Abstract
Fundo
Recentemente, mais e mais estudos investigaram o valor de microRNA (miRNA) como um biomarcador para diagnóstico ou prognóstico em vários cancros. MiR-21 foi encontrado desregulado em quase todos os tipos de cânceres. Enquanto o papel prognóstico do miR-21 em muitos cancros tem sido estudada, os resultados não foram consistentes.
Métodos
Foi realizada uma meta-análise para investigar a correlação entre miR-21 e sobrevivência de cancros gerais calculando índices agrupados risco (HR) e intervalos de 95% de confiança (IC).
resultados
Os resultados combinados de 63 estudos publicados mostrou que a elevada miR-21 foi um preditor de pobres sobrevivência de carcinomas gerais, com o RH combinada de 1,91 (IC 95%: 1,66-2,19) para OS, 1,42 (95% CI: 1,16-1,74) para DFS e 2.2 (95% CI: 1,64-2,96) para a RFS /CSS . MiR-21 também foi um biomarcador prognóstico em pacientes que receberam terapia adjuvante, com o RH combinada de 2,4 (IC 95%: 1,18-4,9). Para OS
Conclusões
Nossos resultados mostraram que miR-21 pode actuar como um biomarcador importante no prognóstico de vários cancros. Mais estudos são necessários antes da aplicação do biomarcador útil na clínica
Citation:. Zhou X, Wang X, Huang Z, Wang J, Zhu W, Shu Y, et al. (2014) Valor Prognóstico de miR-21 em vários tipos de câncer: uma actualização Meta-Analysis. PLoS ONE 9 (7): e102413. doi: 10.1371 /journal.pone.0102413
editor: Georgina L. Segure, University of Aberdeen, Reino Unido
Recebido: 19 de fevereiro de 2014; Aceito: 17 de junho de 2014; Publicação: 14 de julho de 2014
Direitos de autor: © 2014 Zhou et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados
Financiamento:. Este trabalho foi apoiada pela National Science Foundation Natural da China (número Grant: 81171908). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito
CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes
Introdução
Devido ao envelhecimento e crescimento da população, bem como uma crescente adoção de estilo de vida relacionada ao câncer como tabagismo e dietas “ocidentais”, o câncer tem sido um grande problema de saúde pública em todo o mundo [1]. Quase um em cada quatro mortes nos Estados Unidos está relacionada com câncer em 2012 [2]. A falta de biomarcadores eficiente de diagnóstico e prognóstico é responsável pelas altas taxas de mortalidade causadas por câncer [3].
Os microRNAs (miRNAs), cerca de 22 nucleótidos de comprimento, são uma classe de RNAs altamente conservadas que regulam negativamente a expressão do gene ao nível pós-transcricional por emparelhamento de bases com a região 3 ‘não traduzida do ARNm alvo, resultando em qualquer degradação do mRNA ou a inibição de translação [4], [5]. Muitos estudos têm demonstrado que miARNs desempenham papéis importantes em processos biológicos diversos, tais como o desenvolvimento celular, diferenciação, proliferação, morte celular, angiogénese e metabolismo [6] – [9]. O sucesso da utilização miARNs como marcadores de diagnóstico ou prognóstico de perfil de expressão foi avaliado em diversos estudos.
miR-21 foi um dos miARNs relacionadas com o cancro mais frequentemente estudados e desregulado na maior parte dos cancros, agindo como oncogene [ ,,,0],10] – [14]. -Regulada miR-21 pode aumentar o crescimento de tumor, metástase e invasão e reduzir a sensibilidade à quimioterapia por seus vários objectivos [15] – [18]. Os pacientes com câncer com maior expressão de miR-21 sempre teve um resultado pior prognóstico. No entanto, alguns estudos representados resultados inconsistentes ou mesmo opostas, tal como o estudo de Valladares-Ayerbes et ai. [19]. Então, realizamos esta meta-análise para revelar o valor prognóstico do miR-21 em vários cancros.
Material e Métodos
critérios
busca Publicação e inclusão
subposição Medical (Mesh ) termos relacionados a miR-21 (por exemplo, “miR-21” ou “microRNA-21”), em combinação com palavras relacionadas com o cancro (por exemplo “cancro”, “tumor”, “carcinoma” ou “neoplasia”) e termos de prognóstico (por exemplo, “prognóstico”, “sobrevivência”, “resultado” ou “prognóstico”) foram pesquisados no PubMed, EMBASE e Web of Science para recuperar estudos elegíveis até dezembro de 2013.
Nós também examinou cuidadosamente as referências de artigos e resenhas para explorar estudos potencialmente adicionais. Estudos eram elegíveis se se verificarem as seguintes critérios: (a) estudaram pacientes com qualquer tipo de cancros; (B) a expressão de miR-21 foi medida; (C) a associação entre a expressão de miR-21 e o resultado clínico foi investigada; (D) artigos completos em Inglês. Os estudos foram excluídos com base nos seguintes critérios: (a) avaliações, letras ou estudos de laboratório; (B) Os estudos tinham dados de sobreposição ou duplicação; (C) ausência de informações-chave para análise posterior [20].
Os dados de extração
Os dados foram avaliados e extraída de forma independente a partir dos estudos elegíveis por dois investigadores (Zhou e Wang) sob as diretrizes do uma lista de verificação crítica revisão da Cochrane Centre Dutch proposto pela Meta-análise de estudos observacionais em Epidemiologia (ALCE) [21]. Os seguintes itens foram registrados: nome do autor, ano de publicação, país ou região de origem, etnia, tipo de câncer, tipo de amostra, estágio TNM, método número total de pacientes, do valor de corte, siga ups e horas de miR- 21 para a sobrevida global (oS), sobrevida livre de doença (DFS), sobrevida livre de recidiva (RFS) ou sobrevida específica do câncer (CSS) com seus intervalos de confiança de 95% (IC) e valor P. Se não estiver disponível, os dados foram extraídos pelo método de Tierney et al. [20]. Quando existiam discrepâncias entre os dois investigadores, outro investigador (Huang) foi convidado para discutir até que um consenso foi alcançado.
A análise estatística
Todas as horas com os ICs de 95% foram utilizados para calcular agrupados horas. teste Q de Cochran e Estatística Higgins I-quadrado foram utilizados para verificar a heterogeneidade dos resultados agrupados. A P 0,10 para Q-teste sugeriu heterogeneidade significativa entre os estudos, eo modelo de efeitos aleatórios (método DerSimonian-Laird) foi aplicada para calcular os RHs agrupados [22]. Caso contrário, foi utilizado o modelo de efeitos fixos (método de Mantel-Haenszel) [23]. gráfico de funil de Begg e teste de regressão linear do Egger foram conduzidos para avaliar o viés de publicação de literaturas e uma p 0,05 foi considerado significativo [24]. Apare e encher método foi aplicado para avaliar o potencial de assimetria na trama funil. As análises estatísticas foram realizadas no software STATA versão 12.0 (Stata Corporation, College Station, TX, EUA). Todos
P
valores eram de dois lados.
Resultados
características do estudo
Depois de leitura e cuidadosa seleção, um total de 63 artigos [19], foram recuperadas de acordo com os critérios de inclusão e de exclusão. 55 de 63 artigos investigou o papel prognóstico do miR-21 para OS, 17 para a DFS, 8 para RFS e 3 para CSS. Schetter et ai. [25], Hwang et al. [40] e Akagi et ai. [79] apresentaram HR separada por origem étnica diferente; Mathe et ai. [33] _ENREF_34, Liu et ai. [51], Toiyama et ai. [80], Nielsen et al. [44] e Markou et ai. [82] investigou o papel de miR-21 em diferentes tipos de amostras; Voortman et ai. [43] relataram resultados de dois centros. Assim, os dados destes estudos foram considerados separadamente na nossa análise. Como havia apenas 3 estudos para CSS, combinamos os resultados para CSS e RFS juntos como RFS /CSS. Assim, um total de 63 estudos, incluindo 6720 pacientes OS avaliação, 19 estudos, incluindo 1965 casos para DFS e 11 estudos, incluindo 1696 pacientes para RFS /CSS foram considerados nesta análise. O processo de triagem detalhada foi mostrado na Figura 1.
As principais características dos estudos elegíveis foram listadas na Tabela 1. fundo Etnia dos pacientes foram classificados como Asiático, Europeu e populações mistas. tipos de câncer de casos foram vários, entre os quais o câncer de pulmão, câncer de pâncreas e cancros gastrointestinais (GI) foram principalmente investigado. As amostras de tecido incluindo congelados ou e (FFPE) tecidos embebidos em parafina foram utilizados em 53 estudos, enquanto que 11 estudos utilizaram amostras de circulação (plasma, soro ou sangue) e um estudo de Ota et al fixado em formol. [47] aplicadas amostras de medula óssea. Quantitative PCR em tempo real (qRT-PCR) foi utilizada em estudos de 57 e a hibridização in situ (ISH) ensaio foi utilizado em outros estudos 6. O valor mais frequentemente utilizado cut-off foi a mediana, que foi aplicado em 26 estudos e os outros valores variaram entre a média para o valor mais alto trimestre.
Resultados de estudos elegíveis
os principais resultados desta meta-análise são apresentados na Tabela 2. para 63 estudos que avaliaram oS para miR-21, encontramos alta expressão de miR-21 prevendo um resultado pior com o HR combinado de CI 1,91 (95%: 1,66-2,19 ; P
heterogeneidade 0,001; Figura 2). Da mesma forma papéis preditivos de miR-21 para DFS e RFS /CSS também foram investigados com o RH combinada de 1,42 (IC 95%: 1,16-1,74; P
heterogeneidade = 0,001) e 2.2 (95% CI: 1,64-2,96; P
heterogeneidade = 0,022), respectivamente
análises de subgrupos por tipo de câncer demonstrou que elevada miR-21 produziu um sistema operacional pior em cancros gastrointestinais (HR = 1,68, 95% CI:. 1.12 -2,52; P
heterogeneidade 0,001), cancro do pulmão (HR = 1,59, 95% CI: 1,2-2,1; P
heterogeneidade 0,001), cancro da mama (HR = 2,55, 95% CI: 1,04-6,29 ; P
heterogeneidade = 0,002), o câncer de pâncreas (HR = 2,53 IC 95%: 1,82-3,51; P
heterogeneidade = 0,003) e câncer de fígado (HR = 1,93, 95% CI: 1,39-2,69; P
heterogeneidade = 0,688); um pior DFS no câncer de pulmão (HR = 2,05, 95% CI: 1,32-3,18; P
heterogeneidade = 0,839) e do cancro do pâncreas (HR = 2,87 IC 95%: 1,89-4,35; P
heterogeneidade = 0,524 ); a mais pobre RFS /CSS em cancros gastrointestinais (HR = 2,5, IC 95%: 1,1-5,71; P
heterogeneidade = 0,005), cancro do pulmão (HR = 2,25, 95% CI: 1,57-3,23; P
heterogeneidade = 0,605) e câncer de próstata (HR = 2,04, 95% CI:. 1,17-3,54; P
heterogeneidade = 0,957)
na análise de subgrupo por etnia, descobrimos que não importa os casos eram asiáticos ou caucasiana, a alta expressão de miR-21 ainda era um preditor significativo pobre para oS (Asian: HR = 2,19, 95% CI: 1,76-2,73; P
heterogeneidade 0,001; Caucasiano: HR = 1,86, 95% CI : 1,46-2,37; P
heterogeneidade 0,001), DFS (Asian: HR = 1,62, 95% CI: 1,06-2,47; P
heterogeneidade = 0,008; Caucasiano: HR = CI 1,37, 95%: 1.07- 1,76; P
heterogeneidade = 0,006) e RFS /CSS (Asian: HR = 2,17, 95% CI: 1,52-3,09; P
heterogeneidade = 0,322; Caucasiano: HR = CI 2.1, 95%: 1,34-3,27 .; P
heterogeneidade = 0,065)
Outras análises de estudos que avaliaram OS por tipo de amostra também revelou que a alta expressão de miR-21 continuaram a ser um marcador de prognóstico pior, independentemente da fonte de amostra (amostra de tecido: HR = 1,87, 95% CI: 1,61-2,16; P
heterogeneidade 0,001; amostra de circulação: HR = 2,06, 95% CI: 1,42-2,99; P
heterogeneidade = 0,008). Além disso, a alta miR-21 em FFPE (HR = 1,68, 95% CI: 1,29-2,18; P
heterogeneidade 0,001) e tecido congelado (HR = 1,99, 95% CI: 1,59-2,49; P
heterogeneidade 0,001) mostraram resultados consistentes. resultados agrupados de 8 estudos que exploraram soro miR-21 também revelou papel prognóstico negativo do aumento miR-21 (HR = 1,94, 95% CI: 1,25-3,03; P
heterogeneidade = 0,003)
Um total de sete estudos [27], [39], [40], [43], [53], [82] investigou o papel prognóstico do miR-21 nos pacientes que receberam terapia adjuvante que rendeu um HR significativamente combinada de 2,4 ( IC 95%:. 1,18-4,9; P
heterogeneidade 0,001)
o viés de publicação
plot funil de Begg e teste de regressão linear do Egger foram utilizados para avaliar o viés de publicação. No entanto, as parcelas do funil foram assimétrica e os valores de p do teste de Egger para OS, DFS e RFS /CSS foram 0,001, 0,011 e 0,003, respectivamente. Assim, uma guarnição e método de preenchimento foi realizado e RHs reunidas foram recalculados com estudos hipoteticamente não publicados para avaliar a assimetria nas parcelas de funil. Os RHs recalculados não se alterou significativamente para OS (HR = 1,61, 95% CI: 1,41-1,83; P
heterogeneidade 0,001; Figura 3) e RFS /CSS (HR = 2,01, 95% CI: 1,54-2,77; P
heterogeneidade = 0,018). Mas o papel prognóstico de alta expressão de miR-21 para DFS foi enfraquecer com uma HR recalculado de 1,11 (IC 95%: 0,9-1,38; P
heterogeneidade 0,001)
Circles:. Incluiu estudos. Diamantes:. Estudos em falta presumíveis
Discussão
miR-21, um conhecido onco-miR, é sobre-regulada na maioria dos tumores malignos. Agindo sobre vários genes alvo, tais como PTEN [87] e PDCD4 [18], o miR-21 desempenha um papel importante no processo da proliferação de células, migração, invasão, resistência a drogas [88], e assim por diante. Tem sido relatado que o miR-21 poderia regular Ras /MEK /ERK de modo a influenciar a formação de tumores. Além disso, a incidência de tumores pulmonares em ratinhos é maior superexpressão de miR-21, enquanto que na inferior miR-21 ratinhos knockout [89]. Além disso, o miR-21 tem sido proposto como um marcador para o diagnóstico de cancros em circulação [90], [91], fezes [92] e expectoração [93], em resposta a terapia predição [59] e o prognóstico dos doentes.
Nair et al. [94] sistematicamente revistos e sintetizado que miRNAs mostrou associações promissores com os resultados de vários cancros. Como a primeira meta-análise [95] de miR-21 relacionadas com os resultados de vários tipos de câncer, Fu et al. recuperados 17 estudos e encontraram maior nível de miR-21 pode estar associada a pior evolução clínica, especialmente no subgrupo de carcinoma de cabeça e pescoço de células escamosas e carcinoma digestivo. Recentemente, Wang et al. [96] analisou o valor de fazer circular o miR-21 e obteve-se uma conclusão que circula miR-21 pode actuar como um biomarcador significativamente prognóstico, mas não ser adequado para um biomarcador de diagnóstico sensível. No entanto, o número de estudos incluídos nestas análises foi relativamente pequeno e os resultados obtidos podem não ser poderoso. Em termos desta, realizamos esta meta-análise atualizada incluindo 63 artigos e demonstrou que a alta expressão de miR-21 foi um marco significativo para a previsão de resultados piores de vários tipos de câncer (HR foi de 1,91, 2,2 e 1,42 por OS, RFS /CSS e DFS, respectivamente). As análises de subgrupo revelou que a alta expressão de miR-21 poderia prever um sistema operacional pior em tumores gastrointestinais, câncer pancreático, câncer de pulmão, câncer de mama e câncer de fígado, um pior DFS em câncer de pâncreas e câncer de pulmão e RFS pobres /CSS em tumores gastrointestinais, pulmão câncer e câncer de próstata. Independentemente do fundo etnia ou fonte de amostra, nível elevado de miR-21 expressão era um marcador de prognóstico significativamente negativo para várias doenças malignas. Como foi observado viés de publicação, foi adoptada uma guarnição e encher método para calcular os RHs ajustados. Os resultados para OS e RFS /CSS não se alterou, mas os resultados para DFS foram alterados.
Recentemente, muitos estudos demonstraram que miRNAs incluindo miR-21 tinha um grande potencial como biomarcadores para vários tipos de câncer. No entanto, diversos problemas devem ser bem resolvido antes de utilizá-las como biomarcadores de diagnóstico ou prognóstico na clínica. Como é sabido, a circulação da amostra não-invasiva (de plasma /soro) ou amostra de fluido corporal pode ser obtido de forma mais conveniente do que a amostra de tecido. No entanto, estudos usando diferentes tipos de amostras pode produzir resultados diferentes [51]. Tsujiura et ai. [91] descobriu que alguns indivíduos pode até ter tendência oposta dos níveis de expressão de miRNAs no tecido tumoral e plasma. Agora, muitos estudos têm investigado o impacto clínico de miRNAs de exossomos, que eram pequenas vesículas de membrana contendo proteínas e nucleotídeos [97]. Em nosso estudo, é agradável que a alta expressão de miR-21 no tecido (FFPE /congelados de tecido) ou a circulação tanto previu resultados pobres. Assim, podemos supor que os pacientes com alta expressão de miR-21 a partir de qualquer tipo de amostra pode sofrer piores resultados clínicos. No entanto, a normalização entre os diferentes estudos não era consistente. Os controles internos utilizados para amostras de tecidos são relativamente consistentes que vão desde U6 para U44, enquanto não há consenso sobre genes de referência RNA pequenos adequados para a circulação ou fluido corporal amostra. MiR-16 foi usado como um gene de referência em alguns estudos [66], [78]. Mas a forma ideal para miRNA normalização em circulação ou a amostra de fluido corporal é provavelmente o cravada-in método de normalização [98]. Portanto, estudos futuros enfocando a normalização consistente são garantidos. Além disso, como biomarcadores, um painel de miARN pode ser mais sensível e específica do que uma única miARN [99], [100]. A combinação de miR-21 e alguns miRNAs específicos podem elevar seu poder de previsão. Finalmente, métodos para a detecção de miARN foram diversas, entre as quais RT-PCR era uma das abordagens mais amplamente utilizados. Não obstante muitas novas metodologias surgiram, tais como a abordagem de próxima geração seqüenciamento [101] ea abordagem eletroquímico [102]. Em resumo, um método adequado para a aplicação clínica deve ser menos caro, reprodutíveis, estáveis e com elevada sensibilidade e especificidade. Assim, grandes esforços devem ser feitos no futuro para aplicar miRNAs incluindo miR-21 biomarcadores como confiáveis na clínica.
Várias limitações deste estudo devem ser consideradas. Em primeiro lugar, os estudos encontrados em nosso estudo estavam em Inglês, o que pode contribuir parcialmente para o viés de publicação observado limitado. Ao realizar a guarnição e método de preenchimento, descobrimos que os resultados combinados não se alterou significativamente, exceto para DFS. Assim, a atenção deve ser dada para o papel prognóstico de miR-21 para DFS. Em segundo lugar, diferentes países, tipos de cancro, métodos e outras variáveis pode contribuir para a heterogeneidade relativamente grande no presente estudo. Em terceiro lugar, o número de estudos que investigam alguns tipos especiais de câncer era pequena. Por exemplo, havia apenas um estudo sobre mesotelioma [30]. Mais estudos sobre estes cancros são necessários no futuro.
Em conclusão, as evidências da meta-análise revelou que o alto nível de miR-21 expressão foi um preditor negativo para a sobrevivência em vários tipos de câncer, especialmente para OS e RFS /CSS. No entanto, nossos resultados devem ser considerados com cautela devido às limitações listadas acima. Para melhor compreender e utilizar miRNAs como biomarcadores na grande escala clínica, mais e investigações padrão valem condução.
Informações de Apoio
Checklist S1.
PRISMA Checklist
doi:. 10.1371 /journal.pone.0102413.s001
(DOC)