Abstract

elevados microssatélites Alterações no Selected tetranucleotídeo repete (EMAST) é uma assinatura genética encontrada em até 60% dos cancros colo (CRCs) que é causada por uma disfunção somática da proteína de reparo incompatível DNA (MMR) hMSH3. Nós mostramos anteriormente

In vitro

que o reconhecimento de 5-fluorouracil (5-FU) no prazo de DNA e citotoxicidade subsequente foi quando ambos hMutSα (hMSH2-hMSH6 heterodímero) e hMutSβ (hMSH2-hMSH3 heterodímero) complexos de MMR mais eficazes se presentes, em comparação com hMutSα hMutSβ sozinho. Testamos a resposta se os pacientes com EMAST CRCs (hMutSβ defeituoso) tinha diminuído para adjuvante 5-FU quimioterapia, em paralelo

in vitro

descobertas.

Nós analisados ​​230 pacientes com a fase II /III cânceres colorretais esporádicos para a qual tivemos de tratamento e sobrevivência de dados 5-FU. DNA de arquivo foi analisado para EMAST ( 2 de 5 marcadores mutado entre UT5037, D8S321, D9S242, D20S82, D20S85 tetranucleotídeo loci). curvas de sobrevida de Kaplan-Meier foram gerados e análise multivariada foi utilizada para determinar contribuição para o risco.

Foram identificados 102 (44%) EMAST cancros. Noventa e quatro pacientes (41%) receberam adjuvante 5-FU quimioterapia, e mediana de seguimento para todos os pacientes foi de 51 meses. Pacientes com EMAST CRCs demonstrada a sobrevivência melhorada com adjuvante 5-FU, na mesma medida como doentes com não-EMAST CRCs (P 0,05). Nós não houve diferença na sobrevida entre pacientes com a fase II /III EMAST e cânceres não EMAST (P = 0,36).

Não é melhorada sobrevivência para a fase II /III quimioterapia pacientes CRC após baseada em 5-FU adjuvante independentemente do status EMAST. A perda da contribuição de hMSH3 para 5-FU citotoxicidade pode não afetar negativamente o resultado do paciente, os pacientes cujos tumores completamente falta função MMR DNA (MSI-H) contrastando

Citation:. Hamaya Y, Guarinos C, Tseng-Rogenski SS, Iwaizumi H, Das P, Jover R, et al. (2015) Eficácia de adjuvante Terapia 5-fluorouracil, para pacientes no Estádio EMAST-positiva II /III câncer colorretal. PLoS ONE 10 (5): e0127591. doi: 10.1371 /journal.pone.0127591

Editor do Academic: Jian-Xin Gao, Xangai Jiao Tong University School of Medicine, CHINA

Recebido: 22 Janeiro, 2015; Aceito: 16 de abril de 2015; Publicado em: 21 de maio de 2015

Direitos de autor: © 2015 Hamaya et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Disponibilidade de dados: Todos os dados relevantes estão dentro do papel e seus arquivos de suporte de informação

Financiamento:. Este trabalho foi apoiado pelo Serviço de Estados Unidos de Saúde Pública (DK067287 e CA162147) ea A. Alfred Taubman Medical Research Institute da Universidade de Michigan. Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

o câncer colorretal (CRC) é uma das causas mais comuns de mortalidade relacionada ao câncer em todo o mundo [1]. Nos Estados Unidos sozinho, 50.000 pessoas morrerão de CRC durante 2014 [2]. Os pacientes que não têm distante metástase CRC são potencialmente curado através de cirurgia, e de cinco anos as taxas de sobrevivência para pacientes com a fase II e fase III CRC aproximada de 75% e 55%, respectivamente [3, 4]. Para minimizar a recidiva da terapia cirúrgica, adjuvante 5-fluorouracil (5-FU) à base de quimioterapia tornou-se padrão para alguns pacientes de alto risco com a fase II CRC e todos os pacientes com estágio III CRC, uma vez que melhora as taxas de sobrevivência em 10-20% [ ,,,0],4, 5]. 5-FU exerce várias acções metabólicas que induzem citotoxicidade em células de cancro, incluindo (a) a inibição da timidilato-sintetase (que catalisa a conversão de monofosfato deoxyuracil (dump) de desoxitimidina monofosfato (dTMP), que conduz a uma deficiência de nucleótidos de timina para a síntese de DNA e subsequente substituição de nucleótidos de uracilo e 5-fluorouracilo para a síntese de ADN, e (b) incorporação no ARN [5].

a incorporação do 5-FU no ADN é onde a reparação de emparelhamentos incorrectos do ADN (MMR) sistema reconhece , liga-se, e executa algumas das citotoxicidade de 5-FU, independente do 5-FU sobre o efeito do ARN [11/06]. os complexos de reconhecimento de ADN de MMR, e hMutSα hMutSβ, consiste de heterodímeros de proteínas MMR hMSH2-hMSH6 e hMSH2- hMSH3, respectivamente [12, 13]. hMutSα reconhece mispairs base individuais após a síntese de DNA e inserção curto /loops de deleção (I /D Loops) em sequências de DNA microssatélites repetitivas, enquanto hMutSβ reconhece maior I /D laços [12, 13]. Uma vez um mispair ou I /D loop é reconhecido, o hMutLα complexo execução (um heterodímero das proteínas MMR hMLH1 e hPMS2) se liga a hMutSα ou hMutSβ para sinalizar outras proteínas para a excisão e re-síntese do ADN afectado, ou compromete a célula morte celular programada se a reparação é fútil [12, 13]. No que se refere ao 5-FU, as células de CRC completamente deficientes em ADN são MMR 20 vezes mais resistentes a 5-FU citotóxica matando [6]. Os ensaios de ligação proteína-ADN e experiências de ressonância de plasmon de superfície demonstram que hMutSα é o principal complexo de reconhecimento de 5-FU incorporada no ADN, uma vez que tem a maior afinidade para a ligação e demonstra a maior grau de citotoxicidade [8, 9]. O hMutSβ complexo, apesar da sua função principal de ligação em laços maiores I /D, também podem ligar-se de 5-FU e o sinal de citotoxicidade, mas em menor grau do que hMutSα [9, 10]. Quando ambos hMutSα e hMutSβ estão presentes, o nível mais elevado de citotoxicidade de 5-FU é alcançada, o que indica que ambos os complexos de reconhecimento de ADN MMR sinergia para contribuir para a citotoxicidade de 5-FU, em comparação com hMutSα e hMutSβ sozinho [9, 10]. Assim, os complexos de ADN de reconhecimento MMR têm um nível hierárquico para a quimiossensibilidade de citotoxicidade de 5-FU. Ausência de ambos hMutSα e hMutSβ impede que os complexos de se ligar 5-FU no DNA, e a falta de hMutLα (hMLH1-hPMS2 heterodímero) remove o componente de execução da MMR, com ambos os cenários causando ausência completa de ADN MMR e abortar a 5-FU induziu citotoxicidade [8-10].

Estas conclusões têm implicações para o ~ 15% dos pacientes de CRC com o DNA tumores MMR com deficiência que recebem terapia de 5-FU. Nós e outros autores mostraram anteriormente que a fase II /III pacientes de CRC esporádicos cujos tumores demonstrar microssatélite instabilidade-alta (MSI-H) (isto é, são MMR deficiente) não têm melhoria na sua sobrevivência com o uso de adjuvante 5-FU terapia, enquanto que os pacientes cujos tumores reter MMR melhorar a sua sobrevivência [14-19]. Assim, em pacientes com CCR, competência do tumor para o ADN MMR é importante para uma resposta de sobrevivência de 5-FU.

alterações de microssatélites elevado em repetições tetranucleotídeo seleccionados (EMAST) é uma assinatura genética observada em até 60% de CRCs [20-24]. A presença de EMAST está fortemente associada com a inflamação intra-epitelial, avançado estágio de CRC, a sobrevivência pobre, e raça Africano americano [21, 22, 25]. EMAST CRCs mostrar expressão heterogênea nuclear de hMSH3, [20, 22] e estudos recentes mostram que o estresse oxidativo-driven citocina induz uma mudança nuclear-to-citosólica para hMSH3, removendo-o do seu local de reparo do DNA funcional, e é a provável explicação para a heterogeneidade observada nuclear [26, 27, 28]. Teoriza-se que a inflamação e estresse oxidativo gatilho hMSH3 mislocalization, causando hMutSβ função falha, e ainda preservar hMutSα função no núcleo [26]. EMAST eo mislocalization de hMSH3 é o mais comum defeito de DNA MMR no CRC humano.

Nosso objetivo foi examinar se a sobrevivência dos pacientes de CRC foi afetada pela terapia 5-FU, se eles possuíam tumores EMAST. Esta foi uma questão importante como adjuvante 5-FU a quimioterapia é a terapia base de grampo para pacientes com a fase II /III CRC, e 60% dos pacientes adquiriram disfunção hMutSβ devido à hMSH3 mislocalization.

Materiais e Métodos

As amostras dos pacientes e DNA extração

Foram analisados ​​230 pacientes com estágio II /III cânceres colorretais esporádicos da Universidade da Califórnia e Veterans Administration Medical Centers em San Diego, Califórnia (coletadas 1982-1989) [14 ] e Hospital Geral Universitário de Alicante, Alicante, Espanha (EPICOLON, coletados de 2000-2001) [15, 16]. A Universidade da Califórnia em San Diego, VA San Diego, Hospital Geral Universitário de Alicante, e da Universidade de Michigan Humano Assuntos comités aprovaram a pesquisa utilizando esses espécimes patológicos existentes. registros de pacientes /informações foram anónimos e de-identificados antes da análise de dados. Devido a isso o uso de espécimes patológicos que são de-identificados existente, os conselhos de revisão institucional dispensou a necessidade de paciente ou ao lado do consentimento parentes. Os pacientes só foram incluídos para esta coorte se material patológico estava disponível, o seu regime quimioterapêutico conhecido, e informações de sobrevivência estava disponível. Todos os pacientes foram submetidos a ressecção cirúrgica curativa. Os pacientes foram designados para tratamento baseado 5-FU ou nenhum tratamento por suas equipas de cuidados antes de nosso estudo, e tumor de status MSI foi determinada anteriormente [14-16]. Tabela A em S1 Detalhes do arquivo todos os perfis de pacientes e tumores no total. localização do tumor, idade do paciente, sexo do paciente, o estágio do tumor, o uso da quimioterapia e sobrevivência foram obtidos a partir do relatório de patologia cirúrgica, com dados de acompanhamento obtidos a partir dos registros de tumor a partir das respectivas instituições [14-16]. fixados com formalina, embebidos em parafina blocos foram obtidos para cada paciente, e cortar secções em série para a H E e coloração microdissecação. O ADN foi isolado a partir de tumor colo-rectal de cada paciente e o tecido normal adjacente. Cada área microdissecados foi identificado numa referência H E de coloração de lâminas. espécimes dissecados foi desparafinizadas em um tubo de microcentrífuga com xileno, e o ADN foi purificado com etanol e QIAmp ADN Investigador Kit (Qiagen, Valencia, CA) seguindo um protocolo publicado anterior [22].

A amplificação de ADN, determinação EMAST, e análise de fragmentos

estatuto EMAST foi determinada usando 5 marcadores polimórficos tetranucleotídeo (

UT5037

,

D9S242

,

D20S85

,

D8S321

e

D20S82

) [22]. O ADN genómico extraído a partir de tumores e tecidos normais de contrapartida foram amplificadas por PCR por iniciadores específicos para cada marcador tetranucleotídeo utilizando Platinum PCR Supermix (Invitrogen, EUA) de acordo com o protocolo do fabricante. A PCR foi efectuada utilizando 6-FAM ou HEX iniciadores marcados. As condições de amplificação foram como se segue: 95 ° C durante 15 minutos para a activação inicial pelo calor; 40 ciclos de 94 ° C durante 1 minuto, 55 ° C ° -62C durante 1 minuto, e 72 ° C durante 30 segundos; e uma extensão final a 72 ° C durante 10 minutos. fragmentos marcado por fluorescência gerados por PCR foram analisados ​​num Applied Biosystems 3730xl DNA Analyzer com o GeneMarker (SoftGenetic LLC, PA). Os produtos de PCR foram utilizados para a análise de fragmentos de ADN para identificar a mutação de frameshift no tetranucleotídeo repetições para cada locus. Quando picos aberrantes +/- múltiplos de 4 nucleótidos foram observados nos electrophoretograms de tumor quando comparada com a do não-tumoral emparelhado, o marcador foi considerado positivo para instabilidade de frameshift. Os tumores que mostram quadro de leitura em pelo menos 2 marcadores tetranucleotídeo em comparação com o tecido normal emparelhado foram classificados como tumores EMAST-positivos, enquanto que todos os outros foram classificados como tumores EMAST-negativos.

A análise estatística

As análises estatísticas foram conduzida usando SPSS (versão 20, IBM) e pelo Departamento de Bioestatística da Faculdade de Saúde Pública da Universidade de Michigan. As seguintes variáveis ​​foram avaliadas: idade, sexo, localização colônica de tumor, estágio, o uso de adjuvante 5-FU terapia, tempo de seguimento e status vital (vivo ou morto). Localização do tumor foi classificado como proximal (à direita) se o tumor foi no ou proximal para a flexão do baço, e distal (do lado esquerdo) para se distal da flexura do baço. estágio da doença foi classificado no momento da cirurgia. estado vital foi classificada como sobrevivência global. A associação estatística entre EMAST e outras variáveis ​​categóricas foi avaliada utilizando o teste exato de Fisher. As análises de sobrevivência foram realizados após os pacientes foram classificados com base no seu estado EMAST e se eles receberam adjuvante 5-FU quimioterapia como parte do seu tratamento. Para examinar as diferenças nas taxas de sobrevivência, as curvas de Kaplan-Meier foram tabulados e a função de riscos proporcionais de Cox permitiu o cálculo da relação risco risco relativo. Todos os testes estatísticos foram em frente e verso, e

P

valores. 0,05 foram considerados estatisticamente significativa

Resultados

As características dos pacientes e status EMAST

Utilizamos 230 fase II /III pacientes CRC de EPICOLON [15, 16] e dos EUA [14] fontes para que tivemos resultados de sobrevivência, adjuvante utilização 5-FU e tecido disponível para análise genética. Para todos os 230 pacientes segregados por fase, 64 de 118 (54%) em estádio III pacientes receberam adjuvante terapia 5-FU, em comparação com 30 de 112 (27%) fase II pacientes (

P

= 0.000023). Dos 230 cancros analisados ​​para EMAST, 102 (44,3%) foram EMAST-positiva, definida como 2 ou mais marcadores tetranucleotidica que mostram mutação frameshift [22]. Foram comparados os pacientes com cancros EMAST com os que tinham cancros não-EMAST, como mostrado na Tabela A em Ficheiro S1. Não foram encontradas diferenças significativas entre EMAST e os pacientes não-EMAST CRC para sexo, localização do tumor intra-e-vírgula, ou estágio. No entanto, os doentes com cancros não EMAST foram mais frequentemente tratados com 5-FU (

P Art 0,05) (Tabela A em arquivo S1). Esta observação para pacientes com cancros não-EMAST pode ser previsto para favorecer a sobrevivência melhorada em comparação com os pacientes com cancros EMAST, como este grupo de doentes possui DNA cancros MMR-proficientes. Encontramos mais tumores MSI-H entre os pacientes EMAST CRC (Tabela A em arquivo S1). Este resultado é provavelmente devido a inactivação completa de ADN MMR (hipermetilação de

hMLH1

inactivação do complexo hMutLα em tumores esporádicos MSI-H), que por si só pode provocar mutações frameshift no repetições tetranucleotídica, e /ou inactivação de secundário

hMSH3

através de mutação frameshift do seu microssatélites de codificação, como consequência da perda da função hMutLα [12].

a sobrevida global de pacientes com EMAST e não EMAST CRCs

apurado se os pacientes de CRC com EMAST (cujos cancros são presumidos função hMutSβ falta) teria um decréscimo na sobrevivência em comparação com pacientes com CCR cujos tumores reter MMR-proficiência (mantendo ambos hMutSα e função hMutSβ, bem como função hMutLα) após adjuvante 5-FU terapia.

dos 230 fase II /III pacientes CRC, 94 (40,9%) pacientes morreram durante a mediana do tempo de seguimento de 51,0 meses. Porque a nossa verdadeira comparação foi para a sobrevivência de pacientes com CCR com a perda presumida da função hMSH3 (hMutSβ) em comparação com pacientes com CCR que retêm hMutSα e função hMutSβ e hMutLα (full proficiência DNA MMR), foram analisados ​​os resultados de sobrevida na ausência dos 30 pacientes (13%) com MSI-H CRCs (todos com disfunção hMutLα). Remoção de pacientes com MSI-H CRCs também reduz problemas de confusão com o resultado, como é bem demonstrado que estes pacientes não respondem favoravelmente ao 5-FU terapia adjuvante [14-19]. Além disso, comparando os pacientes 11 MSI-H CRC que receberam adjuvante 5-FU para os 19 pacientes de CRC MSI-H que não receberam adjuvante 5-FU, não houve diferença na sobrevivência (

P

0,05 , dados não apresentados), consistente com relatos anteriores [múltiplas 14-19]. Isto deixou um total de 200 pacientes (82 EMAST e 118 não EMAST) para a análise, e as suas características são apresentadas na Tabela 1. sem a inclusão dos pacientes MSI-H CRC, a diferença na utilização de 5-FU entre EMAST e não- pacientes EMAST desapareceu.

Construímos curvas de Kaplan-Meier para comparar a sobrevivência global acumulado em pacientes tratados com e sem adjuvante 5-FU quimioterapia. Adjuvante adjuvante 5-FU melhora a sobrevida global para pacientes com a fase II /III CRC (

P

= 0,004, teste log-rank) (Fig 1A), como foi relatado anteriormente [14,19]. Em seguida, os dados segregados pelo status CRC EMAST. Como mostrado na Fig 1B, os pacientes cujos cancros demonstrado EMAST (presume-hMSH3 deficiente) tinha melhorado a sobrevivência com adjuvante terapia de 5-FU (

P

= 0,034) com a mesma extensão que os pacientes cujos cancros não demonstrou EMAST ( MMR-proficientes) (

P

= 0,043) (Fig 1C). Assim, apesar da falta de função hMSH3 dentro do cancro, há uma melhoria na sobrevida na fase II /III pacientes CRC após adjuvante 5-FU quimioterapia, independentemente do status EMAST tumor.

(

A

) sobrevida global cumulativa de todos os pacientes, sem MSI-H (

P

= 0,004, teste log-rank). (

B

) sobrevida global cumulativa de pacientes com tumores não-MSI-H EMAST-positivos (deficientes em função hMSH3) (

P

= 0,034, estratificada log-rank test). (

C

) sobrevida global acumulado de paciente com non-MSI-H, os tumores não-EMAST (competência plena em função de DNA mismatch reparação) (

P

= 0,043, estratificada log-rank test ).

os fatores de risco que afetam a sobrevida global

a nossa coorte de pacientes de CRC não apresentaram pior sobrevida se o paciente teve um câncer EMAST comparação com um câncer não-EMAST, independentemente da presença ou ausência de adjuvante tratamento com 5-FU (Fig. Um ficheiro em S1). Este contraste com relatos anteriores de pacientes com cancros EMAST mostrando estágio avançado e pior prognóstico em relação a pacientes com câncer não-EMAST [21, 25] poderia ser devido ao alto número de pacientes em estágio II examinadas em nosso estudo. Para validar esta observação em nossa coorte de pacientes, foi realizada uma análise de proporção de risco multivariada Cox para a sobrevida global (Tabela 2). A partir da análise, não observamos diferença entre a sobrevivência fase II /III pacientes de CRC com EMAST e cânceres não EMAST em nossa coorte (

P

= 0,36). Também observamos nenhuma diferença por sexo, localização do tumor intra-do cólon, ea fonte do paciente para o nosso grupo. Fizemos observar pior sobrevida significativo para pacientes com mais de 70 anos de idade (

P

= 0,015), se o paciente tinha um tumor no estágio III em comparação com um tumor fase II no momento da cirurgia (

P

= 0,0042), e se o paciente não recebeu quimioterapia adjuvante 5-FU (

P

= 0,0004).

Discussão

Nossos dados para 230 Fase II /III CRCs segregados por estatuto EMAST indica que 5-FU permanece benéfica para a sobrevida global para pacientes com EMAST CRCs. A perda de função hMutSβ devido à mislocalization de hMSH3 [26], em EMAST CRCs parece não ser prejudicial suficiente para modificar o resultado do paciente em resposta ao adjuvante terapia 5-FU. Anteriormente, têm mostrado uma forte correlação entre hMutSα e hMutSβ ligação do 5-FU no DNA e 5-FU citotoxicidade, e quando a função do DNA MMR se encontra ausente (ou com perda de hMutSα e hMutSβ ou hMutLα), não havia nenhuma ligação e nenhuma posterior execução da citotoxicidade [8-10]. Vários estudos mostram tratamento adjuvante 5-FU de pacientes com MSI-H CRCs traduzir o

in vitro

observação da falta de citotoxicidade em uma falta de melhora da sobrevida do paciente com 5-FU terapia [14-19]. O reconhecimento de 5-FU no ADN parece ser predominantemente por hMutSα, com afinidade para a ligação de 5-FU, mais que o dobro da hMutSβ em ensaios de ressonância de plasmon de superfície [8, 9], em paralelo com papel maior do hMutSα em 5-FU-induzida morte celular [9, 10]. Embora hMutSβ podem ligar-se de 5-FU no DNA [9, 10] e a sua presença pode induzir um nível moderado de citotoxicidade sozinho, bem como sinergismo com hMutSα após o tratamento com 5-FU [9], o seu estado não-funcional, tal como determinado por EMAST dentro CRCs de pacientes que ainda possuem função hMutSα parece não ser totalmente fundamental para o sucesso do 5-FU citotoxicidade na sobrevida dos pacientes.

tumores defeituosas DNA MMR pode ocorrer no contexto de CRCs esporádicos (hipermetilação do

hMLH1

), bem como na síndrome de Lynch, em que a mutação da linha germinativa de um gene de ADN a MMR é transmitido [12, 13, 29]. Os genes MMR

hMLH1

,

hPMS2

, e

hMSH2

(e

EPCAM

, que tem como alvo secundariamente inativação de

hMSH2

) quando mutados na linha germinativa e o segundo alelo inactivado somaticamente no tumor inactiva completamente a função MMR ADN, gera um cancro MSI-H [30], e os doentes não obtêm um benefício de adjuvante 5-FU terapia [17]. Não houve nenhuma descrição de pacientes com síndrome de Lynch com uma linha germinal hMSH3 mutação até à data para testar o efeito do adjuvante de tratamento de 5-FU sobre o resultado para este grupo, e, talvez, o seu resultado seria espelhar pacientes com EMAST CRCs tratados com 5-FU devido à complexo hMutSα restante e funcional. No entanto, gostaríamos de prever que pacientes com síndrome de Lynch com

hMSH6

mutações germinativas teria uma redução acentuada no resultado da sobrevida com o tratamento para CRC comparação com os doentes que mantêm função MMR nos seus tumores devido à perda de hMutSα. Desde

hMSH6

germinativas pacientes Lynch reter a função hMutSβ, gostaríamos de prever uma resposta silenciado para adjuvante 5-FU que era melhor do que os pacientes cujos tumores completamente falta função de MMR.

Não foi observada uma diferença na sobrevivência global entre os doentes com EMAST e não EMAST CRCs ao contrário de outros relatórios [25], por palco e independentemente do adjuvante terapia 5-FU. Acreditamos que esta é em grande parte devido à maior proporção de pacientes em estágio II em nosso estudo, em comparação com outros estudos, com quase 50% dos CRCs paciente como estágio II e que tenham um melhor resultado de sobrevivência [3, 5]. As datas de recolha para os nossos CRCs em nossas coortes pode ter distorcido o palco, bem como o número de pessoas que recebem a terapia 5-FU adjuvante. Nós só em comparação pacientes EMAST vs. não-EMAST CRC, e não combinam pacientes MSI-L CRC com pacientes EMAST CRC como outros estudos [25]. Na verdade, a análise de pacientes EMAST vs. não-EMAST CRC sozinho, sem pacientes MSI-L CRC, não mostram diferenças de sobrevivência [25]. Por fim, examinamos a sobrevida global em comparação com recorrência sobrevida livre [25]. Embora EMAST sido parcialmente correlacionada com a fase de TNM [21], mas, especificamente, não tem sido correlacionada com venosa, perineural, ou invasão linfático, correlaciona-se e tem uma frequência mais alta com a progressão através da progressão morfologia adenoma-para-carcinoma, e em ulcerada carcinomas [22, 31]. Também realizamos a nossa análise dos doentes com EMAST CRCs sem a influência de pacientes com MSI-H CRCs, os quais têm melhor sobrevida em comparação com pacientes com não-MSI-H CRCs [12, 13], mesmo sem o uso de 5-FU terapia.

a limitação do nosso estudo observacional é que não foram capazes de determinar a sobrevida livre de recorrência ou específica da doença devido à falta de informação completa para esta coorte combinada. No entanto, estamos confiantes em nossa comparação EMAST vs. não-EMAST para a sobrevida global como o teste de log-rank estratificado confirma nenhuma diferença no resultado controle para 5-FU estado de tratamento (Tabela B no Arquivo S1), e um comprimento alternativa de sobrevivência análise mostra semelhanças de distribuição entre EMAST e grupos não-EMAST (Fig. B no Arquivo S1).

em conclusão, fase II /III pacientes com EMAST CRCs responder tão bem aos adjuvante 5-FU quimioterapia com uma melhoria na sua sobrevida global assim como pacientes com tumores não-EMAST. Esta foi uma questão importante para examinar de que poderia ter mudado a abordagem à quimioterapia adjuvante para 60% dos pacientes com CCR. Isto está em contraste com os pacientes com MSI-H CRCs, cujos tumores apresentam ineficaz hMutSα e hMutSβ ou hMutLα complexos e que não melhoram a sua sobrevivência com adjuvante terapia de 5-FU [14-19]. A presença da função hMutSα intacta (juntamente com a função hMutLα) em EMAST CRCs parece ser suficiente para contribuir para um resultado geral melhorou para os pacientes tratados com adjuvante 5-FU.

Informações de Apoio

S1 Arquivo. As características clínicas dos pacientes com CCR segregados por estatuto EMAST, inclusive de pacientes MSI-H (Tabela A).

estratificada teste log-rank para comparar EMAST e estado 5-FU (Tabela B). Kaplan-Meier de sobrevida global acumulado em pacientes segregados por estatuto EMAST (Fig. A). parcelas de sobrevivência alternativos para EMAST e os pacientes não-EMAST

doi (Fig B.):. 10.1371 /journal.pone.0127591.s001

(PDF)