mulheres terão uma resposta inicial à terapia primária, a maioria acabará por sofrer uma recorrência usando o progresso da doença resistente à quimioterapia. Sensibilizadores e agentes quimioterapêuticos aumentado para tumores resistentes são essenciais. Avaliação do potencial de membrana mitocondrial de células SKOV 3 foram semeadas em placas para placas de 6 poços e tratadas com péptido de síntese após o que as células foram tratadas com doxorrubicina durante mais 24 h.
Rodamina 123 é apenas um corante catiônico que se localiza dentro da mitocôndria de células viáveis. As células foram colhidas, ressuspensas em meio contendo iodeto de propídio e examinadas por citometria de fluxo. Os dados foram obtidos ao longo de um movimento BD FACSort citómetro de aplicação de software quest celular e analisados. Dez mil células foram analisadas para cada teste. SKOV 3 ou células A2780 foram tratados com TM e anti-câncer drogas isoladamente e em combinação nas condições mencionadas. As células foram submetidas a lise, a concentração de proteína dos lisados quantificada, proteínas separadas pelo sistema de NuPAGE e imunotransferidas como descrito anteriormente.
células SKOV 3 foram tratados com TM e semeadas em placas de poços para 6 durante 24 h, após o que as células foram adicionalmente tratados com doxorrubicina para outro 5. 5 h e a análise efectuada tal como descrito anteriormente. Depois da terapia, as células foram incubadas com H2DCFDA carboxi durante 30 min a 37 ° C com CO2 cinco minutos. Carboxi H2DCFDA será a forma acetilada de um tipo fluoresceína diminuída que é permeável célula e se torna fluorescente na presença de oxidantes celulares. As células foram recolhidas e ressuspensas em solução salina tamponada com fosfato de carga antes de ser avaliada por citometria de fluxo. Para avaliar se a TM poderia sensibilizar as células de cancro do ovário em relação a terapêutica de doxorrubicina, a análise de SRB foi realizada. células cancerosas
Platinum tolerantes SKOV 3 ovarianos foram tratados com TM, durante 24 h, após o que as células foram tratadas com doxorrubicina durante mais 24 h. As células tratadas apenas com doxorrubicina em todas as concentrações examinadas diminuição da proliferação de células por 29%, em comparação com controlos não tratados. As células tratadas exclusivamente com TM reduziu a viabilidade celular em cinco minutos. Pré-tratamento com TM, seguido por tratamento com doxorrubicina revelou grande sensibilização com viabilidade restringido por 42. 1000, 62. 04-10 e 79. 10 por cento. Para confirmar TM mediada sensibilização de células de cancro do ovário à doxorrubicina, células A2780 sensíveis e dolorosas jóias foram tratados tal como descrito acima com a excepção de que o TM foi utilizado na concentração de 7 5 um.
O tratamento com TM sozinho desencadeada ou duas semanas reduziu total de viabilidade enquanto doxorrubicina efeitos de uma maneira dose-dependente aplicada. A mistura TM /doxorrubicina desmascarado sensibilização substancial de células A2780, com possibilidade inibidas por 74. 8%, 87. Cinco minutos ou 97. Mãos a. Foi realizada movimento citometria de células tratadas com droga para determinar uma potencial perda de potencial de membrana mitocondrial, um evento irreversível durante todo o processo de apoptose. As células tratadas com TM sozinho apenas exibiu alteração mínima da m e mantido na sua maioria prático, como mostrado na Figura 1C. Da mesma forma, a grande maioria das células tratadas com doxorrubicina mantido principalmente sensato com 8.
Um grande número de células de morto, e um mais 13. 95,000-100,000 com uma m danificado. Em contraste, o tratamento com TM, seguido de um tratamento adicional com a doxorrubicina aumento da população de células mortas a 15. 2% e também aumentou as pessoas de células com uma m interrompido para 26. 8%.