Abstract

estudos observacionais anteriores relataram associações entre câncer de próstata e ácido alfa-linolénico (ALA). No entanto, poucas investigações têm sido capazes de estudar esta relação de forma prospectiva e em ambientes bem controlados. Além disso, nenhum estudo determinou se polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) que influenciam o metabolismo ALA estão associados a esse tipo de câncer comum. O objetivo deste estudo foi explorar as associações entre os níveis prostáticas de ALA, SNPs e biomarcadores específicos de câncer de próstata em amostras coletadas de um ensaio clínico randomizado anterior realizado usando um modelo pré-cirúrgica e que testou os efeitos da suplementação de linhaça, uma rica fonte de ALA , antes da prostatectomia (n = 134). antigénio específico da próstata no soro (PSA) foi determinada e imuno-histoquímica foi utilizada para avaliar a taxa de proliferação de tumor (Ki67). Prostática ALA foi determinada por cromatografia gasosa. Sete SNPs previamente identificados associados à atividade delta-6 dessaturase (rs99780, rs174537, rs174545, rs174572, rs498793, rs3834458 e rs968567) foram testados para associações com prostática ALA, PSA e Ki67. Apesar de consumir sete vezes mais ALA por dia, os homens no braço de linhaça teve quantidades similares de próstata ALA em relação aos homens não se consumir linhaça. Na análise não ajustada, houve associações positivas significativas entre prostática ALA e PSA (ρ = 0,191, p = 0,028) e Ki67 (ρ = 0,186, p = 0,037). Após o ajuste para co-variáveis ​​(linhaça, idade, raça, IMC e estatina-use) a associação entre ALA e PSA manteve-se (p = 0,004), mas foi ligeiramente atenuado para Ki67 (p = 0,051). Não foram observadas associações entre qualquer um dos SNPs estudados e prostática ALA; no entanto, em modelos para PSA houve uma interação significativa entre rs498793 e ALA e para Ki67 houve interações significativas com ALA e rs99780 e rs174545. Foram observadas associações independentes e inversa entre rs174572 e Ki67. Este estudo fornece evidências de que prostática ALA, independente da quantidade de ALA consumida, está positivamente associada com biomarcadores de câncer de próstata agressivo e que a variação genética pode modificar esta relação

Citation:. Azrad M, Zhang K, Vollmer RT , J Madden, Polascik TJ, Snyder DC, et ai. (2012) prostática ácido alfa-linolênico (ALA) está positivamente associada com o câncer de próstata agressivo: uma relação que pode depender de variação genética em ALA Metabolism. PLoS ONE 7 (12): e53104. doi: 10.1371 /journal.pone.0053104

editor: Rui Medeiros, IPO, Inst Porto Oncology, Portugal |

Recebido: 20 Agosto, 2012; Aceito: 23 de novembro de 2012; Publicação: 28 de dezembro de 2012

Direitos de autor: © 2012 Azrad et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. O financiamento para este estudo foi fornecido pelo National Institutes of Health (CA85740, CA07464830 e M01-RR-30). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

Conflito de interesses:. A linhaça usado no estudo foi doado por ENRECO, Inc. Este não altera a adesão dos autores para todas as políticas de PLoS One sobre os dados e materiais de compartilhamento.

Introdução

Um em cada seis homens americanos serão diagnosticados com câncer de próstata durante sua vida, e cada ano mais de 33.000 homens morrem desta doença [1]. Os fatores que separam indolente da doença agressiva permanecem desconhecidos. Como o câncer de próstata é mais prevalente nas sociedades ocidentais, é a hipótese de que fatores genéticos e ambientais desempenham um papel proeminente na sua etiologia. Dieta é considerada um dos principais fatores ambientais modificáveis ​​que influenciam o curso da doença [2].

A ingestão dietética de ômega-3 ácidos graxos poliinsaturados (PUFAs) é proposto para ser associado com a patogênese e progressão do câncer de próstata [3 ]. Enquanto que o ácido eicosapentaenóico 20 carbono (EPA) é considerado para ser protetor [4], o seu 18 precursor de carbono, ácido alfa-linolénico (ALA), tem sido associada com risco aumentado de cancro da próstata em alguns (mas não todos) os estudos [5 ], [6]. Tendo em conta os resultados inconsistentes de estudos epidemiológicos, uma meta-análise de 16 estudos concluiu que existe uma falta de uma associação significativa entre a ingestão dietética de ALA e de risco para o câncer de próstata [7]. Curiosamente, a meta-análise constatou que os níveis fisiológicos mais elevados de ALA no soro, eritrócitos ou tecido adiposo, foram associados com 54% maior risco de cancro da próstata [7]. A discordância entre ALA na dieta eo risco de câncer de próstata e níveis fisiológicos de ALA e câncer de próstata pode ser uma função das dificuldades na recolha de dados dietéticos precisos. No entanto, a discordância pode estar relacionada à variação no metabolismo do ALA.

tecido níveis de ALA são, em parte dependente de ingestão alimentar. Além disso, a delta-6 dessaturase, a enzima dessaturase que catalisa o passo limitante da taxa no metabolismo de ALA determina os níveis nos tecidos de ALA. Esta enzima é expresso principalmente no fígado, mas em outros órgãos, incluindo a próstata, e a ingestão dietética de AGPI tem sido demonstrado que regulam a sua expressão em tecido [8]. Além disso, o ácido linoleico dietético (LA) requer a delta-6 dessaturase para a biossíntese de ácido araquidónico e, assim, compete com ALA para dessaturase [8]. Assim, uma maior proporção de LA em ALA, tal como visto numa dieta ocidental, resulta em uma mudança que favorece LA e ALA impede o metabolismo [9]. Além disso, a variação genética desempenha um papel importante no metabolismo de ALA. polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) em e perto

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, o gene que codifica a delta-6 dessaturase, foram altamente associados com os níveis de ALA em eritrócitos, plasma e soro em estudos genéticos populacionais anterior [10], [ ,,,0],11] e estudo de associação genômica ampla abrangentes [12], [13]. Estudos têm mostrado que a presença do alelo menor em vários SNPs é significativamente associados com níveis sanguíneos elevados de ALA [10] – [13]. As associações fortes e consistentes relatados para SNPs nesta região genética indicam que a variação genética altera a delta-6 dessaturase, a funcionalidade, ou expressão, resultando no metabolismo modificado ALA [14]. O papel que a variação genética desempenha nos níveis de tecido prostático de ALA e câncer de próstata é desconhecida mas a investigação mandados [15].

Até o momento, não houve ensaios clínicos que investigaram os efeitos da suplementação dietética em ALA homens com câncer de próstata [7]. No entanto, em nossa fase anterior II ensaio clínico randomizado (RCT), dietas que foram suplementados com 30 g /d de linhaça e desde 6,51 g /d de ALA, foram testados contra dietas com ingestão normal ALA em homens diagnosticados com câncer de próstata localizado para ~31 dias antes da prostatectomia [16]. Homens nos braços de linhaça tiveram taxas de proliferação do tumor significativamente mais baixos no tecido da próstata. O estudo anterior proporcionou a oportunidade única de explorar associações entre prostática ALA, SNPs associados à actividade dessaturase delta-6 e biomarcadores da doença agressiva por exemplo, taxa de proliferação (Ki67) e soro PSA em homens que consomem uma dieta rica em ALA contra a ingestão regular ALA. As nossas hipóteses foram como se segue: (1) Propõe-se que a inibição do metabolismo do ALA promove o cancro da próstata e vai levar a associação positiva entre as concentrações de ALA no tecido prostático e taxas de PSA no soro e a proliferação do tumor; e (2) Propomos também que a variação genética no metabolismo ALA modificar a relação entre ALA e estes biomarcadores para o câncer de próstata agressivo.

Materiais e Métodos

Ética Declaração

Todos os procedimentos e os testes foram aprovados pela Duke University Medical Center, de Veteranos Durham Administration Medical Center e da Universidade de Michigan Comunidade oncologia Clínica Programa Institucional Review Boards e consentimento informado por escrito foi obtido antes de qualquer amostra e coleta de dados.

desenho do estudo e participantes

Este estudo utilizou dados e amostras biológicas de nossa fase anterior multi-site II RCT (NCT00049309) em homens com cancro da próstata prostatectomia aguardando [16], [

17]. A RCT incluiu 161 homens designados para controlar (n = 41), linhaça (FS) (n = 40), dieta de baixa gordura (LF) (n = 40) ou FS + LF (n = 40) para ~31 dias antes a cirurgia. Após avaliação inicial durante o qual o sangue tempo, urina, antropométricos e dados médicos foram coletadas, os participantes foram randomizados para os braços do estudo com base na raça (preto vs. não-preto) e biópsia soma Gleason ( 7 vs. ≥7). O uso regular de estatinas e drogas anti-inflamatórias não-esteróides (AINEs) foi recolhido na linha de base. Como descrito anteriormente, os homens atribuídos aos braços FS foi fornecido e instruídos para consumir quantidades pré-doseado de linhaça (30 g /d); homens nos braços LF consumidos 20% de calorias provenientes de gordura; eo braço de controle foi orientado a manter a sua dieta habitual [16]. Receitas e sugestões de menu (por exemplo, misturando-o em iogurte, compota de maçã, ou grits) para a incorporação de linhaça na dieta foram fornecidos aos homens atribuídos a esses braços do estudo. amostras de acompanhamento foram coletados dentro de 48 horas antes da cirurgia (dados do questionário e amostras de sangue) ou no momento da cirurgia (fresco congelado e tecido prostático embebido em parafina).

Dietary Assessment

o NCI Diet History Questionnaire foi administrada no início do estudo e acompanhamento [18]. Os dados foram revistos por um nutricionista para a lógica e completude. Para os homens designados para os braços FS, a quantidade média de linhaça consumida diariamente (g /d) foi determinado com base em diários mantidos pelos participantes. Semelhante a metodologia pill-count, qualquer linhaça não utilizado foi devolvido e medida [19], [20]. Um grama de linhaça desde 0,057 g e 0,217 g de LA e ALA, respectivamente. Calculou-se a ingestão total de LA e ALA fornecida pela suplementação de linhaça, multiplicando o g /d média de linhaça consumida pelas quantidades de LA e ALA fornecidas por 1 g de semente de linhaça. A quantidade de LA e ALA suplementação de linhaça foi adicionado a valores de LA e ALA determinada a partir da DHQ.

amostras biológicas e Ensaios

tecido prostático utilizado para a análise de ácido gordo foi feita a partir do periférico zona da próstata após a prostatectomia e rapidamente congelados em azoto líquido e armazenado a -70 ° C até serem analisadas. ácidos gordos tecido prostático foram analisados ​​através de cromatografia gasosa em coluna capilar seguinte homogeneização do tecido e extracção em clorofórmio: metanol (02:01) [21], [22]. Os valores para PUFAs prostáticos são relatados como a percentagem dos ácidos gordos totais identificados no tecido prostático. Utilizando os procedimentos descritos anteriormente [23], imuno-histoquímica foi utilizada para determinar o índice de proliferação (Ki67 (Biocare, Walnut Creek, CA)) a partir de secções de tecido cortadas de blocos de tumor da próstata e embebidas em parafina fixadas com formalina. As lâminas foram examinadas e avaliadas por dois patologistas independentes que foram cegados para estudar atribuição braço [16].

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variantes e Genotipagem

A seleção dos SNPs foi baseado no resultados de investigações anteriores na doença cardiovascular que mostraram variação genética a ser significativamente associada com atividade deaturase delta-6, metabolismo e tecidos ALA níveis de ALA [10], [11], [12], [13], [14]. Com base na literatura atual, foram selecionados SNPs que se correlacionam com níveis de ALA em eritrócitos, plasma ou soro (rs99780, rs174537, rs174545, rs174572, rs498793, rs3834458, e rs968567), a fim de explorar as associações entre esses SNPs e prostática ALA e de próstata biomarcadores de câncer. Estes SNPS estão localizados no cromossoma 11 dentro ou perto dos

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gene cluster.

O DNA genômico do sangue total foi isolado e purificado com o kit de sangue Gentra Puregene (Qiagen, Valencia, CA). Os SNPs foram genotipados utilizando o método pyrosequencing. Resumidamente, 20 ng de ADN genómico foi amplificado com os iniciadores específicos para cada SNP. selecção Primer foi feito usando o software de design PSQ Ensaio da Qiagen. Uma reacção de PCR padrão foi feita com 5 PRIME polimerase Taq (Fisher Scientific), consistindo em KCl 500 mM, 100 mM Tris-HCl pH 8,3, 15 mM de Mg (OAc)

2, 1% de Triton X 100, 0,1 mM de cada um de PCR primer e dNTPs 0,2 mM. Os iniciadores de PCR foram realizadas utilizando uma estratégia de PCR aterragem usando diferentes temperaturas de recozimento. Todos os produtos de PCR foram verificados num gel de agarose a 1,5% para assegurar a amplificação e especificidade antes de executar as reacções pirossequenciao. As reacções pyrosequencing foram realizados como descrito pelo fabricante (Qiagen, Valencia, CA). Resumidamente, o produto de PCR biotinilado resultante foi diluída em tampão (10 mM Tris-HCl, NaCl 2 M, EDTA 1 mM, 0,1% de Tween 20) e ligada a Sepharose-estreptavidina (SA) grânulos (GE Healthcare, Piscataway, NJ) de ligação . O complexo de ADNcd-SA-esferas foi lavado em 70% de etanol, desnaturado em NaOH 0,2 N e lavado em Tris-Acetato 10 mM, pH 7,6. As esferas foram depois colocadas em tampão de têmpera (Tris 20 mM-acetato, MgAc 2 mM de

2) contendo o iniciador de sequenciação apropriado (0,3 uM final), aqueceu-se a 80 ° C durante 2 min e deixada arrefecer até 25 ° C . Pyrosequencing foi feito no PyroMark HS-96 máquina de pyrosequencing (Qiagen, Valencia, CA) de acordo com as instruções do fabricante.

Análises Estatísticas

Este julgamento e suas análises estatísticas foram fundadas por seus 2 × 2 de design; assim braços linhaça foram combinados (FS e LF + FS) e comparados com os braços suplementados não linhaça (controle + LF). Isto permitiu uma comparação de homens que consomem uma dieta rica em ALA (FS e LF + FS) versus os homens não consumir uma dieta ALA alta (controle + LF). Wilcoxon-assinado testes de classificação e teste exato de Fisher foram utilizados para determinar as diferenças entre os grupos nas características basais, PUFAs alimentares e da próstata, bem como biomarcadores de câncer de próstata. coeficientes de correlação não ajustada classificação de Spearman foram determinados para avaliar as associações entre PUFAs da próstata com PSA e Ki67. Para testar associações entre PSA ou log de Ki67 com ALA, foram utilizados modelos lineares. Em ambos os modelos, o IMC, idade, raça (preto versus não-preto), estatinas ou AINEs, e braço de linhaça foram utilizados como co-variáveis. O ALA variável foi usado como uma variável discreta e ALA foi codificado 1 ea ausência de ALA foi codificado como 0. Para testar a associação de PSA e log de Ki67 com o SNPs e as suas interacções com ALA, o genótipo de cada SNP e sua interacção com o ALA foram adicionados no modelo. Especificamente, utilizou-se o modelo dominante devido ao pequeno tamanho da amostra: o genótipo mais comum em cada locus SNP foi considerado como um (grupo de referência) grupo enquanto os outros dois genótipos foram considerados como um outro grupo. Portanto, os genótipos de cada SNP foram codificados como 0, 1, e um homozigoto para o comum, heterozigotos e homozigotos genótipos raras, respectivamente. O termo de interação do SNP genótipo e ALA no modelo de regressão foi codificado como o produto do SNP genótipo eo ALA. teste de Bonferroni foi utilizado para ajustar para o teste múltiplo. As freqüências genotípicas e de alelos de cada SNP foram estimados e Hardy-Weinberg foi testado utilizando o teste do qui-quadrado implementado no pacote genética em R (www.r-project.org/). Usando um p-valor de 0,001 como sugerido por Balding [24], todos os SNPs foram em Hardy-Weinberg.

Resultados

Esta investigação incluiu 134 homens do 149 quando que completou o original tentativas. tecido fresco congelado não estava disponível após prostatectomia para 15 participantes e níveis, portanto, prostáticas de PUFAs não poderia ser determinada e estes participantes foram excluídos da análise. Características da população de estudo resultante são apresentados na Tabela 1. Foram observadas diferenças entre os grupos na idade, distribuição racial (preto vs. não-negros), o IMC ou Gleason Sum.

A ingestão dietética de os níveis de PUFA e de PUFA em tecido prostático após a suplementação de linhaça estão apresentados na Tabela 1. Nenhum entre os grupos foram observadas diferenças de consumo alimentar de LA, AA e ómega-6 totais assim como EPA e DHA. No entanto, e como esperado, os homens no braço de linhaça consumida significativamente maior ALA total e ômega-3 e, portanto, tinham significativamente maior proporção de dietética 03:06 em comparação com os homens no braço Não linhaça (p 0,0001 para todos). No entanto, apesar das diferenças significativas na ingestão de ALA, não observamos diferenças estatisticamente significativas nos níveis de prostáticas de ALA entre os dois grupos. LA, AA, o total de ômega-6 e ômega-3 totais também foram semelhantes. Notou-se que o braço de linhaça tinham níveis significativamente mais elevados de EPA, indicando que o ALA foi convertido em EPA no tecido alvo. Também estão incluídos na Tabela 1 são soro de PSA e da próstata tumor Ki67. Observou-se que o PSA do soro tendeu a ser maior no braço de linhaça, embora esta não atingiu significância estatística. Consistente com nossas descobertas anteriores, Ki67 foi significativamente menor no braço de linhaça em comparação com aqueles que não recebem linhaça (p = 0,001).

Nós exploramos correlações entre PUFAs prostáticas e biomarcadores de câncer de próstata (Tabela 2). Nas análises não ajustadas, prostática ALA foi encontrado para ser significativamente correlacionada positivamente com tanto PSA sérico e Ki67 (ρ = 0,191, p = 0,028 e ρ = 0,0186, p = 0,037). Notavelmente, não há outros PUFAs correlacionada com taxas de proliferação de PSA e tumorais.

Com base nessas análises, exploramos ainda se prostática ALA foi independentemente associada com PSA e tumor Ki67 após o ajuste para possíveis fatores de confusão, incluindo o IMC, idade , raça, estatina uso de drogas, e do braço de linhaça (Tabela 3). No modelo linear para PSA, observamos que ALA foi positivamente associado com a PSA (p = 0,004), como foi linhaça braço (p = 0,023) e IMC (p 0,0001). No modelo linear para tumor Ki67, a associação com ALA foi atenuado, mas ainda pareceu estar associado positivamente com maior ki67 (p = 0,051) eo braço de linhaça permaneceu inversamente associado com a proliferação (p = 0,006). Nos mesmos modelos que exploraram se NSAIDs alterou a associação positiva entre prostática ALA e PSA sérico e Ki67 (Tabela S1). Nestes modelos, prostática ALA permaneceu significativamente associada com PSA sérico (p = 0,004) e manteve-se positivamente associado com Ki67 embora na fronteira com significância estatística (p = 0,058). AINEs foram significativamente inversamente associado com Ki67 (p = 0,017). Exploramos também a ingestão de LA, os níveis de tecido prostático de LA, ou AA como co-variáveis ​​neste modelo, mas estas variáveis ​​não foram significativas e não alterou as associações entre prostática ALA e PSA ou Ki67 (dados não mostrados).

por causa da próstata ALA foi positivamente associado com biomarcadores de câncer de próstata em análises anteriores, nós investigamos se SNPs mostrado recentemente para influenciar o metabolismo ALA foram independentemente associados com ALA prostática. A distribuição dos sete SNPs é mostrada na Tabela S2. Nestas análises, não observamos uma associação entre qualquer um dos SNPs testados ou outras variáveis ​​com ALA prostática.

Em análises adicionais, exploramos se SNPs, ALA prostática ou suas interações foram independentemente associados com PSA ou Ki67 (Tabela 4). Nos modelos que incluíam rs174572, rs498793, rs3834458 e rs968567, prostática ALA foi positivamente associado com a PSA (p = 0,002, p 0,001, p = 0,011 e p = 0,033, respectivamente) e a interação entre rs498793 e prostática ALA foi inversamente associado com PSA (p = 0,017). Após o ajuste para comparações múltiplas a associação significativa entre ALA e PSA manteve-se nos modelos que incluíam rs174572 e rs498793. O SNP, rs174572, foi significativa e inversamente associado com taxa de proliferação do tumor (p = 0,007). Em modelos adicionais que incluíram rs99780 e rs174545 interações significativas foram encontradas entre o SNP e ALA (p = 0,033 e p = 0,047, respectivamente). Após o ajuste para múltiplas comparações somente o modelo com rs174572 SNP permaneceu estatisticamente significativa.

Discussão

Este é o primeiro estudo a explorar o impacto de alimentar um alimento ALA-ricos sobre os níveis de ácidos graxos no tecido alvo, e sua associação definitiva com marcadores de progressão do câncer de próstata. Descobrimos que, enquanto a suplementação de linhaça resultou em níveis significativamente mais elevados de ALA na dieta, este consumo não se traduziu em níveis prostáticos mais elevados de ALA. Esta foi uma descoberta importante porque em análises adicionais, prostática ALA foi associado com taxas de proliferação de PSA e tumorais significativamente mais elevados. Embora a presença de ALA na próstata parecem ser independentes dos SNPs que investigados, bem como outras variáveis ​​incluindo LA dietético, que foram observadas relações entre SNPS relacionadas com ALA metabolismo e as interacções entre estes SNPs e ALA com ambos PSA e tumoral as taxas de proliferação. Assim, os resultados deste estudo exploratório fornecer novas evidências que sugerem que prostática metabolismo ALA pode ser associado com câncer de próstata agressivo.

metabolismo PUFA é complexo e o destino da ALA alimentar potencialmente inclui β-oxidação, armazenamento nos tecidos adiposos , incorporação de membranas celulares e /ou dessaturação e alongamento em cadeia mais longa ômega-3 PUFAs [25]. No presente estudo, não incluem medidas de bioenergética celular reflexivos da utilização de ALA como uma fonte de energia ou de armazenamento; No entanto, os nossos dados mostram claramente que o aumento da ingestão de ALA no braço de linhaça não resultou em níveis fisiológicos mais elevados de ALA no tecido prostático, mas em vez disso resultaram em níveis mais elevados de EPA prostáticos. Dado que ambos os braços do estudo tinham ingestão dietética semelhantes de EPA, nossos dados parecem sugerir que a linhaça derivados ALA foi convertido em EPA. Curiosamente, os níveis mais elevados de EPA não foram associados com taxas de PSA ou tumorais proliferações reduzidos. Estes dados estão em contraste com um estudo recente, que utilizou um desenho de estudo pré-cirúrgico similar e mostrou que uma dieta com baixo teor de gordura, suplementado com 5 g /d de EPA resultou em níveis de EPA prostáticos mais elevadas e reduzidas taxas de proliferação do tumor em um subconjunto de homens no RCT [4]. Embora nosso estudo não foi capaz de confirmar os efeitos anti-proliferativa de EPA prostática, somos capazes de confirmar que uma alta ALA dieta resulta em maior EPA no tecido alvo e não resulta em acumulação de ALA prostática.

Diversos estudos têm investigado o metabolismo PUFA no plasma, soro e eritrócitos e determinaram que SNPs associados com o metabolismo do ALA desempenham papéis importantes na determinação dos níveis teciduais de ALA. Estes SNPs localizar perto dos

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agrupamento de genes no cromossomo 11q12-11q13, diretamente adjacente a uma região genética altamente associado com o risco de vários tipos de câncer, incluindo câncer de próstata [26], [27], [28], [29 ]. A proximidade desses SNPs ao hotspot genética; a forte associação entre esses SNPs e níveis fisiológicos de ALA; ea observação de que níveis fisiológicos de ALA estão associados com câncer de próstata nos levou a explorar se a variação genética foi associada com prostática ALA e biomarcadores indicativos de doença agressiva.

No presente estudo não ingestão de PUFAs nem SNPs relacionados para PUFA metabolismo explicou a presença de ALA prostática. A discrepância nos resultados pode ser devida ao facto de que o ALA ensaiadas nas próstatas de homens com doença confirmada ao passo que os outros estudos ensaiadas e os níveis sanguíneos estavam em populações saudáveis. Esta é uma distinção importante porque estudos anteriores têm relatado que algumas, mas não todas, as linhas celulares de cancro da próstata sobre-expressar o receptor de LDL em comparação com as células da próstata normais, uma característica que também foi encontrado em um pequeno conjunto de tumores de próstata com seis de 12 tumores que sobre-expressam o receptor de LDL [30]. Achados semelhantes foram relatados no câncer de cólon [31]. Porque LDL é o veículo primário para a entrega de ALA para os tecidos periféricos, a sobre-expressão do receptor de LDL em alguns tumores prostáticos pode aumentar a transferência de ALA no tecido.

Também foi observado que quatro dos sete SNPs testados, foram significativamente relacionado à PSA ou tumorais taxas de proliferação de forma independente ou através de uma interação com prostática ALA. No entanto, nem todas estas associações permaneceram após o ajuste para comparações múltiplas prováveis ​​devido à nossa dimensão limitada da amostra. Por exemplo, observou-se associação positiva com a proliferação do tumor para as interacções entre prostática ALA e a presença do alelo menor nas rs99780 SNPs e rs174545, bem como uma relação inversa com a PSA para a interacção entre prostática ALA e a presença do menor alelo nas rs498793 SNP. Estudos anteriores estabeleceram que a presença do alelo menor em todos os SNPs testados foi associada a níveis sanguíneos elevados de ALA [7] – [11]. No presente estudo, embora não observamos que esses SNPs foram independentemente associados com ALA prostática, nós observamos que algumas delas modificou a associação entre prostática ALA e PSA ou tumor proliferação. Uma possível explicação para esta descoberta refere-se a diferenças específicas de tecido na expressão de genes de enzimas dessaturases [8], [

32]. Consistente com esta hipótese, foi relatado que os SNPs ter efeitos diferenciais sobre a expressão do gene em diferentes fontes de tecido, sugerindo que as variantes de splicing específicos de tecido desempenham um papel importante na determinação da expressão de genes [33].

O nosso estudo confirma a observações de Christensen et al. que relataram que homens com câncer de próstata tinham níveis mais elevados de ALA em comparação com os homens com hiperplasia benigna da próstata [34]. Similar aos nossos achados, Christensen e seus colegas também observaram uma correlação significativa entre prostática ALA e PSA; no entanto, eles não medir as taxas de proliferações tumorais. Alguns potenciais mecanismos que ligam maior ALA próstata com câncer de próstata mais agressivo pode ser através do aumento da ativação de vias de sinalização celular. Estudos anteriores relataram que o ALA induz a expressão do gene de MEK1 e MEKK1 que pode estimular a actividade de transcrição do receptor de androgénio [35], [36]. Além disso, a nosso conhecimento, nenhum estudo determinou a associação entre SNPs relacionados ao ALA metabolismo e delta-6 dessaturase expressão genética no tecido prostático. Com base em nossos resultados, estudos adicionais são necessários e podem elucidar as associações que observamos entre SNPs e próstata biomarcadores de câncer.

Tal como acontece com todos os estudos, o presente estudo tem pontos fortes e limitações. Uma imitação é o período de tempo relativamente curto que os indivíduos consumiram uma dieta rica em ALA e a ausência de tecido prostático fresco congelado da linha de base para avaliar alterações de PUFA no tecido alvo. Nós reconhecemos que este estudo é uma análise secundária e que o estudo original não foi projetado para testar a hipótese explorada no presente inquérito. Além disso, nós não replicar nossas descobertas exploratórias em uma população independente. Portanto, são necessários estudos futuros com amostras maiores para confirmar estes resultados. No entanto, uma força fundamental deste estudo é que os dados e amostras biológicas emanava um dos maiores ensaios pré-cirúrgicos em pacientes com câncer de próstata até à data. Além disso, o desgaste foi mínimo e adesão ao protocolo foi excelente [16]. Este estudo também é um dos poucos que tem proporcionado a ingestão dietética, bem como medidas fisiológicas diretas de PUFAs no tecido alvo e explorou suas associações com fatores genéticos e biomarcadores indicativos de curso da doença.

Em resumo, este estudo mostrou que, entre os pacientes com câncer de próstata, próstata ALA, independente da dieta, foi significativamente e positivamente associado com biomarcadores da doença agressiva, ou seja, ambas as taxas de proliferação de PSA e de tumor mais elevados. Nós também encontraram evidências de romance que a variação genética relacionada ao metabolismo ALA influencia a associação entre ALA e biomarcadores de câncer de próstata. Assim, os resultados do presente estudo exploratório sugerem uma interacção gene-nutriente, que pode ser um importante mediador do cancro da próstata agressivo, e uma que pode ser explorada para discriminar virulenta doença indolente vs. Futuros estudos são necessários para confirmar estes resultados.

Informações de Apoio

Tabela S1.

associação independente entre ALA e PSA e Log Ki67.

doi: 10.1371 /journal.pone.0053104.s001

(DOCX)

Tabela S2.

Distribuição de SNPs entre os participantes do estudo.

doi: 10.1371 /journal.pone.0053104.s002

(DOCX)

Reconhecimentos

Este material é o resultado do trabalho apoiado com recursos ea utilização de instalações no Durham VA Medical center. O Heflin Centro UAB for Genomic Ciência Core Laboratories realizados ensaios de genotipagem. Linhaça foi doado por ENRECO, Inc.