Abstract

Fundo

O objetivo deste estudo foi explorar o efeito combinado do tipo receptor de melatonina 1A (

MTNR1A

) polimorfismos genéticos e exposição a agentes cancerígenos ambientais sobre a susceptibilidade e clínico-patológicas características do câncer bucal.

Metodologia e principais conclusões

Três polimorfismos do

MTNR1A

gene de 618 pacientes com câncer oral e 560 controles não-cancerosas foram analisados ​​por reacção em cadeia da polimerase em tempo real (PCR). O haplótipo CTA da estudou

MTNR1A

polimorfismos (rs2119882, rs13140012, rs6553010) foi relacionado a um maior risco de câncer oral. Além disso,

MTNR1A

polimorfismos do gene exibiu efeitos sinérgicos de fatores ambientais (quid betel e tabaco) sobre a susceptibilidade de câncer oral. Finalmente, os pacientes de câncer oral, com hábito betel quid-mastigação que tiveram T /T alelo do

MTNR1A

rs13140012 eram em maior risco de desenvolver um estágio e linfonodo clínico avançado metástase.

Conclusão

Estes resultados suportam interações gene-ambiente de

MTNR1A

polimorfismos com o tabagismo e betel hábitos de mastigação quid possivelmente alterando a suscetibilidade e metástase do câncer bucal

Citation:. Lin FY, Lin CW, Yang SF, Lee WJ, Lin YW, Lee LM, et al. (2015) Interações entre fatores ambientais e melatonina Receptor Tipo 1A Polimorfismo em relação ao cancro oral Susceptibilidade e Desenvolvimento Correlação. PLoS ONE 10 (3): e0121677. doi: 10.1371 /journal.pone.0121677

Editor do Academic: Chung-Jung Chiu, Tufts University, Estados Unidos

Recebido: 21 de outubro de 2014; Aceito: 03 de fevereiro de 2015; Publicação: 25 de março de 2015

Direitos de autor: © 2015 Lin et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Disponibilidade de dados: Todos os dados relevantes estão dentro do papel

Financiamento:. Este estudo foi apoiado por uma bolsa do Conselho Nacional de Ciência (NSC102-2320-B-038-038-MY3) e uma subvenção de Taoyuan Forças Armadas Hospital Geral (TAFGH- 103-29). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

Competir interesses:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

cânceres da cavidade oral estão entre as mais comuns, com uma incidência idade-padronizados em todo o mundo anual estimada de 3,8 /100.000 e uma taxa de mortalidade de 1,9 /100.000 habitantes [1]. A grande maioria destes cancros são carcinomas de células escamosas orais (epidermóide estudados). Apesar dos esforços substanciais e novos avanços terapêuticos, a taxa de sobrevida em 5 anos para a CEB não melhorou consideravelmente ao longo dos últimos 2 décadas [2, 3]. Em Taiwan, a CEB é também o quarto câncer masculino mais comum e a quinta maior causa de morte por câncer [4]. Portanto, CCEO ainda é uma ameaça à saúde pública significativa em todo o mundo [5].

É amplamente aceito que o desenvolvimento da CEB é um processo de várias etapas que requer a acumulação de múltiplas alterações genéticas, que é afetada por um paciente de predisposição genética e por influências ambientais, incluindo álcool e consumo de tabaco, betel (

Areca catechu

) mastigação -quid, e infecção viral [6-8]. polimorfismos de um único nucleótido (SNPs), o tipo mais comum de variação na sequência de ADN, ocorrer quando um único nucleótido na sequência partilhada de um gene diferente entre os membros de uma espécie ou cromossomas emparelhados num indivíduo, e pensa-se estar associada com a desenvolvimento de certas doenças [9]. De acordo com relatórios anteriores, parece provável que polimorfismos genéticos sozinhos não são capazes de provocar manifestações clínicas da CEB, mas junto com estilo de vida e fatores ambientais, eles podem contribuir ainda mais para o desenvolvimento e progressão da doença [10, 11].

a melatonina é um hormônio produzido pela glândula pineal e é liberado em resposta à informação photic da retina. Em humanos, a secreção de melatonina aumenta logo após a exposição à escuridão, picos durante o meio da noite, e depois diminui ao longo da segunda metade da noite [12]. A melatonina foi relatado para exercer actividade oncostática através de mecanismos biológicos incluindo antiproliferativa e acções pró-apoptóticos, a estimulação da imunidade anti-cancro, a modulação da expressão do oncogene, e anti-inflamatória, anti-oxidante, e efeitos anti-angiogénicos [13, 14]. Os efeitos anti-cancerígenos da melatonina foram indicados em uma ampla gama de tumores diferentes (mama, gastrointestinal, hematológica, próstata, osteossarcoma e melanomas) [14]. No entanto, pouca pesquisa foi conduzida em melatonina e a sua actividade anti-cancerígena na cavidade oral.

Os receptores de melatonina 1A (MTNR1A) e 1B (MTNR1B) são em grande parte responsável por mediar os efeitos a jusante da melatonina, enquanto arilalquilamina N -acetyltransferase (AANAT) é a principal enzima de síntese da melatonina, e controla o ritmo dia /noite de produção de melatonina pela glândula pineal [15]. Todos os três foram identificados jogadores como potencialmente importantes na mediação da mama risco [16, 17], mas apenas MTNR1A teria sido correlacionada com tamanhos tumorais e as taxas de sobrevivência em pacientes com CCEO [18]. Estudos demonstraram que polimorfismos em

MNTRs

estão associados com vários tipos de doenças, incluindo artrite reumatóide [19], o cancro da mama [20], infarto agudo do miocárdio [21], litíase renal de cálcio [22], e síndrome do ovário policístico ( SOP) [23], sugerindo papéis funcionais para essas variantes. Foi sugerido como sendo possivelmente devido à produção de proteína alterada ou função.

Embora a evidência existe apoio MTNR1A tendo um efeito tumor-supressor, pouco se sabe sobre a associação entre polimorfismos genéticos de

MTNR1A Comprar e o risco de câncer oral. O presente estudo investigou as relações entre os SNPs (rs2119882) no regiões do

MTNR1A

gene eo risco de câncer bucal (Fig. 1A) promotor e intron (rs13140012 e rs6553010). As influências desses SNPs combinados com mascar betel-nut e consumo de tabaco, levando a uma susceptibilidade ao câncer bucal, foram avaliados. Também foram investigadas as relações entre influências genéticas, exposições ambientais e as características clinicopatológicas de câncer oral. Para o nosso conhecimento, este é o primeiro estudo a demonstrar uma associação significativa entre o

MTNR1A

polimorfismos e carcinogênese oral

apresentação esquemática do

MTNR1A

. (ID gene: 4543) (a) indicando locais das variantes analisadas (rs2119882, rs13140012 e rs6553010), (B) ao observado haploblock, ea medida LD pares, D ‘. caixa preta, a região não traduzida; caixa branca, região codificadora. A cor vermelha revela o factor de transcrição putativo sítios de ligação.

Materiais e Métodos

Sujeitos e COLETA

Em 2007-2013, foram recrutados 618 pacientes (596 homens e 22 mulheres, com idade média de 54,29 ± 11,28 anos) no Hospital Chung Shan Medical University, Taichung, e Changhua Hospital Christian e Show Hospital Memorial Chwan, Changhua, Taiwan como o grupo caso. Enquanto isso, os controles foram recrutados a partir do exame físico durante aqueles três hospitais, que são também as instalações que os casos foram coletados a partir de. No final de recrutamento, foram incluídos um total de 560 participantes (457 homens e 103 mulheres com uma idade média de 51,82 ± 14,72 anos) que tinham história nem auto-referida de cancro de sites. Além disso, indivíduos com doença pré-cancerosa oral, tais como fibrose oral, submucoso, leucoplasia, eritroplasia, hiperplasia verrucosa, etc. foram excluídos do grupo de controle. A taxa de participação foi de aproximadamente 92,9% (618/665) dos casos e 80,8% (560/693) para controles. Para ambos os casos e controles, foi utilizado um questionário para obter informações sobre a exposição de mascar betel-quid, uso de tabaco e consumo de álcool. A informação médica dos casos, incluindo o estadiamento clínico TNM, o tamanho do tumor primário, comprometimento de linfonodos e grau histológico, foi obtido a partir de seus registros médicos. pacientes Oral-cancerosas foram clinicamente classificados no momento do seu diagnóstico de acordo com o sistema TNM encenação da American Joint Committee on Manual do Câncer (AJCC) Staging: Estágio I = T1N0M0; (7

th ed.) fase II = T2N0M0; fase III = T3N0M0, ou T1, T2 ou T3N1M0; e estágio IV = qualquer lesão T4, qualquer N2 ou lesão N3, ou qualquer lesão M1. diferenciação do tumor foi examinado por um patologista de acordo com a classificação da AJCC. amostras de sangue total recolhido de controlos e pacientes com tumores foram colocados em tubos contendo ácido etilenodiaminotetraacético (EDTA), centrifugou-se imediatamente, e, em seguida, armazenada a -80 ° C. Este estudo foi aprovado pelo Institutional Review Boards de Chung Shan Medical University Hospital, e informado consentimento por escrito para participar no estudo foi obtido a partir de cada indivíduo.

Seleção de

MTNR1A

polimorfismos

no total, 3 SNPs em

MTNR1A

foram selecionados a partir dos dados do Projeto Internacional HapMap para este estudo. Foram incluídos -386A /L (rs2119882) na região promotora. rs13140012 e rs6553010, que está localizado no intrão 1 de

MTNR1A

, foram seleccionados neste estudo uma vez que estes 2 SNPs foram encontrados para modificar as afinidades de ligação de vários factores de transcrição [22].

o ADN genómico de extracção

o ADN genómico foi extraído utilizando kits de DNA QIAamp mini-arterial (Qiagen, Valencia, CA, EUA) seguindo as instruções do fabricante. Dissolveu-se o ADN em tampão de TE (Tris 10 mM e EDTA 1 mM; pH 7,8) e depois quantificado por isso a medição da densidade óptica a 260 nm. A preparação final foi armazenado a -20 ° C e usado para criar modelos para a reacção em cadeia da polimerase (PCR).

-PCR em tempo real

discriminação alélica de rs2119882, polimorfismos rs13140012, e rs6553010 do

gene MTNR1A

foi avaliada com o StepOne real-Time System ABI PCR (Applied Biosystems, Foster City, CA, EUA), e analisados ​​com vers SDS. 3.0 Software (Applied Biosystems) usando um ensaio TaqMan. O volume final de cada mistura reaccional foi de 5 mL, contendo 2,5 mL TaqMan Genotipagem Master Mix, 0,125 mL TaqMan mistura de sonda, e 10 ng de ADN genómico. O PCR em tempo real incluído um passo de desnaturação inicial a 95 ° C durante 10 min, seguido de 40 ciclos a 95 ° C durante 15 s e depois a 60 ° C durante 1 min.

A análise estatística

as diferenças entre os 2 grupos foram consideradas significativas para

valores p

de 0,05. Hardy-Weinberg (HWE) foi avaliada utilizando um goodness-of-fit

Χ

2

-teste de marcadores bialélicos. O Mann-Whitney

U

-teste e exato de Fisher foram usados ​​para comparar diferenças nas distribuições das características demográficas dos pacientes entre os não-câncer (controle) e grupos de câncer oral. Os rácios ajustada odds (RUP, ORa) e intervalos de confiança de 95% (IC) da associação entre freqüências genotípicas e de risco acrescido características clinicopatológicas foram estimadas usando vários modelos de regressão logística, após o controle de outras variáveis. Foram analisados ​​todos os dados com o software para Windows Estatística Analytic System (SAS Institute, Cary, NC, EUA).

Resultados

A análise estatística das características demográficas é mostrada na Tabela 1. Encontramos significativamente diferentes distribuições de idade (

p

= 0,001), sexo (

p Art 0,001), betel-quid mastigação (

p Art 0,001), consumo de álcool (

p Art 0,001), e uso de tabaco (

p Art 0,001) entre os participantes de controle e pacientes com tumores. Para diminuir a possível interferência de fatores ambientais, as ORa com IC de 95% foram estimadas por vários modelos de regressão logística após o controle de outras variáveis ​​em cada comparação.

No nosso grupo de controle recrutados, frequências de

MTNR1A

genes estavam em Hardy-Weinberg (

p Art 0,05). Reconstruída desequilíbrio de ligação (LD) para os lotes 3 SNPs são mostrados na Fig. 1B. As distribuições genotípicas e associações entre o câncer oral e polimorfismos do gene da

MTNR1A

são apresentados na Tabela 2. Os alelos com as maiores frequências de distribuição para rs2119882, rs13140012 e genotys rs6553010 de

MTNR1A

em ambos recrutados pacientes com câncer bucal e controles saudáveis ​​foram heterozigotos T /C, heterozigotos A /T, e homozigoto A /A, respectivamente. Após o ajuste para as variáveis, não houve diferença significativa em ter câncer oral em indivíduos com as rs2119882, rs13140012, e polimorfismos rs6553010 do

MTNR1A

gene em comparação ao tipo selvagem indivíduos (WT).

os efeitos combinados de factores ambientais e

MTNR1A

SNPs gene no risco de câncer oral são mostrados nas Tabelas 3 e 4. Entre 748 fumantes, indivíduos com pelo menos 1 alelo C do rs2119882, 1 T alelo de rs13140012, ou 1 G alelo rs6553010 eo hábito betel-nut-mastigação, respectivamente teve 42.00- (IC 95%: 15.79 ~ 111.71), 27.96- (IC 95%: 11,03 ~ 70,84) e 23,65 vezes (95 CI%: 10.20 ~ 54.86) maiores riscos de ter câncer oral. Indivíduos com tanto pelo menos 1 C alelo rs2119882, alelo 1 T de rs13140012, ou 1 G alelo rs6553010 ou que mastigou noz de betel teve respectivos riscos de 5.17- (IC 95%: 2,75 ~ 9,70), 4.39- (95% CI : 2,30 ~ 8,36), e 4,15 vezes (IC 95%: 2,32 ~ 7,42) de ter câncer oral em comparação com indivíduos com homozigotos WT que não mastigar noz de betel (Tabela 3)

Entre os consumidores betel-nut em nossa coorte, os indivíduos com

MTNR1A

rs2119882, rs13140012, ou genes polimórficos rs6553010 e que fumavam tinham correspondente (95% CI: 2.58 ~ 34.79) 9.48-, 8.37- (95% CI: 1,84 ~ 38.01), e 5,33 vezes (IC 95%: 1,17 ~ 22,28) maior riscos de ter câncer oral em comparação com chewers betel-quid com o gene WT que não fumam (Tabela 4). Além disso, as pessoas que eram ou polimórfica para

MTNR1A

em rs2119882 ou que fumavam eram um risco 12,95 vezes (

p Art 0,05) de desenvolver câncer oral, em comparação com as pessoas com o WT gene que não fumam (Tabela 4). Os resultados acima sugerem que o

MTNR1A

polimorfismos do gene têm fortes impactos sobre a susceptibilidade ao câncer bucal em chewers betel-nut e /ou fumantes de cigarro. Sobre a avaliação das interações entre

MTNR1A

SNPs e noz de betel de mascar /tabagismo entre os não-fumantes /não-chewers coorte. Porque o tamanho da amostra dos não fumadores (90 casos) ou não-chewers (140 casos) em nossos pacientes com tumores recrutados são em relação muito pequeno para dividir ainda mais em 3 subgrupos (alelos WT, o genótipo heterozigoto mutante e do genótipo mutante homozigoto). Sugerimos que as interações entre

MTNR1A

SNPs e noz de betel de mascar /tabagismo entre os não-fumantes /não-chewers não pôde ser avaliada agora e mais amostras devem ser coletadas em nosso trabalho futuro.

Para explorar os efeitos de genótipos polimórficos de

MTNR1A

sobre o estado clínico do CCEO, classificamos pacientes com tumores em 3 subgrupos. No primeiro subgrupo, os pacientes tinham alelos WT homozigotos; nos outros 2 subgrupos tinham um alelo polimórfico e 2 alelos polimórficos, respectivamente. Não foram observadas associações significativas dos rs2119882, rs13140012 e polimorfismos do gene rs6553010 com o estado clínico-patológico. No entanto, entre 478 pacientes com câncer oral, que mascavam betel quid, aqueles que tinham uma rs13140012 polimórficos (T /T) do gene tinham um risco maior de desenvolver um estágio clínico avançado (AOR: 2,76; IC 95%: 1,27 ~ 5,99;

p

= 0,01) e da linfa cervical metastático (AOR: 2,19; IC 95%: 1,01 ~ 4,74;

p

= 0,046) em comparação com pacientes com a rs13140012 WT, mas não houve diferenças em o tamanho do tumor primário, metástase distal, ou grau histológico (Tabela 5).

Nós exploramos ainda mais os haplótipos para avaliar os efeitos combinados dos 3 polimorfismos de susceptibilidade ao câncer oral. As frequências de distribuição do

MTNR1A

rs2119882, rs13140012 e haplótipos rs6553010 em nossos indivíduos recrutados foram analisados. O haplótipo mais comum no controle foi TAA (56,2%), e foi, por conseguinte, escolhido como referência. Em comparação com a de referência, um

MTNR1A

haplótipo, CTA, significativamente (

p

= 0,001) aumentou os riscos de CEO por 1,77 vezes (IC 95%: 1,27 ~ 2,47) (Tabela 6 ).

Discussão

neste estudo, nós fornecemos informações novela de

MTNR1A

SNPs com sensibilidade oral do cancer, interações com fatores de risco ambientais e associações com clinicopatológico status.

O hormônio pineal, a melatonina, o mais amplamente reconhecido por seu papel no sono e regulação do ritmo circadiano, foi demonstrado exercer efeitos oncostatic ambos

in vivo

e

in vitro

em vários tipos de tumores malignos, tais como cancros da mama e próstata, e gliomas [24-26]. Nos mamíferos, vários sítios de ligação para melatonina foram identificados e os receptores de membrana MTNR1A e MTNR1B, que são de importância cronobiológica máximo.

MTNR1B

variantes genéticas foram relatados para ser um fator de risco para o desenvolvimento de diabetes tipo 2 [27] tipo. MTNR1A é muito mais abundante do que MTNR1B, e há evidências de que os efeitos inibidores do crescimento da melatonina sobre as várias células cancerosas são MTNR1A dependente do receptor [28, 29]. Em adição aos efeitos anticancerígenos dependente do receptor, a melatonina tem sido relatado para atravessar membranas facilmente e exercem vários efeitos anticancerígenos independente dos receptores. Por exemplo, a melatonina pode induzir efeitos anticancerígenos independente de receptores através das suas interacções com came, a PI3K /Akt /ERK, modulando SIRT1, o saldo ROS, e até mesmo ativação /inibição de caspases e outros pró-apoptótica (Bam, Bax, Bak) ou proteínas anti-apoptóticas (Bcl-XL, Bcl-2) [14]. Em CEB, foram relatados melatonina e MTNR1A exibir actividade de crescimento supressiva e descobriu que o

MTNR1A

gene é geralmente reprimidos ou silenciados através da regulação epigenética [18, 30, 31]; no entanto, não houve estudos sobre a relação entre a regulação genética do

MTNR1A

gene e câncer oral.

O

MTNR1A

gene está localizado no cromossomo 4q35.1, e é composta por 2 exões que codificam uma proteína de 350 aminoácidos. Um estudo anterior mostrou que uma variante aberrante na região promotora de

MTNR1A

foi inversamente correlacionada com a sua expressão em linhas de CCEO [18]. Além disso, nenhuma mutação foi detectada em qualquer um dos exões codificantes (exões 1 e 2) do

gene MTNR1A

em qualquer uma das linhas celulares testadas, que provou que o promotor de

MTNR1A é

uma região funcional e está associada com a expressão MTNR1A [18]. rs2119882 SNP está localizado na região promotora do gene da

MTNR1A

. De acordo com HapMap [32], rs2119882 pode capturar os outros 2 SNPs (rs11721818 e rs7687823) na região promotora do gene da

MTNR1A

. Os SNPs 3 coberto 6,3 kb da região do promotor do gene da

MTNR1A

. Portanto, rs2119882 é o principal SNP funcional em

MTNR1A

. Além disso, relatórios anteriores também indicaram que um fragmento contendo o exão 1 e o intrão 1 na

MTNR1A

gene mostraram uma notável actividade de transcrição [18], e polimorfismos de rs13140012 pode afectar as afinidades de ligação de vários factores de transcrição [22] . De acordo com esses resultados, rs2119882 SNP e 2 SNPs (rs13140012 e rs6553010), localizado no intron 1 de

MTNR1A

foram investigados em nosso estudo

.

Em nosso estudo,

MTNR1A

SNPs gene (rs2119882, rs13140012 e rs6553010) por si só não contribuem para a suscetibilidade ao câncer oral. Os efeitos sinérgicos de fatores ambientais (betel quid mastigação e de fumo do cigarro) e

MTNR1A

polimorfismos do gene sobre o risco de câncer oral são bem demonstrada. Semelhante ao nosso estudo, os nossos estudos anteriores mostraram que polimorfismos genéticos de um oncogene (por exemplo,

CA-9

) ou gene supressor de tumor sozinho (por exemplo,

RECK

) não foram capazes de prever o risco de câncer oral. No entanto, após combinado com informações sobre a exposição cancerígena, foi observado um efeito significativo para prever a susceptibilidade ao câncer oral [10, 11]. exposição substância cancerígena e uma possível predisposição genética podem variar entre diferentes áreas geográficas. Um estudo de coorte de Taiwan [33] mostrou que betel quid mastigação e de fumo hábitos eram fatores de risco para desenvolvimento de câncer oral. Neste estudo, os rácios mais elevados de indivíduos com mastigação e de fumo hábitos betel quid entre os pacientes de câncer bucal (77,3% e 85,4%) do que nos controles (16,6% e 39,3%) foram encontrados, o que indica que betel quid de mastigação e de fumo de tabaco hábitos são altamente associado com aumento do risco de câncer oral. Além disso, o efeito sinérgico de mascar bétel libras e fumar no desenvolvimento de cancro por via oral pode ser explicada por alguns estudos anteriores. O quid betel utilizado em Taiwan contém noz de areca, cal, e inflorescência piper betel ou folha [34]. Hydroxychavicol, um componente fenólico do betel folha, tem a capacidade para modular os efeitos tóxicos mediados pela cancerígena cigarro, benzo [a] pireno, induzindo

diidrodiol

mutações do gene da desidrogenase [35]. A evidência mostrou que a saliva alcalina gerada pela mastigação bétele podem desempenhar um papel em danos no ADN induzida por nicotina relacionados com cigarros, e espécies de oxigénio reactivas pode ser envolvida na geração deste danos no ADN [36]. Actualmente, sabemos que a expressão ectópica de MTNR1A pode suprimir o crescimento de células CEs, mas a expressão de MTNR1A em CEB é geralmente regulada negativamente em relação a células epiteliais orais normais [18]. Relatos anteriores indicaram que betel-contrapartidas, tabacos carcinogéneos podem induzir a expressão do factor de transcrição indutível por hipoxia, gene de resposta precoce de crescimento 1 (Egr-1), em fibroblastos bucais [37], e os tecidos do pulmão [38], respectivamente. Egr-1 é reconhecido como um supressor de transcrição do gene da

MTNR1A

[39]. Além disso, o SNP rs2119882 também foi relatada como resultando em alterações quantitativas de

MTNR1A

em pacientes com SOP [23]. No entanto, não temos nenhuma evidência de que polimorfismos em rs2119882, rs13140012 ou rs6553010 pode influenciar diretamente

MTNR1A

expressão em pacientes com CEB. De acordo com nossos dados atuais, a hipótese de que betel-quid e tabaco cancerígenas podem alterar

MTNR1A

atividade do promotor dependente da presença de rs2119882, rs13140012 e polimorfismos rs6553010, mas esta questão deve ser investigado no futuro.

foi relatado que

MTNR1A

em CCEO é geralmente mostrado para ser diminuída e

MTNR1A

metilação do promotor tem uma maior incidência em CCEO em relação ao correspondente mucosa normal. A expressão da proteína de MTNR1A em CCEO foi inversamente associado com o estágio T e sobrevivência global [18]. No presente estudo, betel quid-mastigação pacientes de câncer oral com o

MTNR1A

rs13140012 T /T tipo de mutação apresentavam maiores riscos para o desenvolvimento avançado clínica palco e metástase linfática do que aqueles com o WT. Este resultado implica também uma afinidade de substâncias cancerígenas betel-quid em função do MTNR1A e sua expressão, e câncer de boca, em seguida, mais facilmente procede a um estágio avançado e metástase. Várias mutações de aminoácidos na MTNR1A têm sido relatados para influenciar a afinidade de ligação da melatonina [40], mas os SNPs aqui investigados que todos localizados no promotor ou região intrão e não pode induzir a alteração de aminoácido em MTNR1A. Além disso, o MTNR1A rs13140012 A mutação T tem sido relatado para afectar a afinidade de ligação de vários factor de transcrição (s) [22], e sugeriu que a rs13140012 A variante T pode actuar em combinação com agentes cancerígenos betel-libra e outro ainda para ser identificadas variantes funcionais no gene para influenciar a expressão MTNR1A e os riscos para o desenvolvimento clínico fase avançada e metástase em pacientes com tumores. No entanto, o mecanismo subjacente deve ser elucidado no laboratório e clinicamente.

Uma variedade de SNPs pode ser silencioso, isto é, sem qualquer efeito directo sobre os produtos dos genes. No entanto, em virtude de que existe LD em todo o genoma humano, eles podem ainda ser utilizados como marcadores genéticos para localizar variantes funcionais adjacentes que contribuem para a doença. Quando cada haplótipo construção SNP tem uma verdadeira contribuição para a susceptibilidade da doença, mesmo que inaparente, análises de haplótipos podem proporcionar um maior poder estatístico e são, por vezes, vantajoso sobre a análise de um SNP individual para detectar uma associação entre alelos e um fenótipo da doença [41] . Foram analisadas as contribuições de diferentes combinações de haplótipos de 3

MTNR1A

SNPs (rs2119882, rs13140012 e rs6553010) para o risco de câncer oral e, eventualmente, descobriu que o haplótipo CTA mostrou um alto risco para CEB. É possível que o haplótipo CTA de

MTNR1A

está em LD com outros polimorfismos funcionais que são responsáveis ​​por uma susceptibilidade a CEB.

Em resumo, a nosso conhecimento, este é o primeiro estudo a mostrar a associação estatística entre o

MTNR1A

polimorfismo, betel quid-tabaco de mastigação e tabagismo, e a susceptibilidade ao desenvolvimento de câncer oral. Betel quid-mastigação pacientes de câncer oral com o

MTNR1A

rs13140012 T polimorfismo /T tinham um risco maior de desenvolver um palco e linfáticos do pescoço clínica metástase avançada do que as transportadoras WT. No entanto, ainda faltam uma explicação mecanicista convincente para este fenómeno e deve ser investigado no futuro.