Abstract

Fundo

A existência de células Tc17 foi recentemente demonstrado em vários tipos de doenças infecciosas e auto-imunes, mas a sua distribuição e funções no câncer de colo uterino (UCC) não foram completamente elucidados.

Métodos

A frequência de células Tc17 em amostras de sangue periférico obtidas de pacientes UCC, neoplasia intra-epitelial cervical (NIC) pacientes e controles saudáveis foi determinada por citometria de fluxo. Além disso, a prevalência de células Tc17 e suas relações com células Th17 e células T Foxp3-expressando assim como microvasos em amostras de tecido dos pacientes foram avaliados por coloração imuno-histoquímica.

Resultados

Em comparação com controlos, pacientes com UCC ou CIN tinha uma proporção mais elevada de células Tc17 em ambos sangue periférico e em tecidos cervicais, mas o nível de células em tecidos Tc17 UCC foi significativamente mais elevada do que nos tecidos CIN. Além disso, o aumento do nível de Tc17 em pacientes UCC foi associada com o estatuto de metástases em linfonodos pélvicos e aumento da densidade de microvasos. Finalmente, correlações significativas de infiltração entre as células Tc17 e células Th17 ou células T que expressam Foxp3 foram observadas nos tecidos UCC e CIN.

Conclusões

Este estudo indica que a infiltração de células Tc17 em cancros do colo do útero é associado com a progressão do cancro acompanhado pelo aumento de infiltrações de células Th17 e células T reguladoras, bem como vasculogénese tumor promovido

Citation:. Zhang Y, Hou F, Liu X, Ma D, Zhang Y, Kong B, et al . (2014) As células Tc17 em pacientes com uterina câncer cervical. PLoS ONE 9 (2): e86812. doi: 10.1371 /journal.pone.0086812

editor: Jian-Xin Gao, Xangai Jiao Tong University School of Medicine, China

Recebido: 27 Março, 2013; Aceito: 19 de dezembro de 2013; Publicação: 11 de fevereiro de 2014

Direitos de autor: © 2014 Zhang et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Este estudo foi apoiada por doações do National Science Foundation Natural da China (Nos. 81172486, 81170515 e 81072122) eo Projeto de Desenvolvimento Tecnológico Shandong (No. 2006BS03060). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

uterina do cancro do colo do útero (UCC), a segunda neoplasia maligna mais prevalente em mulheres em todo o mundo [1], é considerado um tumor imunogênico importante, como o vírus do papiloma humano (HPV) subtipos de alto risco causar carcinogênese de várias etapas a partir intra-epitelial cervical neoplasia (CIN), através de carcinoma in situ para câncer invasivo e metastático. Entretanto, as respostas do sistema imunológico do hospedeiro, especialmente a resposta imunitária celular, desempenham um papel importante no controle de ambas as infecções por HPV e formação neoplásica associada ao HPV [2], [3]. Embora a imunidade adaptativa celular é um componente importante na vigilância imunológica do tumor, os mecanismos subjacentes a imunidade tumor não é totalmente compreendido [4].

As células primárias responsáveis ​​pela resposta imune celular são um conjunto de subconjuntos T, incluindo células T auxiliares (Th), as células T citotóxicas (Tc), e células T supressoras (Ts). Um subconjunto recentemente descrito Th, CD4

+ células T com produção de IL-17 (células Th17), tem sido demonstrado que desempenham um papel importante nas condições de inflamação, autoimunidade e reacções alérgicas [5] – [7]. Em um recente estudo, observou-se que as células Th17 foram altamente enriquecido no sangue periférico de pacientes UCC humanos, e seus níveis foram positivamente correlacionados com o status de metástases linfáticas e vasoinvasion [8]. No entanto, os subconjuntos de IL-17

+ CD8

+ células T (células Tc17), recentemente encontrada em várias condições de infecção e doenças auto-imunes [9] – [12], não foram totalmente estudadas e suas características biológicas funções ainda estão faltando.

CD8

+ células T citotóxicas (células Tc) desempenham um papel crucial na resposta imune do hospedeiro a patógenos intracelulares e cancro. Devido à expressão redundante de Eomes fator T-box de transcrição e T-bet, células Tc estão fadados a desenvolver em células efetoras citolíticas que produzem IFN-γ e expressar granzima B e perforina para matar as células-alvo [13], [14] . No entanto, os estudos sobre os efeitos de células Tc17 sobre as respostas imunes são escassos. Em contraste com + células CD8 clássicos

Tc, as células Tc17 são negativos para a granzima B, bem como perforina e falta de atividade citolítica

in vitro

[9], [12], [15], ea ausência de Eomes em linfócitos infiltrantes de tumor é correlacionado com reforçada metástases em linfonodos no câncer colorretal [16]. No entanto, é interessante notar que, após a transferência adoptiva de altamente purificada, Ag-específica, a IL-17, secretoras de CD8

+ T células para hospedeiros Ag-expressam, as células Tc17 transferidos poderia converter a IFN-γ produtoras de células efectoras falta IL-17 de expressão, que pode ser acumulado e notavelmente causar alterações patológicas significativas pulmonar [12], ou a regressão de tumores grandes estabelecidos [15], [17]. Estes resultados podem ser explicados pela existência da plasticidade das células Tc17. No entanto, os efeitos exactos da naturalmente existiam células Tc17

in vivo

tal como no pulmão, na mucosa digestiva [18], e nos murganhos portadores de tumores [19] são ainda desconhecidos. células Tc17 foram recentemente detectada no carcinoma hepatocelular humano [20], mas os dados relativos à sua função biológica, bem como mecanismos reguladores ainda estão faltando. Aqui, nós teve como objetivo investigar os níveis, bem como as possíveis funções biológicas de células Tc17 na UCC, que é conhecido por ser um tipo de câncer altamente imunogênica iniciada pela infecção persistente de HPV de alto risco.

neste estudo, procurou determinar a distribuição das células Tc17 no sangue bothperipheral e tecidos cervicais de controles saudáveis, CIN e pacientes UCC. Além disso, para determinar os possíveis papéis de células Tc17, relação entre as células Tc17 e características clínicas da UCC, bem como a densidade microvascular em tecidos cervicais foram investigados. Além disso, combinado com a nossa anteriormente relatório [8], [25], também foram determinadas as correlações dos níveis de células Tc17 com células Th17 ou células T Foxp3-expressam.

Desenho e Métodos

Ética declaração

a inscrição ocorreu entre maio de 2009 e abril de 2012, em Qilu Hospital, Universidade de Shandong. Nossa pesquisa foi aprovada pelo Medical Comitê de Ética da Qilu Hospital, Universidade de Shandong. Um documento de consentimento informado foi obtido de cada participante. O consentimento informado declarado que os restos de sangue periférico do paciente e tecidos cervicais excisadas durante a cirurgia iria ser utilizado para a análise de subconjuntos T. Estas amostras foram usadas para identificar as células Tc17 na UCC e CIN e sangue periférico também foi elaborado a partir de voluntários saudáveis ​​para esta pesquisa.

doente e controle espécimes

amostras de tumor ou sangue periférico foram obtidas a partir 88 pacientes não tratados UCC (idades compreendidas entre 34-70 anos, com mediana de 44 anos) e 53 pacientes não tratados (CIN 28-60 anos, mediana 42 anos) com doença ativa patologicamente confirmado na Qilu Hospital, Universidade de Shandong. As amostras de 46 pacientes UCC que se submeteram à ressecção curativa, e 28 pacientes CIN submetidas a conização cervical foram utilizados para imuno-histoquímica. Amostras de sangue de 49 pacientes UCC e 25 pacientes CIN foram utilizados para análises de citometria de fluxo. Foram excluídos os indivíduos com doença concomitante auto-imune, infecção ativa ou crônica, doenças cardiovasculares, doenças do tecido conjuntivo ou uma história de tumores malignos. Nenhum dos doentes recebeu anteriormente imunossupressor, radioterapia ou quimioterapia. As características da população estudada são apresentados nas Tabelas 1 e 2. As amostras de sangue (n = 28; 26-67 anos, mediana 42 anos) e espécimes histológicos de cervices (n = 18; 31-60 anos, mediana 46 anos) de mulheres saudáveis ​​que foram submetidos a histerectomias para doenças uterinas benignas sem anomalias cervicais foram coletadas. Estes espécimes histológicos foram obtidos como blocos de parafina-encaixados do Departamento de Patologia da Qilu Hospital, Universidade de Shandong.

citometria de fluxo e células Tc17

Para analisar a prevalência de células Tc17,-IL-17, a produção de CD8 (+) linfócitos foram avaliados por citometria de fluxo. Em resumo, de sangue total heparinizado periférica (200 uL) com um volume igual de meio RPMI-1640 foi incubado durante 4 h a 37 ° C em 5% de CO

2 na presença de 25 ng /mL de acetato miristato de forbol ( PMA), 1 ug /ml de ionomicina e 1,7 ug /ml de monensina (todos da Alexis Biochemicals, San Diego, CA). Em seguida, as células foram incubadas com PE-Cy5-CD3 conjugado anti-humano conjugado com FITC e anticorpos monoclonais anti-CD8 humanos (eBioscience, San Diego, CA) à temperatura ambiente no escuro durante 15 minutos para corar a superfície. Após a fixação e permeabilização, de acordo com as instruções do fabricante, as células foram coradas com um anticorpo monoclonal anti-IL-17 conjugado com PE durante 15 min. controles isotípicos foram usadas para permitir a compensação correta e confirmar a especificidade do anticorpo. As células coradas foram analisadas por análise de citometria de fluxo utilizando um citómetro FACScan equipado com o software CellQuest (BD Bioscience Pharmingen).

detecção imuno-histoquímica de células Tc17 e densidade de microvasos (MVD)

secções de tecido

incluídos em parafina foram desparafinizadas e reidratadas, seguido por recuperação de antigénios microondas em EDTA (pH 9,1). Para dupla coloração imuno-histoquímica de células Tc17, as secções foram processadas com o sistema de Doublestain (kit-9999), e foram utilizados os anticorpos seguintes: anticorpo de coelho anti-IL-17 humana (1:700 v /v; Abcam, EUA) e anticorpo anti-CD8 humano de murganho (01:30 v /v; Abcam, EUA). Para análise imuno-histoquímica da densidade de microvasos, as secções foram bloqueadas com solução de bloqueio (albumina de soro) diluído em tampão fosfato salino (PBS) 3 vezes durante 5 min. Em seguida, as secções foram incubadas com anticorpo primário em uma câmara de humidade a 4 ° C durante a noite. O anticorpo monoclonal de CD34 (Abcam, EUA) foi utilizado neste estudo. Depois de lavar 3 vezes com PBS durante 5 min, foi adicionado anticorpo secundário ligado a peroxidase de polímero A de rábano (HRP) e incubadas durante 15 min a 37 ° C. As secções foram então visualizadas com diaminobenzadina (DAB) e contrastadas com hematoxilina. coloração de controlo negativo foi realizada com um controlo de isotipo e PBS em vez do anticorpo primário.

A análise estatística

Os valores foram expressos como a média ± DP. Os dados foram analisados ​​por uma ANOVA. As comparações entre os dois grupos foram avaliadas pelo

t

teste do aluno. Correlações entre as variáveis ​​foram determinadas usando análise de regressão linear. Todos os testes foram realizados utilizando o sistema SPSS 13.0.

P

. 0,05 foi considerado estatisticamente significativo

Resultados

Elevated células circulantes Tc17 em UCC não tratada e pacientes CIN

Foi analisada a expressão de IL + -17 células CD8 em

T (células Tc17) no sangue periférico por citometria de fluxo. A expressão de células típicas Tc17 em pacientes e controlos representativos foi mostrado na Fig. 1. Além disso, a percentagem de células Tc17 foi significativamente maior em pacientes UCC (0,49 ± 0,37%,

P

= 0,0076) e os pacientes CIN (0,51 ± 0,39%,

P

= 0,0149) , comparada com a de controlos saudáveis ​​(0,27 ± 0,27%) (Fig. 2A). Não houve diferença significativa entre o nível de células Tc17 em CIN e que em pacientes UCC (

P Art 0,05). Para investigar o possível papel do aumento das células Tc17, nós próxima procuraram determinar se esta inclinação Tc17 foi associado com características clínicas da doença. Notavelmente, observou-se um aumento significativo na frequência de células Tc17 em pacientes UCC com metástases em linfonodos (0,77 ± 0,43%;

P

= 0,0026), quando comparada com a de pacientes sem metástases em linfonodos (0,36 ± 0,26%) (Fig. 2b). Não foi encontrada associação entre os níveis de células Tc17 e outras características clínicas, tais como estágio clínico, profundidade de infiltração, vasoinvasion, tipo histológico do tumor, ou o tamanho do tumor primário em pacientes UCC (

P Art 0,05).

Altos quadrantes direita são os domínios de Tc17 (CD8

+ IL-17

+) células e as percentagens deles foram mostrados em cada painel.

(a) frequências Tc17 nos três grupos. Um aumento significativo de células Tc17 foram encontrados em pacientes não tratados (UCC

P

= 0,0076, n = 49) e pacientes CIN (

P

= 0,0149, n = 25) em comparação com controles saudáveis ​​(n = 28). (B) frequência Tc17 em metástases em linfonodos positivos ou negativos em pacientes UCC. Em comparação com pacientes sem metástases em linfonodos (n = 15), aumentou significativamente a frequência Tc17 (

P

= 0,0026) foi encontrado no linfonodo metástases pacientes (n = 35). O teste t de Student foi utilizado e barras representam SD, *

P Art 0,05, **

P

. 0,01

Distribuição de células Tc17 eo densidade microvascular (MVD) em amostras de tecido de UCC e CIN pacientes

Nós já descobriram que a IL-17

+ células foram enriquecidas em UCC humana, e na maioria das circulando IL-17

+ células eram CD4

+ população de células (células Th17) [8]. No entanto, em tecidos de tumor, uma abundância mais das células eram células +

T (células Tc17) CD8. Para estudar a distribuição das células Tc17 em uma escala local, foi examinada a prevalência de células Tc17 em tecidos tumorais de 46 pacientes UCC e tecidos cervicais de 28 pacientes CIN utilizando a coloração dupla imuno-histoquímica (Fig. 3). Como mostrado na Fig. 4a, o nível de células Tc17 aumentou significativamente em tecidos de pacientes UCC (142,50 ± 28,24 células /HPF) e doentes com CIN (23,42 ± 7,65 células /HPF), quando comparada com a de tecidos de controlos saudáveis ​​(5.52 ± 2.25 células /HPF ;

P

UCC = 0,0007,

P

CIN = 0,026). Uma diferença significativa também foi encontrada entre CIN e pacientes UCC (

P

= 0,0086). Mais uma vez, o nível de células Tc17 em tecidos de pacientes UCC foi positivamente correlacionada com o estado de metástases nos nódulos linfáticos, uma vez significativamente maior nível de células Tc17 foi observada em tecidos de pacientes UCC com metástases dos nódulos linfáticos (178,20 ± 35,47 células /HPF) comparativamente para que, em pacientes UCC ausência de metástases linfáticas (116,59 ± 25,57 células /HPF,

P

= 0,035) (Fig. 4b). Não houve correlação entre o nível de células Tc17 com as outras características clínicas, tais como estágio clínico, profundidade de infiltração, vasoinvasion, tamanho do tumor e tipo histológico do tumor de pacientes UCC (

P Art 0,05).

(a) imuno-histoquímica de dupla marcação para células Tc17 no grupo controle (a e D), grupo CIN (b ee) eo grupo UCC (C e F). locais representativos com baixo (200 ×, painéis superiores) e alta (400 ×, painéis inferiores) de ampliação foram mostrados. (B) células IL-produzindo-17 foram manchado de vermelho (no citoplasma) e CD8

+ células foram coradas preto (na membrana). A co-expressão de CD8 e IL-17 confirmou que uma proporção de células Tc17.

(a) Em comparação com controlos saudáveis ​​(n = 30), significativamente o aumento do número de células Tc17 foram encontrados tanto tecidos de pacientes UCC (

P

= 0,0007, n = 46) e pacientes CIN (

P

= 0,026, n = 28). diferença significativa também foi encontrada entre CIN e tecidos UCC (

P

= 0,0086). (B) Na região do tumor, os pacientes UCC com metástases em linfonodos (n = 30) foram detectados estatisticamente significativa maior Tc17 células frequência do que aqueles pacientes sem metástases em linfonodos (

P

= 0,035, n = 16). *

P Art 0,05, **

P Art 0,01, ****

P

. 0,001

A seguir , a densidade de microvasos em tecidos cervicais foi determinado por coloração imuno-histoquímica com anticorpos contra CD34 marker- angiogénico. Como mostrado na Fig. 5b, MVD foi mais frequentemente observada em UCC (38,37 ± 7,04 /HPF,

P Art 0,0001) e tecidos CIN (23,36 ± 5,34 /HPF,

P Art 0,0001) do que nos tecidos de controlo (11,81 ± 2,47 /HPF). Além disso, significativamente mais elevado nível de MVD foi encontrada no grupo UCC quando comparado ao grupo CIN (

P Art 0,0001). Uma vez que IL-17 é conhecido por ser capaz de promover a progressão de tumores através da promoção de angiogénese [21], [22], analisou-se a relação entre o nível de células Tc17 e a quantidade de microvasos. Como mostrado na Fig. 5a, os níveis de células Tc17 foram encontrados para correlacionar positivamente com a densidade microvascular nas CIN cervical e tecidos UCC (r = 0,923,

P Art 0,001 em CIN; e r = 0,938,

P

0,0001 na UCC, respectivamente)

(a) análise de regressão linear entre os níveis de células Tc17 e MVD (total:. r = 0,987,

P Art 0,0001, n = 65; controle: r = 0,814,

P Art 0,001, n = 18, CIN: r = 0,923,

P Art 0,001, n = 17; UCC: r = 0,938 ,

P Art 0,0001, n = 30). MVD de cada amostra foi representada graficamente contra células Tc17 nível da mesma pessoa. (B) coloração imuno-histoquímica Representante do MVD em tecidos cervicais de três grupos. locais representativos com baixa ampliação (100 ×, painéis superiores) e alta (400 ×, painéis inferiores) foram mostrados.

As correlações entre os níveis de células Tc17 e células Th17, bem como Foxp3-expressão T células

Uma vez que as células Tc17 são semelhantes às células Th17 no respeito da via de desenvolvimento e os possíveis efeitos [23], [24], é razoável para investigar a relação entre eles. Os dados primários e os métodos para a detecção de células Th17 nas mesmas três grupos (UCC, CIN e os grupos de controlo) foram mostrados em nossos dois artigos publicados anteriores [8], [25]. Os resultados demonstraram que os níveis de células Th17 e células Tc17 foram positivamente correlacionados no CIN e grupos UCC tanto sangue periférico (r

CIN = 0,435,

P

= 0,042; r

UCC = 0,403,

P

= 0,016) (Figura 6 a e b) e tecidos cervicais (r

CIN = 0,441,

P

= 0,039;. r

UCC = 0,693,

P

= 0,026) (Fig. 6 c e d).

(a, b) análise de regressão linear entre as frequências de celular Tc17 e células Th17 no sangue (r

CIN = 0,435,

P

= 0,042, n = 22; r

UCC = 0,403,

P

= 0,016, n = 36). (C, d) a análise de regressão linear entre os níveis de células Tc17 e Th17 células nos tecidos do colo do útero (r

CIN = 0,441,

P

= 0,039, n = 17; R

= UCC 0,693,

P

= 0,026, n = 30).

Além disso, uma vez que as células T que expressam Foxp3-são bem conhecidos por serem imuno-supressiva para as respostas de células T [25] , [26], a relação entre os níveis de Foxp3 e Tc17-expressando células T em (CIN) e UCC tecidos cervicais do paciente foram também analisados. Os dados primários e os métodos de detecção de células T que expressam Foxp3 estavam na referência 38. Como mostrado na Fig. 7, os níveis de células Tc17 e Foxp3 que expressam as células T em tecidos cervicais do paciente foram correlacionados positivamente (r = 0,841,

P

0,001).

(r = 0,713,

P Art 0,001, n = 47)

Discussão

O sistema imunológico desempenha um papel complexo na tumorigênese.. Acreditava-se anteriormente que a CD8

+ T compreendem, principalmente,

+ células T CD8, as células CT, que desempenham o papel crucial nas respostas imunitárias do hospedeiro com agentes patogénicos intracelulares e a formação do tumor por meio da expressão de IFN-γ, granzima B e perforina [13], [14]. No entanto, um subconjunto de células T CD8

+ células T com propriedades imunossupressoras têm sido descritos [27], [28]. Roberts et ai. [29] descobriram que as células CD8

+ T também poderia promover a carcinogênese cutânea usando um protocolo de duas etapas de iniciação química /promoção (DMBA e TPA). Um regime carcinogénico DMBA /TPA pode sobre-regular a expressão de TGF-β e IL-6, resultando em células Tc17 enviesando [30], [31]. Além disso, eles também descobriram que um subconjunto de indutor de tumores de IL-17

+ CD8

+ população de células pode existir neste modelo.

Tc17 células são definidos recentemente como uma IL-17 produtoras CD8

subconjunto + T, que é distinta da Tc1 e Tc2. Apesar de alguns avanços têm sido feitos na compreensão da função e diferenciação de células Tc17 em alguns tipos de doenças humanas e nos regulamentos homeostáticos [9], [10], [32], pouco se conhece sobre a função biológica e mecanismo subjacente a regulação das células Tc17 em tumores humanos. O nosso estudo mostrou que os níveis de células Tc17 e células Th17 proeminentemente aumentou em ambos os tecidos de sangue e de tumor periférico de pacientes UCC. Além disso, verificou-se que a frequência de células Tc17 foi positivamente correlacionada com a de células Th17, tanto em sangue periférico e tecidos do colo do útero em pacientes de CIN e UCC. Outro estudo demonstrou também uma abundância de células Tc17 em ratinhos portadores de tumor, semelhante à da condição inflamatória [18]. Além disso, Kuang et ai. [20] verificaram que a IL-17

+ células (incluindo células Th17 e células Tc17) acumulados em carcinomas humanos hepatocelular (CHC) e as células foram enriquecidas Tc17 na borda invasora de HCC. Assim, as células enriquecidas em pacientes Tc17 UCC pode desempenhar um papel importante no desenvolvimento deste tipo de cancro.

Foi relatado que células Tc17 e células Th17 partilhada as vias de desenvolvimento semelhantes no que diz respeito ao processo de diferenciação [10 ]. Por exemplo, TGF-β, IL-6 e IL-21 pode estimular a diferenciação de ambas Tc17 e Th17 células [10], [19], [24]. Além disso, estudos têm demonstrado que as células podem exibir Tc17 suprimida função citotóxica semelhante para a função das células Th17 em doenças auto-imunes [23], [33], a infecção [9], [23] e antitumoral imunidade [15]. Além disso, a IL-17 é uma citocina pró-inflamatória, que é produzida por ambas as células Th17 e células Tc17. IL-17 células T produtoras são as efetoras envolvidas na indução de inflamação e lesão dos tecidos auto-imune [34]. Assim, especula-se que a produção de IL-17 pode mediar as funções potenciais de células Tc17 na progressão do cancro. No entanto, a sobre-expressão ectópica forçada de IL-17 em células de tumor demonstraram efeitos divergentes no crescimento do tumor: inibidoras de tumores [35], [36] versus tumor promover [21], [37]. Notavelmente, Nam et al. [31] relatou que a IL-17 suprimiu a apoptose em vários tumor linhas celulares

in vitro

, e knockdown do receptor da IL-17 em células de câncer de mama 4T1 de rato apoptose aprimorados e diminuiu o crescimento de tumores

In vivo

. Além disso, observou-se os níveis elevados de TGF-β, IL-6, IL-17 e IL-21 em cânceres cervicais (observações não publicadas). Estas observações sugerem que UCC podem secretar ativamente grandes quantidades de TGF-βwhich pode induzir a diferenciação de-17 IL células

+ T, e este último pode, por sua vez promover o desenvolvimento e sobrevivência dos cânceres de forma IL-dependente-17 [31], embora mais estudos são ainda necessários.

recentemente, tem sido mostrado que as células tanto Th17 e Tc17 estão presentes no microambiente de tumor de vários tipos de tumores humanos e de rato [19], o que sugere que esta pode ser um fenômeno relativamente comum na tumorigênese. Além disso, nós relatado anteriormente que as células Th17 pode causar progressão maligna e baixa sobrevida em pacientes UCC [8]. Neste estudo, observamos também que a correlação positiva entre as células Tc17 e células Th17 aumentou gradualmente com a progressão da CIN a UCC. Além disso, a prevalência de células Tc17 também foi correlacionada com metástases em linfonodos de UCC. Portanto, é possível que o enriquecimento de células Tc17 promove a progressão da UCC em conjunto com células Th17.

Apesar do facto de que as células são células efectoras Tc17, não podiam matar as células-alvo, em que a forma de CD8 clássica células

+ T fazer [24]. Estudos epidemiológicos têm demonstrado que a inflamação está associada com a progressão tumoral [38]. Inflamação leva à produção de factores de crescimento, factores angiogénicos, e proteases que degradam a matriz por leucócitos, os quais desempenham um papel importante na promoção e progressão do tumor [4], [38]. Kuang et ai. [20] verificaram que as células foram predominantemente Tc17 enriquecido na borda invasor de carcinoma hepatocelular humano (HCC). Estas células Tc17 infiltrantes expressaram niveis elevados de citocinas pró-inflamatórias, os quais promovem a extensão do tumor através da reacção inflamatória. A neovascularização é outra marca importante da progressão do câncer. citocinas pró-inflamatórias, tais como IL-17 também pode promover o crescimento do tumor através da promoção da angiogénese [21], [22]. Em nosso estudo, também encontramos uma correlação positiva entre a frequência de células Tc17 e densidade microvascular, apoiando o estabelecimento pró-inflamatória de IL-produtora de 17 células. Além disso, observamos também a correlação de células Tc17 com células T que expressam Foxp3 em tecidos de cancro do colo do útero, as células T Foxp3-expressando mediar forte atividade imuno-supressor sobre as respostas das células T [39], [40]. Estes resultados indicam que as células Tc17 pode promover a progressão do tumor, mas a função exata de células Tc17 na UCC precisa de uma investigação mais aprofundada.

Em resumo, nós mostramos pela primeira vez que a frequência de células Tc17 aumentou, obviamente, CIN e pacientes UCC, e o aumento da prevalência de células Tc17 foi associado a metástases linfáticas e densidade de microvasos, indicando um papel importante para as células Tc17 na iniciação e progressão da UCC. Uma melhor compreensão do mecanismo subjacente de IL-17 regulam as respostas imunitárias anti-tumor pode levar ao desenvolvimento de nova estratégia terapêutica para pacientes UCC.