Abstract

Fundo

O valor prognóstico da HIFs em câncer colorretal foi avaliada em um grande número de estudos, mas as conclusões não foram conclusivos. Enquanto isso, as diferenças clínico-patológicas de HIF-1α e HIF-2α raramente foram comparados em estudos recentes.

Metodologia

estratégias de busca idênticos foram usados ​​para pesquisar literaturas relevantes no PubMed e Web of Science. Os significados prognósticos e diferenças clínico-patológicas de HIFs em CRC foram analisados.

principais conclusões

Um total de 23studies compreendendo 2984 pacientes com CCR preencheram os critérios de inclusão. Os resultados indicaram que HIFs overexpressed foram significativamente associados com aumento de risco de mortalidade, incluindo a sobrevida global (OS) (HR 2,06 IC 95% 1,55-2,74) e sobrevida livre de doença (HR 2,84; IC 95% 1,87-4,31). análise de subgrupo revelou que tanto overexpressed HIF-1α e HIF-2α teve correlações com pior prognóstico. Os RHs pool estavam (IC 95%: 1,55-2,6) 2.01 e (IC 95%: 1,01-4,26) 2,07. Outras análises de subgrupo em HIF-1α foi realizada por local de estudo, número de pacientes, índice de qualidade e do valor de corte. Os resultados mostraram que a superexpressão HIF-1α foi significativamente associada com a má OS, especialmente em países asiáticos (HR 2.3, IC 95%: 1,74-3,01), enquanto não estiver em países europeus ou outros. Além disso, a sobre-expressão de HIF-1α foi estreitamente relacionado com estas características clínico-patológicas, incluindo estágios Dukes ‘(ou 0,39, 95% CI: 0,17-0,89), estágios UICC (OR CI 0,42 95%: 0,3-0,59), profundidade de invasão (OR CI 0,71, 95%: 0,51-0,99), estado do linfonodo (OR 0,49, 95% CI: 0,32-0,73) e metástase (OR 0,29, 95% CI: 0,11-0,81). Enquanto superexpressão de HIF-2α só foi associada com o grau de diferenciação (OR 0,48, 95% CI: 0,29-0,81).

Conclusões

Este estudo mostrou que tanto HIF-1α e HIF- 2α superexpressão foram associados com um prognóstico desfavorável. HIF-1α superexpressão parece estar associada a um pior prognóstico nos países asiáticos. Além disso, HIF-1α e HIF-2α indicado características clínico-patológicas distintas

Citation:. Chen Z, Ele X, Xia W, Huang Q, Zhang Z, Ye J, et al. (2013) Valor prognóstico e diferenças clínico-patológicos do HIFs no câncer colorretal: Evidências de Meta-Analysis. PLoS ONE 8 (12): e80337. doi: 10.1371 /journal.pone.0080337

editor: John Souglakos, University Hospital Geral de Heraklion e Laboratório de Tumor Cell Biology, Faculdade de Medicina da Universidade de Creta, Grécia |

Recebidas: maio 29, de 2013; Aceito: 02 de outubro de 2013; Publicação: 06 de dezembro de 2013

Direitos de autor: © 2013 Chen et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Este trabalho foi apoiada pela Fundação Nacional Natural Científico da China (nO. 91019005 e 81272672), o Programa Provincial de Zhejiang para o cultivo de alto nível talentos saúde inovadores (HJ), a disciplina chave da Província de Zhejiang Serviços de Saúde e chinês Administração Medicina tradicional ( HJ). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

o câncer colorretal é a terceira neoplasia maligna mais comum em todo o mundo, e uma das principais causas de mortes relacionadas ao câncer [1]. Uma tendência de aumento na incidência deste carcinoma tem sido notado nas nações asiáticas. Apesar dos recentes avanços terapêuticos, a taxa de sobrevida de 5 anos ainda é pessimista devido à sua resistência recorrência e de drogas [2]. A evidência crescente sugere que a hipoxia desempenha um papel fundamental na progressão da doença e resistência à terapia na maior parte dos tumores sólidos, incluindo o cancro colo-rectal [3], [4]. rápido consumo de oxigênio e angiogênese tumoral aberrante e resultado do fluxo sanguíneo em um ambiente de tumor hipóxico. Devido à importância fundamental de oxigénio para o metabolismo e a sobrevivência, as células desenvolveram mecanismos de resposta intrincadas para responder à hipóxia. Os reguladores mais importantes que medeiam as respostas de transcrição primários ao stress hipóxico são factores hipóxia-indutível (HIFs). Dado que a hipoxia promove a progressão do tumor e resistência a terapia, HIFs se espera que sejam úteis biomarcadores associados com a doença progresso e prognóstico pobre na CRC. A expressão aumentada de HIFs também foi observado em uma ampla gama de tipos de células de cancro humano, e tem sido associado com prognóstico pobre em muitos casos, [5], mas o valor prognóstico da HIFs para pacientes de CRC é inconclusiva.

HIFs são heterodímeros compostos por um indutível uma subunidade (HIF-1α, HIF-2α ou HIF-3α), e uma subunidade constitutiva HIF-1β (também conhecida como receptor de hidrocarboneto de arilo translocador nuclear ou ARNT), que em conjunto formam o HIF- 1, os complexos de HIF-2 e HIF-3 transcricional, respectivamente. Dos três membros da família de HIF, HIF-1 e HIF-2 são os mais bem caracterizado. HIF-1α e HIF-2α geralmente são detectadas para medir os níveis de oxigênio do tumor porque a subunidade HIF-1β é constitutiva. HIF-1α e HIF-2α tem 48% de identidade de sequência de aminoácidos e estruturas de proteínas semelhantes, mas distintas genes alvo e os mecanismos de regulação. HIF-1α preferencialmente induz a via glicolítica, ao passo que o HIF-2α regula genes envolvidos no crescimento do tumor, do ciclo celular e a manutenção de células estaminais pluripotência [6]. Assim, HIF1α e HIF2α pode promover resultados muito divergentes, mesmo opostas, que resultam em características clínico-patológicas distintas e prognóstico. Vários modelos de tumor xenoenxerto também suportam a hipótese de que HIF1α e HIF2α desempenham papéis diferentes na progressão tumoral regulando ambos os genes alvo compartilhados e únicos [7]. No entanto, as diferenças clínico-patológicas e prognósticos do HIF1α e HIF2α em CRC raramente foram comparados em estudos recentes.

Por isso, fizemos uma meta-análise de estudos elegíveis para investigar a relação entre a expressão HIF e prognóstico de pacientes com CCR. Enquanto isso, foi realizada uma análise de subgrupo para avaliar os papéis de HIF-1α e HIF-2α em características clínico-patológicas e prognóstico da CRC.

Materiais e Métodos

Identificação e elegibilidade dos estudos relevantes

Foram pesquisados ​​literatura de PubMed, Wanfang e web of Science bancos de dados usando os termos: “HIF”, “neoplasias colorretais”, “o cancro colorectal”, “cancro do cólon” “câncer retal”, “prognóstico”, com todas as combinações possíveis . Bibliografias, artigos de revisão e outros estudos pertinentes foram pesquisados ​​manualmente para estudos adicionais elegíveis

Os critérios de inclusão para a elegibilidade de um estudo na meta-análise foram os seguintes:. (1) avaliação da expressão HIF nos tecidos CRC humanos ; (2) a avaliação das relações entre expressão HIFs com características ou prognóstico clínico-patológicas CRC; (3) artigos escritos em Inglês ou chinês; (4) informação suficiente fornecida para estimar taxa de risco (HR) sobre a sobrevida global (OS) ou sobrevida livre de doença (DFS), ou para estimar odds ratio (OR) sobre os recursos clínico-patológicas. Além disso, cartas, comentários, resumos de conferências e relatos de casos não estavam no escopo de nossa análise por causa dos dados limitados. artigos sobrepostos também foram excluídos desta meta-análise, apenas o mais recente ou o mais completo estudo foi envolvido na análise.

Extração de dados e gestão

Dois investigadores (Xin Ele e Wenjie Xia ) revisou cada estudo elegíveis de forma independente e extraíram os dados de todas as publicações que atendem aos critérios de inclusão. problemas controversos foram arbitrada pelo terceiro pesquisador (Jinhong Xu). As seguintes informações foram coletadas de cada estudo: o nome do primeiro autor, ano de publicação, país de origem, número de pacientes, o sexo dos pacientes, isoformas HIF, fonte e diluição de anticorpo, do valor de corte, características do tumor, a condição de adjuvante terapia e sobrevivência de dados.

avaliação metodológica

Newcastle-Ottawa escala de avaliação da qualidade (NOS) foi utilizado para avaliar a qualidade de cada estudo [8]. A pontuação avaliada oito itens de metodologia, categorizados em três dimensões, incluindo a selecção, comparabilidade e resultado. Um máximo de 1 pontuação foi premiado por cada item com exceção do item relacionado à comparabilidade que permitiu a atribuição de duas pontuações. Um total de 0 a 9 pontos foram, respectivamente, designados como mais baixa e mais alta qualidade, e os estudos com 6 pontos ou mais foram classificados como os de alta qualidade na escala. As partituras fornecidas por dois pesquisadores foram comparados e um valor de consenso para cada item foi alcançado.

Métodos estatísticos

Para a análise conjunta do impacto de expressão HIF no resultado de sobrevivência, o HRS e seus 95 foram usadas% CI. Se essas variáveis ​​estatísticas foram descritos na literatura, nós agrupados-lo diretamente; de outro modo, foram calculadas a partir de dados numéricos disponíveis nos artigos de acordo com os métodos descritos por Parmar [9]. Em suma, se os ensaios ofereceu os dados como valores de p teste log-rank, número de eventos totais. O número de expressão HIF aberrante e número de expressão HIF preservada foram extraídas para permitir estimativa do HR e seu IC95%. Se apenas gráficos de Kaplan-Meier foram publicados, as curvas de Kaplan-Meier foram lidos por Engauge digitador version4.1 (https://digitizer.sourceforge.net/). Time-to-evento dados das curvas de Kaplan-Meier foi extraído e HR e seu IC 95% foram calculados através SPSS16.0. odds ratio (OR) e seus ICs de 95% foram combinados para avaliar a associação entre a expressão de HIF e fatores clínico-patológicos, tais como grau de diferenciação, estágios Dukes ‘, profundidade de invasão, o status do linfonodo e metástase. Um FC observada 1 implica pior sobrevida no grupo com overexpressed /negativo expressão HIF. Um ou observados 1 implica parâmetros desfavoráveis ​​para o grupo com expressão HIF overexpressed /negativo. O impacto da overexpressed expressão /HIF negativo sobre a sobrevivência ou clínico-patológicas fatores foi considerado estatisticamente significativo se o IC 95% não se sobrepõem a 1. A heterogeneidade entre-estudo foi avaliada por Qui-teste estatístico baseado quadrado Q [10]. E a I

2 estatística para quantificar a percentagem da variação total, o que é devido à heterogeneidade entre estudo, em vez de erro de amostragem, e é medida a partir de 0% a 100% [11]. Valores mais altos indicam um maior grau de heterogeneidade. Quando os estudos foram encontrados para ser homogênea (com

P Art 0,10 para o teste Q), as RUP agrupados e estimativa de horas de cada estudo foram calculados pelo modelo de efeitos fixos (o método de Mantel-Haenszel) [12]. Caso contrário, nós escolhemos o modelo de efeitos aleatórios (o método DerSimonian e Laird) [13]. Nós avaliamos a possibilidade de viés de publicação, avaliando visualmente um lote de funil para assimetria e realizando quantitativamente teste de Egger. viés de publicação foi indicada quando o valor de p 0,05. A meta-análise foi realizada usando STATA versão 12.0 (Stata Corporation, Estação colagem, Texas, EUA). Todos os valores de P foram para um teste de dois lados e considerados estatisticamente significativos quando p . 0,05

Resultados

Descrição dos estudos

Conforme mostrado na Figura 1, 227 publicada registos foram identificados a partir de uma pesquisa das bases de dados acima, utilizando a estratégia de pesquisa tal como descrito acima. Após a exclusão dos estudos que estavam fora do âmbito da nossa revisão sistemática, um total de 23 estudos elegíveis foram incluídos na meta-análise [4], [5], [14] – [32]. Destes 23 publicações, 20 estudos avaliaram as relações entre o HIF-1 expressão com características ou prognóstico clínico-patológicas CRC, enquanto 6 estudos avaliaram a associação de HIF-2 expressão e características patológicas CRC ou prognóstico. As características clínicas destes 23 estudos incluídos foram resumidos na tabela 1. Estes estudos foram publicados 2003-2013, eo total de 2984 pacientes com CCR foram inscritos. Os tamanhos das amostras variaram de 30 a 731 pacientes (média de 130). 14 destes estudos envolveram a menos de 100 e 9 pacientes estudos incluíram mais de 100 pacientes. 6 destes estudos avaliaram pacientes da China, do Japão 5, 3 da Inglaterra, outros da América, Coreia, Finlândia, Alemanha, Austrialia, Holanda e Grécia. 19 desses estudos tem 6 pontos ou mais na avaliação metodológica, o que significava que tinham altas qualidades.

Impacto da expressão HIFs na sobrevida global e livre de doença sobrevivência de câncer colorretal

a meta-análise foi realizada em 15 estudos que avaliaram a associação de expressão HIFs com oS. O HR reunidas era (IC 95% 1,55-2,74; I

2 69,1%) 2,06 (Figura 2A). Nove estudos que avaliaram a correlação de expressão HIFs com DFS eram todas sobre HIF-1α. O HR reunidas era (IC 95% 1,87-4,31; I

2 41%) 2,84 (Figura 2B). Ele sugeriu que HIF overexpressed foi significativamente associada com o aumento do risco de mortalidade. Além disso, foi realizada análise de sensibilidade. Nós removemos um estudo de cada vez e avaliou o descanso, agrupados de RH da HIFs superexpressão no OS variou de 1,98 (95% CI: 1,5-2,61) a (IC 95%: 1,74-2,98) 2,28 (Tabela 2), e combinado HR HIFs de sobreexpressão no DFS variou de 2,34 (95% CI: 1,68-3,26) a (95% CI: 2,08-4,99) 3,22 (Tabela 3). Também foi realizada análise de subgrupo sobre a associação de expressão HIFs com o OS por isoformas HIF, os resultados mostraram que tanto a HIF-1α e HIF-2α foram associados com pior prognóstico. O HR agrupada foi de 2,01 (IC 95%: 1,55-2,6, eu

2 33,1%) e 2,07 (IC 95%: 1,01-4,26, eu

2 86,1%), respectivamente (Figura 2A). análise de subgrupo sobre a associação de diferente localização subcelular de expressão HIFs com o OS foi realizada, e os resultados mostraram que a correlação não foi alterado, não importa onde HIF localizado em (núcleo ou citoplasma). O HR agrupada foi 2,456 (IC 95%: 1,694-3,561, eu

2 49,2%) e 2.049 (95% CI: 1,519-2,764, eu

2 0%)., Respectivamente (Figura 3)

A. Horas com correspondente ICs de 95% da expressão HIFs com o OS. B. horas com correspondente ICs de 95% da expressão HIFs com DFS. HR 1 implícita pior sobrevida no grupo com aumento HIFs expressão /negativo e overexpressed HIFs foi significativamente com o pior prognóstico de pacientes com CCR

Além disso, outro subgrupo. análise em HIF-1α foi realizada por local de estudo, número de pacientes, a diluição de anticorpo, o valor de cut-off. análise de subgrupo indicaram uma relação significativa entre a superexpressão HIF-1α e OS foi exibido em países asiáticos (HR 2.3, IC 95%: 1,74-3,01, eu

2 0%). Outros fatores que compreendem número de pacientes, diluição do anticorpo e do valor de corte não alterou o sistema operacional significativa de HIF-1α superexpresso (Tabela 4).

Correlação de expressão HIFs com os parâmetros clínico

a meta-análise também foi avaliada a correlação entre a expressão de HIF-1α e as características clinicopatológicas de CRC. Como mostrado na Tabela 5, a sobre-expressão de HIF-1α foi significativamente associada com os estágios dos Duques (OR 0,39, 95% CI: 0,17-0,89), estágios UICC (OR 0,42 IC 95%: 0,3-0,59), profundidade da invasão (OR CI 0,71, 95%: 0,51-0,99), estado do linfonodo (OR 0,49, 95% CI: 0,32-0,73) e metástase (OR 0,29, 95% CI: 0,11-0,81). Além disso, não houve associação significativa entre a expressão de HIF-1α com grau de diferenciação. O OR agrupadas foi (IC 95%: 0,67-1,39) 0,97. (Figura 4).

A. RUP com correspondente ICs de 95% da expressão HIF-1α com estágios Dukes ‘. OR 1 sugeriu que os parâmetros desfavoráveis ​​para o grupo com expressão aumentada HIF-1α /negativo. Overexpressed HIF-1α foi associada com estágio de CRC Dukes avançado ‘. B. RUP com correspondente ICs de 95% da superexpressão HIF-1α com estágio UICC. OR 1 sugeriu que parâmetros desfavoráveis ​​para o grupo com aumento da expressão superexpressão HIF-1α /negativo e HIF-1α foi associada com estágio avançado de CRC. C. RUP com correspondente ICs de 95% da superexpressão HIF-1α com profundidade de invasão. D. RUP com correspondente ICs de 95% da superexpressão HIF-1α com metástase linfonodo.

Além disso, avaliou-se a correlação entre a superexpressão HIF-2α com características clinicopatológicas de CRC. O resultado mostrou que a sobre-expressão de HIF-2α foi significativamente associada com o grau de diferenciação (OR 0,48, 95% CI: 0,29-0,81). Não houve associação significativa entre a expressão de HIF-2α com os estágios dos Duques, a profundidade do estado de invasão e linfonodo. O pool ou foi de 0,91 (IC 95%: 0,20-4,17), (IC 95%: 0,04-3,80) 0,38 e 0,95 (IC 95%: 0,428-2,16)., Respectivamente (Tabela 5)

viés de publicação

o teste de Egger indicou que não havia nenhuma evidência de viés de publicação significativa depois de avaliar o gráfico de funil (Figura S1-S3) para os estudos incluídos em nossa meta-análise.

Discussão

a hipoxia tem sido reconhecida como uma característica comum de tumores sólidos e de um fator prognóstico negativo para a resposta ao tratamento e sobrevivência de pacientes com câncer. Em 1993, Höckel relataram que os pacientes de câncer do colo do útero com tumores hipóxicos (mediana pO

2 10 mmHg) tiveram uma sobrevida significativamente menor global e livre de recidiva [33]. Desde então, a hipoxia foi encontrado para indicar um fenótipo de doença altamente agressivo associado com prognóstico pobre em muitos cancros, incluindo o cérebro, mama, próstata, pâncreas, cérvix, bexiga e dos ovários [34] – [37]. HIFs são os melhores marcadores caracterizados mediação das respostas de transcrição ao estresse hipóxico e deverá ser indicadores prognósticos desfavoráveis. A hipóxia e consequentemente a activação HIF é considerado como um estímulo importante da angiogénese CRC. Liga-se ao HIF HRE na região do promotor de VEGF, conduzindo a up- regulação da transcrição de VEGF e a formação de novos vasos sanguíneos [38]. Surpreendentemente, tanto a HIF-1 e HIF-2 pode funcionar como supressores de tumor em certos tipos de cancro [39]. Foram também realizados vários estudos para avaliar o valor prognóstico da HIF para pacientes de CRC, mas as conclusões também foram inconclusivos. Por outro lado, a HIF-1 e HIF-2 têm genes-alvo distintos, mas poucos estudos compararam as diferenças clínico-patológicas e prognóstico entre HIF-1 e HIF-2.

Esta meta-análise teve como objetivo examinar a associação entre a expressão HIFs eo prognóstico de pacientes com CCR, e avaliar os papéis de HIF-1α e HIF-2α em características clínico-patológicas. Nossa análise combinou os resultados de 23 estudos compreendendo 2984 pacientes de CRC, indicando que HIF overexpressed foi significativamente associada com o aumento do risco de mortalidade, incluindo OS (2,06 IC 95% 1,55-2,74; Z = 4,95; P = 0,000) e DFS (2,84, , IC 95% 1,87-4,31; Z = 4,92; P = 0,000). Além disso, os resultados de análise de sensibilidade mostraram que a associação não foi alterada depois da remoção de qualquer estudo. análise de subgrupo revelou que ambos os HIF-1a e HIF-2α sobre-expressos foram associados com pior prognóstico no CRC. Com base nas diferentes isoformas de HIF, uma análise mais aprofundada de subgrupo foi realizada por local de estudo, número de pacientes, a diluição de anticorpo, o valor de cut-off. superexpressão HIF-1α foi significativamente associada com a má OS em países asiáticos (HR 2.3, IC 95%: 1,74-3,01, Z = 5,76, P = 0,000), enquanto não estiver em países europeus ou outros. Ele indicou que HIF-1α superexpressão parece estar associada com o progresso da doença e prognóstico desfavorável em pacientes asiáticos CRC. Outros factores não alterou o sistema operacional significativa da sobre-expresso de HIF-1α. Além disso, foram observadas correlações significativas entre a superexpressão HIF-1α com características clínico-patológicas, incluindo estágios Dukes ‘, estágios UICC, profundidade de invasão, o status do linfonodo e metástase. Os nossos resultados concordaram com estudo anterior que a expressão HIF-1α teve uma significativa correlação inversa em T1 e T2 CRC. Por outro lado, a sobre-expressão de HIF-2α foi significativamente relacionado com o grau de diferenciação. Assim, HIF-1 e HIF-2 indicam características clínico-patológicas distintas.

Nesta meta-análise, tinha lidado com a heterogeneidade altamente significativa entre os 23 estudos. Embora tenhamos usado modelos de efeitos aleatórios para analisar os dados, ele não identificou a fonte de heterogeneidade. Assim, foi realizada a análise estratificada de acordo com estudo de localização, número de pacientes, do valor de corte. Quando a análise no OS foi realizada sem levar em conta outros fatores, foi detectada heterogeneidade (I

2 69,1% P = 0,000). Enquanto quando os estudos incluídos foram classificados em três grupos de acordo com critério de avaliação (percentagem, coloração e porcentagem mais coloração), a heterogeneidade não foi detectada (I

2 0% P = 0,621, eu

2 0% P = 0,624, eu

2 0% P = 0,727). Portanto, a heterogeneidade no presente estudo poderia ser explicado por as normas de avaliação. Enquanto isso, houve algumas limitações nesta meta-análise. Em primeiro lugar, o estudo incluiu em nossa meta-análise foi restrita apenas aos artigos publicados em Inglês ou chinês, o que provavelmente fornecidos viés adicional. Em segundo lugar, o HRS calculados a partir de dados ou extraídos de curvas de sobrevivência pode ser menos confiável do que a análise direta de variância. Em terceiro lugar, o tamanho da amostra em estudos europeus não era grande o suficiente para que a diferença de HIF-1expression sobre a sobrevivência não foi significante.

Em resumo, mostramos que ambos overexpressed HIF-1α e HIF-2α foram significativamente associados com pior prognóstico no CRC. análise de subgrupo indicaram que HIF-1α superexpressão foi associada com a doença progresso e prognóstico desfavorável em pacientes asiáticos CRC. Foram observadas correlações significativas entre a superexpressão HIF-1α com os estágios dos Duques estágios UICC, profundidade de invasão, o status do linfonodo e metástase, mas não houve associação significativa entre overexpressed HIF-1α com grau de diferenciação. Enquanto sobreexpressa HIF-2α só foi associada com a diferenciação. Grande, bem desenhados estudos prospectivos são necessários para investigar o significado prognóstico preciso e diferenças clínico-patológicas de expressão HIFs.

Informações de Apoio

Figura S1. plot viés de publicação do

Egger não mostrou nenhum viés de publicação de estudos sobre overexpressed HIF-1α e sobrevida global (OS) na meta-análise: a relação entre o tamanho do efeito de estudos individuais (RH, eixo vertical) e a precisão do estimativa estudo (erro padrão, o eixo horizontal)

doi:. 10.1371 /journal.pone.0080337.s001

(TIF)

Figura S2. plot viés de publicação do

Egger não mostrou nenhum viés de publicação de estudos sobre overexpressed HIF-1α e sobrevida livre de doença (DFS) na meta-análise

doi:. 10.1371 /journal.pone.0080337.s002

(TIF )

Figura S3. plot viés de publicação do

Egger não mostrou nenhum viés de publicação de estudos sobre overexpressed HIF-2α e sobrevida global (OS) na meta-análise

doi:. 10.1371 /journal.pone.0080337.s003

(TIF)

Checklist S1.

PRISMA Checklist

doi:. 10.1371 /journal.pone.0080337.s004

(DOC)