Métodos gerais para imortalizar primária Cells

As células primárias fornecer informações extremamente precisas e resultados relevantes de pesquisa, servindo como os modelos de celulares mais ideais para uma grande variedade de investigação, desde a biologia fundamentais celular e fisiologia, biologia do desenvolvimento, mecanismos da doença, a droga rastreio e desenvolvimento terapêuticos. No entanto, as células primárias não crescem indefinidamente em cultura e são muito difíceis de cultura. Portanto, os pesquisadores tendem a usar células imortalizadas por seu programa de investigação.

As células imortalizadas permitir aos investigadores utilizar o mesmo material consistente ao longo de um projeto de pesquisa, sem ter que estabelecer novas culturas, porque estas células imortalizadas têm uma vida prolongada extensão e manter os marcadores fenotípicos genótipo e do tecido de origem. Utilizando um serviço de imortalização celular ajuda os pesquisadores a evitar esse problema e oferece-lhes a possibilidade de uma fonte quase ilimitada de células que podem ser usados ​​durante toda a duração de um projeto de pesquisa inteiro.

A imortalização de sucesso de várias células primárias é implementado por utilização de diferentes genes e agentes. imortalização das células pode ser feito de várias maneiras; e serviço personalizado está disponível no mercado para ajudar a gerar linhas de células imortalizadas. Existem muitos métodos para a imortalização de células de mamíferos em ambientes de cultura. Alguns desses métodos estão listados abaixo:

hTERT Expressão

hTERT sozinho pode imortalizar células sem causar mudanças associados ao câncer ou alterar as propriedades fenotípicas. células humanas primárias que têm sido até agora estabelecido pela expressão forçada de hTERT sozinho incluem fibroblastos, células epiteliais pigmentadas da retina, células endoteliais, células escamosas esofágico, células epiteliais mamarias, queratinócitos, osteoblastos, e células nestina-positivas do pâncreas.

Um dos principais obstáculos à imortalização de células humanas primárias e o estabelecimento de linhas de células humanas é a senescência controlado por telômero. senescência controlado-telomere é causada pelo encurtamento dos telómeros que ocorre cada vez que as células somáticas humanas dividir. Mas os investigadores demonstraram que a transferência de um ADNc da hTERT exógeno, que codifica para a subunidade catalítica da telomerase humana, pode ser utilizada para impedir o encurtamento dos telómeros, superar senescência controlado-telomere, e imortalizar células humanas primárias.

Viral transformação

método de transformação Viral é uma outra maneira de contornar a senescência celular. A mais utilizada e a melhor entendida desta classe de genes virais é Vírus Símio 40 antigénio T grande (SV40). antigénio T grande de SV40 se liga a um número de proteínas (mais importantes são p53 e Rb) que, quando a funcionar normalmente, são reguladores negativos da divisão celular. Da mesma forma, usando siRNA para inactivar p53 e /ou Rb também pode iniciar ilimitada extensão de vida celular. Outros oncogenes incluem c-myc, ras e HPV 16, E6 /E7 e a sua introdução, de igual modo, pode eficientemente imortalizar os genes cells.Viral primárias, incluindo o vírus de Epstein-Barr (EBV) e virus 40 (SV40) Simian antigénio T pode induzir a imortalização. genes virais alcançar imortalização por inactivação dos genes supressores de tumor que colocam as células em um estado de senescência replicativa.

Inactivação de Tumor genes de supressão do

descobertas recentes descobriram que a co-expressão da subunidade catalítica hTERT combinado com p53 ou RB siRNA, com êxito pode imortalizar células epiteliais do ovário humano. Ao mesmo tempo, a sobre-expressão de RAS ou Myc T58A mutantes também foram encontrados para ser capaz de imortalizar alguns tipos de células primárias. Este método permite que um modelo de celular mais autêntica, com um fundo genético mais definido.

celular personalizado Imortalidade Serviços

Creative Bioarray pode fornecer serviços de imortalização celular personalizados. Com anos de experiência na imortalização celular, a empresa agora é capaz de imortalizar com sucesso células de humano, rato, bovino e cão, utilizando agentes imortalizando diferentes ou genes. O serviço imortalização personalizado pode prolongar significativamente a capacidade de replicação de suas células-alvo, o que ajuda a poupar tempo e dinheiro laboratório.

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