão através de sinal via p38 /NF-kB. IL-17A pode ser um alvo potencial para melhorar o prognóstico para pacientes com câncer cervical
Citation:. Feng M, Wang Y, Chen K, Bian Z, Jinfang Wu, Gao Q (2014) IL-17A Promove Migração e invasão das células neoplásicas do colo do útero por coordenadamente Ativando MMPs Expressão através do p38 /NF-kB Signal Caminho. PLoS ONE 9 (9): e108502. doi: 10.1371 /journal.pone.0108502
editor: Masaru Katoh, National Cancer Center, Japão
Recebido: 23 de julho de 2014; Aceito: 31 de agosto de 2014; Publicação: 24 de setembro de 2014
Direitos de autor: © 2014 Feng et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados
Data Availability:. O autores confirmam que todos os dados subjacentes às conclusões estão totalmente disponíveis sem restrições. Todos os dados relevantes estão dentro do papel
Financiamento:. O projecto foi apoiado pela National Science Foundation Natural da China (No. 81.070.536) e National Science Foundation Natural da província de Shaanxi (No. 2014JM4143). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito
CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes
Introdução
o câncer cervical é a segunda causa mais comum de mortalidade relacionada ao câncer em mulheres em todo o mundo [1] e é um dos cancros conhecidos apenas causadas por um vírus que pode ser transmitido sexualmente. Pesquisas recentes descobrir que as células imunes e suas citocinas secretadas não só pode contribuir para a eliminação de células cancerosas, mas também proporcionar um microambiente adequado para o desenvolvimento do tumor, assim como promover a progressão tumoral [2], em que o microambiente local do tumor e o estado da função de células imunes desempenham um papel importante [3].
17A Interleucina (IL-17A) é uma citocina pró-inflamatória, e tem sido encontrada contribuiu para muitas doenças crónicas. Recentemente, a IL-17A foi também frequentemente encontradas em muitos cancros, tais como cancro do ovário [4], o cancro da mama [5], o cancro gástrico [6], e o carcinoma hepatocelular [3]. O papel da IL-17A, no desenvolvimento e progressão destes cancros permanece controverso. Usando o modelo animal, alguns estudos encontrar que a IL-17A inibia o crescimento de tumores e metástases através de IFN-c produzindo NK e células T [6], [7]. Outros estudos mostram que a IL-17A promoveu o crescimento tumoral e metástase [8], [9]. O efeito pode ser correlacionado com a indução de tumor em promover microambiente local do tumor [10].
metástase tumoral é a principal causa de mortalidade relacionada com o cancro [11]. As células cancerosas precisam para degradar o ECM e invadir os sistemas linfático e vascular de divulgação para locais distantes [12]. Neste processo, as proteases, tais como metaloproteinases de matriz (MMPs), desempenham um papel importante [12]. Produção e activação de MMPs é dependente de várias citocinas, incluindo o TNF-α e IL-1 secretada pelas células tumorais [13], [14], fibroblastos [15], [16] e macrófagos [16]. Estudos anteriores encontraram que a IL-17A poderia regular MMPs, IL-1 e TNF em periodontite [17], e descobriu que a deficiência de receptor de IL-17 resulta na expressão diminuída de IL-1 e MMP3 /MMP9 /MMP13 na artrite reumatóide [18] , indicando que a IL-17A desempenha também um papel importante na regulação das MMPs. via de sinalização MAPK e NF-kB desempenham um papel importante na regulação da produção e da atividade de MMPs [10], [19]. E muitos efeitos de IL-17A estão correlacionados com a via de sinalização MAPK e NF-kB [10], [20], [21].
Em nosso estudo, descobrimos que IL-17A poderia aumentar a motilidade celular e invasão do aumento da regulação do MMP2 e MMP9 via ativação de sinal via p38-NF-kB.
Materiais e Métodos
Ética declaração
Esta pesquisa foi aprovada pelo Comitê de Ética Comité do Segundo Hospital Filiado, Faculdade de Medicina da Universidade de Xi’an Jiaotong. Todos câncer cervical participantes paciente com exame dos tecidos desde que o seu consentimento informado por escrito para participar neste estudo.
amostras de cancro do colo do útero
amostras de cancro do colo do útero para mRNA foram obtidos de 50 pacientes com câncer cervical no departamento de obstetrícia e Ginecologia, Segundo Hospital Filiado, Faculdade de Medicina da Universidade de Xi’an Jiaotong. Todos os pacientes tinham consentido coleta de tecido no momento da cirurgia. E todos os espécimes foram diagnosticados como o câncer escamoso cervical pelo departamento de patologia. Entre eles, 11 eram de biópsia do colo do útero e não foram incluídos na análise estatística de profundidade invasão e metástases linfáticas. Nenhum dos pacientes tinham recebido quimioterapia, imunoterapia ou radioterapia antes da coleta da amostra. estágio clínico e classificações histológicas foram baseadas na Federação Internacional de Ginecologia e sistema de classificação Obstetrícia (FIGO). As amostras de tecido foram divididos em duas partes: uma parte foi congelado em -80 ° C para o isolamento de RNA e da esquerda que foi utilizado para o diagnóstico patológico
As linhas celulares e reagentes experimentais
O HeLa, C33A. As linhas celulares, e Caski foram obtidas da American Type Culture Collection (ATCC) e foram mantidas em meio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) suplementado com soro fetal bovino a 10%, a 37 ° C, 5% de CO
2. Anti-MMP2, MMP9, TIMP-1, TIMP-2, β-actina, p38 e p38-p foram obtidos a partir de Cell Signaling Technology (Beverly, MA). Anti-NF-kB-p50, anticorpos de p65 /Rel A e histona H1 foram adquiridos a partir de Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, EUA). 3- (4, 5-dimetiltiazol-2-il) -2, brometo de 5-difeniltetrazólio (MTT) e todos os outros produtos químicos foram obtidos a partir de Sigma (St. Louis, MO), a menos que indicado de outra forma.
A migração celular e ensaio de invasão
migração e invasão celular habilidades foram testados por ensaios de cura e de invasão de feridas. A migração celular foi avaliada por um ensaio de cicatrização da ferida. As células foram cultivadas em placa de 6 poços até taxa confluentes chegar a 70-80% e, em seguida, tratadas com ou sem IL-17A (50 ng /mL). A camada celular foi ferida usando uma ponta estéril e a propagação de fechamento da ferida foi observadas e fotografadas. ensaio de invasão foi realizada com 24 poços BioCoat invasão Matrigel secções (Becton Dicknson, Bedford, MA) de acordo com as instruções do fabricante. Após cultura em meio com ou sem IL-17A (50 ng /mL), as células foram semeadas em bem interior e do número de células que invadiram através do Matrigel foi contado.
Isolamento de ARN e análise em tempo real de PCR
o ARN total foi extraído a partir de células em cultura com o reagente TRIzol (Invitrogen) e os níveis de expressão de mRNA foram medidos por qRT-PCR utilizando um IQ5 multicolor em tempo real do sistema de detecção de PCR (Bio-Rad) com SYBR Premix EX. A transcrição reversa foi realizada com o kit de reagentes PrimeScript RT (Tempo real perfeito; TaKaRa) de acordo com as instruções do fabricante. Para a análise de mRNA, os níveis de mRNA GAPDH foram utilizados como controle de normalização interna. Dobram mudanças foram calculados e normalizados utilizando o método CT. Os iniciadores utilizados foram os seguintes: GAPDH (GCACCGTCAAGGCTGAGAAC e TGGTGAAGACGCCAGTGGA); MMP1 (ACTCTGGAGTAATGTCACACCT e GTTGGTCCACCTTTCATCTTCA); MMP2 (CCGTCGCCCATCATCAAGTT e CTGTCTGGGGCAGTCCAAAG); MMP3 (AGTCTTCCAATCCTACTGTTGCT e TCCCCGTCACCTCCAATCC); MMP9 (GGGACGCAGACATCGTCATC e TCGTCATCGTCGAAATGGGC); MMP10 (CCCACTCTACAACTCATTCACAG e TCAGATCCCGAAGGAACAGAT); MMP13 (TGCCAGTGCCCTTAAATTCCA e CAACAGGGTCTCAAACCCCA); IL-17A (CAATCCCACGAAATCCAGGATG e GTGGAGATTCCAAGGTGAGG).
zimografia
As células foram tratadas com IL-17A a 37 ° C durante 24 h, e as amostras de meio condicionado foram colhidos. Volumes apropriados de as amostras não fervidos foram separados por 0,1% de gelatina e 8% de electroforese SDS-PAGE. Após a electroforese, os geles foram lavados duas vezes em 2,5% de Triton X-100 à temperatura ambiente durante 30 min e, em seguida, incubadas em tampão de reacção (10 mM de CaCl2, Tris-HCl a 40 e 0,01% de NaN3, pH 8,0) a 37 ° C durante 12 h. gel de mancha azul brilhante de Coomassie R-250 foi então usado para corar o gel. As intensidades das bandas nos geles foram calculados usando um sistema de análise de imagem (Bio-Rad Laboratories, Richmond, CA).
A quantificação da MMP-2 e MMP-9 proteínas
As células foram semeadas a uma densidade de 1 × 10
5 células /ml em placas de 6 poços um dia antes da experiência. As células foram cultivadas em meio DMEM fresco suplementado com FBS a 1% e as células parentais foram cultivadas em DMEM fresco suplementado com FBS a 1%, com ou sem IL-17A (50 ng /mL). Após 48 horas de incubação, os sobrenadantes celulares foram recolhidos e, em seguida concentrações MMP2 e MMP9 foram quantificados utilizando os kits ELISA (Shanghai Westang Bio-Tech Co., Ltd., Shanghai, China).
análise de Western blot
1 × 10
6 células de cancro cervical foram suspensos em 250 ul de tampão de lise (40 mmol /l de Tris-HCl, 1 mmol /L de EDTA, 150 mmol /l de KCl, 100 mmol /l NaVO3, 1 % de Triton X-100, 1 mmol /l de PMSF, pH 7,5). Os lisados nucleares foram colhidas com NucBuster Proteína Extração Kit (Novagen, Alemanha) de acordo com as instruções do fabricante. As proteínas (50 ug) foram separadas por electroforese em gel de SDS-poliacrilamida a 10% e transferidas para membranas de PVDF. As membranas foram subsequentemente bloqueadas em leite sem gordura (5% em solução salina tamponada com Tris com Tween-20, TBST) tampão a 37 ° C durante 1 h para bloquear a ligação não específica e em seguida foram incubadas durante a noite com anticorpos contra p38, p -p38, MMP2, MMP9, TIMP-1, TIMP-2, NF-kB-p50, p65 /RelA, histona H1 ou β-actina em TBST contendo 5% de leite desengordurado a 4 ° C. Em seguida, os anticorpos foram incubados segundo. As bandas foram detectadas com um kit de quimioluminescência aumentada (Amersham, ECL Além disso, Freiburg, Alemanha) e exposta por autorradiografia. A análise de densitometria foi realizada utilizando o software Image J. (GE Healthcare, Buckinghamshire, Reino Unido).
A análise estatística
Todos os dados são apresentados como a média ± desvio padrão e analisados utilizando software SPSS 13.0 (SPSS Inc., IL). A significância estatística foi analisada utilizando t-teste do estudante.
P
. 0,05 foi considerado estatisticamente significativo
Resultados
A expressão de IL-17A está positivamente associada com a metástase do câncer cervical
IL-17A a expressão de ARNm foi medido em 50 tecidos de cancro do colo do útero por PCR em tempo real. estudo de associação foi ainda aplicada para investigar o significado clínico de expressão IL-17A em 50 espécimes de cancro cervical. O resultado mostrou que a expressão de IL-17A não se correlacionou a idade dos pacientes, estágio FIGO, eo tamanho do tumor, enquanto que a expressão de IL-17A foi significativamente correlacionada com os doentes ‘profundidade de invasão e estado de metástase linfática (
P Art 0,01, teste t de Student, Tabela 1). Estes resultados indicam que a IL-17A pode desempenhar um papel importante na metástase do câncer cervical.
IL-17A aumento da motilidade das células cancerosas cervicais
ensaios de cura e de invasão de matrigel ferida foram conduzidos para testar ainda mais o papel da IL-17A na motilidade celular cervical. Os resultados mostram de cicatrização de feridas que migrações de HeLa, e células C33A foram Caski aumentada por IL-17A (Fig. 1A e B). Além disso, Transwell ensaio mostrou que o tratamento com a IL-17A promove a invasão celular através da matrigel (Fig. 1C e D).
(A, B) Em comparação com o grupo de controlo de células, IL-17A tratadas células de cancro do colo do útero ( HeLa, C33 a, e CaSki) mostrou maior motilidade em um ensaio de cicatrização da ferida. (C) por ensaio de células invasivas, foi detectado o efeito de IL-17A na invasão celular (ampliação de × 100). (D) Número total de células invasoras em cada câmara foi resumido. Os valores são representados como médias ± DP de três experiências independentes realizadas em triplicado. *
p Art 0,05 e **
p
. 0,01 comparado com o grupo controle, respectivamente
IL-17A-regulada MMP2 e MMP9 expressão e regulada negativamente a expressão de TIMP-1 e TIMP-2 em células de cancro cervical
Como a sobre-expressão de MMP desempenham um papel importante na metástase do cancro [22], o papel de IL-17A na expressão de MMP em linhas celulares de cancro do colo do útero (C33A e CaSki) foi investigada. As manifestações de MMP1, MMP2, MMP3, MMP9, MMP10, MMP13 e foram detectados por análise de PCR em tempo real entre a IL-17A células tratadas e não tratadas. Como mostrado na Fig. 2A, a IL-17A aumentou a expressão de ambos MMP2 e MMP9, indicando que a motilidade promover papel da IL-17A pode estar envolvido com a matriz extracelular (ECM) remodelação.
expressão MMPs (A) foi detectada por Real a análise de PCR -O tempo em que as células de cancro cervical tratados com e sem IL-17A. (B) Depois de tratamento com a IL-17A por 24 horas, a expressão de MMP2, MMP9, TIMP-1 e TIMP-2 foram detectados por análise de Western blot em células de cancro do colo do útero. (C) Quantificação dos níveis de proteína de MMP-2, MMP-9, TIMP-1 e TIMP-2. MMP2 (D) e as concentrações de MMP9 (E) em células de formulário sobrenadantes tratados com ou sem IL-17A foram analisados por ELISA. (F) Os efeitos da IL-17A sobre as atividades de MMP2 e MMP9 foram analisados por ensaio de zimografia. (G) A quantificação das actividades de MMP-2 e MMP-9. Os valores são representados como médias ± DP de três experiências independentes realizadas em triplicado. *
p Art 0,05 e **
p
. 0,01 comparado com o grupo controle, respectivamente
MMP2 e MMP9 desempenham um papel importante para a metástase do câncer [12 ], e IL-17A pode afectar a expressão de MMP2 e MMP9 [10]. TIMPs, os inibidores naturais endógenos de MMPs, pode regular a actividade e expressão de MMP [23]. Após o tratamento com a IL-17A, a expressão de proteínas de MMP2 e MMP9 em linhas celulares de cancro do colo do útero (C33A e Caski) foi aumentado, por sua vez a expressão de TIMP-1 e TIMP 2-proteínas foi diminuída (Fig. 2B e C).
IL-17A aumentado a secreção e a actividade de MMP2 e MMP9
MMPs têm a função de degradação de ECM, e está fortemente implicada na invasão e metástase de células tumorais malignas [22]. À luz disto, a expressão de MMP2 e MMP9 em sobrenadantes celulares foi analisada por ELISA. Como mostrado na Fig. 2D e E, as células C33A secretadas 425,55 ± 49,35 pg /ml /10
5 células de MMP2 e 75,01 ± 9,80 pg /ml /10
5 células de MMP9. tratamento com IL-17A aumentado significativamente os níveis de MMP2 para 773,12 ± 60,12 pg /ml /10
5 células (
P
0,05) e os níveis de MMP9 para 148,89 ± 11,18 pg /ml /10
5 células (
P Art 0,05). Resultados semelhantes foram observados em células Caski. É evidente que, o tratamento com IL-17A notavelmente promovida a expressão de ambos MMP2 e MMP9.
Além disso, a actividade de MMP2 e MMP9 secretado por células de cancro do colo do útero foi analisada por ensaio de zimografia. Os resultados mostraram que a IL-17A pode aumentar significativamente a actividade de degradação de MMP2 e MMP9 em C33A e linhas de células Caski (Fig. 2F e G).
IL-17A MMPs expressão regulada e invasão de células de cancro do colo do útero através ativando p38 /via de sinalização de NF-kB
o sinal via p38 desempenha papel importante na invasão das células cancerosas cervicais. Após o tratamento com a IL-17A, o nível de fosforilação de p38 foi aumentada (Fig. 3A-B, E-F). No entanto, a expressão de p38 total não foi afectada. Como via de sinalização de NF-kB foi relatado para ser um alvo a jusante de sinalização de p38, e foi capaz de regular a expressão andMMP9 MMP2, NF-kB /p50 e p65 /RelA expressão também foram detectadas. Observou-se que o tratamento com a IL-17A aumentado significativamente a expressão nuclear de NF-kB tanto /p50 e p65 /RelA (Fig. 3 C-D, L-H). Para definir melhor o ponto na via de sinal de p38 /NF-kB em que a IL-17A regula a invasão de células de cancro do colo do útero, que trataram células de cancro cervical com SB203580 (um inibidor de p38) e PDTC (um inibidor de NF-kB), e analisada a capacidade invasiva. Ambos SB203580 e PDTC pode inverter a invasão aumentada por IL-17A (Fig. 4A-B, E-F). Além disso, a análise por Western blot revelou que o pré-tratamento de SB203580 e PDTC revogada a regulação positiva de MMP2 e MMP9 induzida por IL-17A (Fig. 4C-D, L-H), ainda mais demonstrando que a IL-17A regulada expressão MMPs e invasão de células de cancro do colo do útero por meio de activação de p38 /via de sinalização de NF-kB.
a expressão de p38 e p-p38 foram detectadas por análise de western blot em C33A (a) e células Caski (e) tratadas com ou sem IL -17 durante 24 horas. Quantificação dos níveis de proteína de p38 e p38 em p-C33A (B) e CaSki (F). Os valores são representados como médias ± DP de três experiências independentes realizadas em triplicado. * P 0,05 e ** P 0,01 comparado com o grupo de controlo, respectivamente. A análise por Western blot foi usado para detectar p50 nuclear e expressão p65 em C33A (C) e células Caski (G) tratadas com IL-17A (50 ng /ml) nos pontos de tempo indicados. Quantificação dos níveis de proteína nuclear p50 e p65 em C33A (D) e células Caski (H). Os valores são representados como médias ± DP de três experiências independentes realizadas em triplicado. *
p Art 0,05 e **
p
. 0,01 comparado com o grupo controle, respectivamente
C33A (A) e as células Caski (E) foram pré-tratada com o SB (20 uM) e PDTC durante 30 min, em seguida, incubadas na presença ou ausência de IL-17A (50 ng /mL) durante 24 h. As capacidades invasivas celulares foram realizadas pelo ensaio de invasão na câmara de Boyden. A percentagem da taxa de C33A invasiva (B) e células Caski (F) foi expressa como uma percentagem do controlo. Células C33A (C, D) e Caski (G, H) e foram tratadas em seguida, submetida a Western blot para analisar os níveis de proteína de MMP2, MMP 9. Os valores são representados como a média ± DP de três experiências independentes realizadas em triplicado. *
p Art 0,05 e **
p
. 0,01 comparado com o grupo controle, respectivamente
Discussão
A evidência substancial indica que certos pacientes com câncer apresentam um status imunossupressora generalizada, mas a reação inflamatória no local do tumor pode promover o crescimento e progressão tumoral [24], [25]. A infecção persistente com o papilomavírus humano (HPV) é uma causa necessária do cancro do colo do útero [26]. As infecções por HPV são comuns, e cancro do colo do útero pode ser considerada como uma complicação rara da infecção comum [27]. IL-17A é uma citoquina inflamatória importante no desenvolvimento de muitas doenças inflamatórias e também é frequentemente detectada no microambiente tumoral [8], [28], [29]. Mas, até agora, pouco se sabe sobre o efeito de IL-17A na progressão do câncer cervical. Souza e seus colegas de trabalho estudaram a correlação da concentração de IL-17 no soro de pacientes e diferentes graus de lesões intra-epiteliais e carcinoma cervical invasivo [30], para não mencionar o efeito pró-metastático e invasivo da IL-17A sobre o cancro do colo do útero, bem como o seu mecanismo de subalterno. Aqui, nós revelou que a IL-17A promoveu significativamente a capacidade invasiva e metastática de células de câncer do colo do útero, regulando o equilíbrio MMP /TIMP via ativar o /via de sinalização de NF-kB p38.
No presente estudo, verificou-se que IL-17A poderia aumentar as capacidades de migração e invasão de células cancerosas cervicais. Pesquisas anteriores descobriram que a IL-17A poderia promover as capacidades de migração e invasão de cancro da mama humano e células de carcinoma hepatocelular [8], [10]. Estes resultados sugerem que a IL-17A está estreitamente correlacionado com a invasão de células de cancro cervical. A fim de clarificar os mecanismos relacionados, investigou-se o efeito promotor de IL-17A na invasão de células é através da regulação da expressão de MMPs e TIMPs.
Durante o processo de metástase, as células cancerosas precisa de degradar a ECM e invadir os vasos sanguíneos ou linfáticos, e atingir outros tecidos e órgãos, em seguida, gerar novo tumor. MMPs e TIMPs desempenham papéis importantes na ECM degradante [31]. MMP2 e MMP9 têm sido frequentemente detectado a ser sobre-expressos em tumores sólidos e associado com a invasão tumoral e metástase [22], [32]. Assim, foi investigado o efeito de IL-17A na expressão de MMP2 e de MMP9. Os resultados mostram que a IL-17A pode sobre-regular a expressão de MMP2 e de MMP9. TIMPs actuar através da formação de um complexo não covalente e apertado com as suas enzimas cognatas e são capazes de afectar as actividades biológicas de MMPs [33], [34]. No presente estudo, verificou-se IL-17A poderia down-regualte a expressão de TIMP-1 e TIMP-2. Estes resultados indicam que o efeito promotor de IL-17A está correlacionada com as MMP e os seus inibidores.
A via de sinal de p38 também desempenha um papel importante na regulação da expressão e actividade de MMPs e TIMPs [35], [ ,,,0],36]. Actividade da via de sinalização de p38 pode regular positivamente a expressão de MMP2 e MMP9 [10]. estudo anterior descobriu que IL-17A pode ativar sinal via p38 [37], [38]. Para esclarecer melhor possível mecanismo (s) de IL-17A na promoção da invasão de células de cancro do colo do útero, que investigar o efeito de IL-17A na fosforilação de p38. Os resultados mostraram que a IL-17A pode sobre-regular o nível de fosforilação de p38. Os resultados também mostraram que o tratamento de inibidor de p38 reduziu a invasão de células de forma significativa, acompanhada por um aumento de MMP2 e expressão da proteína de MMP9, e diminuição de TIMP-1 e expressão de proteína TIMP-2, o que sugere que o papel sobre-regulação de IL-17A em MMP2 e MMP9 expressão pode ser através da ativação da via de sinalização p38. NF-kB foi encontrado para ser um factor de transcrição-chave na regulação de MMP2 e expressão de MMP9 [10], [39] e IL-17A foi relatado para ser capaz de activar de sinal via de NF-kB [40], [41 ], o próximo estudaram se IL-17A poderia ativar sinal via NF-kB. Os resultados mostraram que a IL-17A pode activar NF-kB, o que sugere que o papel sobre-regulação de IL-17A em MMP2 e MMP9 expressão pode ser através da activação da via de sinalização de NF-kB.
Em conclusão, o efeito de IL-17A na invasão de células de câncer cervical e metástases podem levar à identificação de novos marcadores diagnósticos e alvos terapêuticos.
Reconhecimentos
o projecto foi apoiado pela National Science Foundation Natural da China (No.81070536) e National Science Foundation Natural da província de Shaanxi (No.2014JM4143).