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células A549-PACR (A) foram incubadas com 21α-MMD (25-100 �) durante 24 h. Os lisados ​​de células inteiras foram sujeitos a análise de Western blot utilizando anti-ERK e anti-JNK, anti-p38, anti-Akt, anti-mTOR, anti-PI3K, anti-AMPK e anticorpos relacionados com as suas formas fosforiladas. A β-actina e fosfo-proteínas relevantes para as bandas de proteína total confirmou a integridade e o carregamento igual de proteína total e fosfo-proteínas, respectivamente. Todos os níveis de proteína foram normalizadas para os níveis de p-actina. (B e C) Efeito da mTOR knockdown foi estabelecida pela primeira vez por transitoriamente transfecção de mTOR siRNA para as células A549-PACR por 24 h. Precipitação siARN foi utilizado como controlo separado do controlo simulado. mTOR e de proteína /P-gp MDR1 e expressões do gene ARNm foram analisados ​​por transferência de Western e análise de PCR, respectivamente. (D e E) As células foram transitoriamente transfectadas com ARNsi de mTOR precipitação ou ARNsi durante 24 h, seguida por uma exposição de 24 h a 25 uM 21α-MMD. proteína /P-gp MDR1 e os níveis de expressão de mRNA do gene foi confirmada por Western blotting e análise por PCR, respectivamente. (F) Depois de mTOR siRNA ou Scramble siRNA transfections, as células foram tratadas com 100 nM de paclitaxel para vários cursos de tempo e mTOR siRNA foi posteriormente incorporada com 25 mM 21α-MMD se seguiu a avaliação da viabilidade celular através do ensaio de MTT.

Referência

1. Aldonza MBD, Hong J-Y, Bae SY, Song J, Kim WK, Oh J, et al. (2015) Supressão de MAPK Sinalização e Reversão de MDR1-Associated multirresistência mTOR-Dependent por 21α-Methylmelianodiol em células de câncer de pulmão. PLoS ONE 10 (6): e0127841. doi: 10.1371 /journal.pone.0127841. PMID: 26098947

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Citation: Aldonza MBD, Hong JY, Bae SY , Song J, Kim WK, Oh J, et al. (2015) Correção: Supressão do MAPK Sinalização e Reversão de MDR1-Associated multirresistência mTOR-Dependent por 21α-Methylmelianodiol em células de câncer de pulmão. PLoS ONE 10 (7): e0133922. doi: 10.1371 /journal.pone.0133922

Publicação: 21 de julho de 2015

Direitos de autor: © 2015 Aldonza et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados