Abstract

Fundo

RNases atualmente estudados como alternativa não-mutagénicos aos fármacos anti-cancerígenos que danificam o DNA prejudiciais comumente utilizados na prática clínica. Muitos RNases de mamíferos não são potentes toxinas devido à forte inibição por inibidor da ribonuclease (RI) apresentado no citoplasma das células de mamíferos.

Metodologia /Principais Achados

Em busca de novos RNases anticancerígenos eficazes que estudaram os efeitos da barnase, uma ribonuclease de

Bacillus amyloliquefaciens

, em células cancerosas humanas. Descobrimos que barnase é resistente ao RI. No ensaio de viabilidade celular MTT, barnase era citotóxica para linhas de células de carcinoma humano com concentrações de meia-inibidora (IC

50) que varia de 0,2 a 13? M e a linhas de células de leucemia com CI

50 valores que variam de 2,4 a 82 uM . Além disso, foram caracterizados os efeitos citotóxicos de-base de barnase immunoRNase scFv 4D5-dibarnase, que consiste em duas moléculas de barnase em série fundidos com o fragmento de cadeia simples variável (scFv) do anticorpo 4D5 humanizado que reconhece o domínio extracelular de HER2 marcadora de cancro. O scFv 4D5-dibarnase ligado especificamente às células positivas para HER2 e foi internalizado através de endocitose mediada pelo receptor. A localização intracelular dos internalizado scFv 4D5-dibarnase foi determinado por microscopia electrónica. O efeito citotóxico do scFv 4D5-dibarnase em células de carcinoma do ovário humano HER-2 positivo SKOV-3 (IC

50 = 1,8 nM) foi de três ordens de magnitude maior do que a barnase sozinho. Ambos barnase e scFv 4D5-dibarnase apoptose induzida em células SKOV-3, com fragmentação internucleossômica cromatina, formação de bolhas de membrana, o surgimento de fosfatidilserina no folheto exterior da membrana plasmática, e a activação de caspase-3.

conclusões /Significado

Estes resultados demonstram que barnase é um agente tóxico potente para a segmentação de células cancerosas

Citation:. Edelweiss E, Balandin TG, Ivanova JL, Lutsenko GV, Leonova OG, Popenko VI , et ai. (2008) Barnase como um agente terapêutico Nova Disparo apoptose em células cancerosas humanas. PLoS ONE 3 (6): e2434. doi: 10.1371 /journal.pone.0002434

editor: Gideon Schreiber, Weizmann Institute of Science, Israel

Recebido: 22 de Agosto de 2007; Aceito: 13 de maio de 2008; Publicado: 18 Junho 2008