Sumário

tridimensional de culturas de células de tumor (3D) cultivadas em matriz extracelular rica em laminina-(lrECM) são considerados para reflectir os tumores humanos mais realista, em comparação com células cultivadas como monocamada em plástico. Aqui, nós investigamos sistematicamente o impacto da ECM sobre o fenótipo, a expressão do gene, EGFR via de sinalização, e na inibição EGFR em linhagens de células comumente usado cancro colorectal (CRC). LrECM sobre-topo (3D) de ensaios de cultura foram realizados com as linhas celulares de CRC SW-480, HT-29, DLD-1, LOVO, Caco-2, COLO-205 e COLO-206F. Morfologia do lrECM cultivada linhas celulares de CRC foi determinada por contraste de fase e microscopia de varredura a laser de fluorescência confocal. A proliferação de células foi examinado por ensaio de MTT, capacidade invasiva das linhas celulares foi ensaiada utilizando câmaras de Boyden Matrigel-revestidas, e actividade migratória foi determinada utilizando o ensaio da cerca. Expressão diferencial de genes foi analisada ao nível transcricional pela plataforma matriz Agilent. EGFR foi inibida usando a pequena molécula inibidora específica AG1478. Um padrão de crescimento de esferóides específica foi observado em todas as linhas celulares de CRC investigados. DLD-1, HT-29 e SW-480 e CACO-2 exibiu uma formação de células de tumor sólido clara, enquanto LaVO, COLO-205 e COLO-206F foram caracterizados pela formação de estruturas de uva-like. Embora a presença de uma morfologia de esferóides não se correlacionou com uma migratório alterada, invasivo, ou a capacidade proliferativa das linhas celulares de CRC, a expressão do gene foi claramente alterada em células cultivadas em lrECM, em comparação com culturas 2D. Curiosamente, em linhas de células de tipo selvagem KRAS, a inibição do EGFR era menos eficaz em culturas lrECM (3D), em comparação com culturas de células em 2D. Assim, comparando ambos os modelos de cultura de células em 2D e 3D, os nossos dados demonstram a influência da ECM no crescimento do cancro. Comparada com a cultura de células em 2D convencional, o modelo de cultura de células (3D) lrECM oferece a oportunidade de investigar linhas permanentes de células de CRC sob condições mais fisiológicas, isto é, no contexto dos alvos terapêuticos moleculares e a sua inibição farmacológica

citação.: Luca AC, Mersch S, Deenen R, Schmidt S, Messner I, Schäfer KL, et al. (2013) Impacto do microambiente 3D sobre o fenótipo, a expressão genética, e EGFR Inibição de linhas celulares de cancro colorrectal. PLoS ONE 8 (3): e59689. doi: 10.1371 /journal.pone.0059689

editor: Nils Cordes, da Universidade de Tecnologia de Dresden, Alemanha