Abstract

A natureza extremamente heterogêneo de cancro do pulmão tornou-se mais evidente durante a última década. Em geral, o câncer de pulmão avançado é um tumor maligno agressivo com um prognóstico pobre. A descoberta de vários mecanismos moleculares subjacentes ao desenvolvimento, progressão e prognóstico de câncer de pulmão, no entanto, criou novas oportunidades para terapia-alvo e melhor resultado. Neste artigo, nós definimos “subtipos moleculares” de câncer de pulmão com base em aberrações genéticas acionáveis ​​específicas. Cada subtipo está associada com ensaios moleculares que definem o subtipo e as drogas que podem potencialmente tratá-lo. Esperamos que este trabalho será um guia útil para os clínicos e pesquisadores tanto, auxiliando na tomada de decisão terapêutica e agindo como uma plataforma para um estudo mais aprofundado. Nesta nova era do tratamento do câncer, o “one-size-fits-all” paradigma está sendo violentamente empurrado de lado-permitindo mais eficaz, personalizado atendimento oncológico a surgir

Citation:. Ocidental L, Vidwans SJ, Campbell PN, Shrager J, Simon GR, Bueno R, et al. (2012) A Novel classificação do câncer de pulmão em subtipos moleculares. PLoS ONE 7 (2): e31906. doi: 10.1371 /journal.pone.0031906

editor: Surinder K. Batra, University of Nebraska Medical Center, Estados Unidos da América

Recebido: 05 de outubro de 2011; Aceito: 15 de janeiro de 2012; Publicação: 21 de fevereiro de 2012

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Financiamento:.. Os autores não têm apoio ou financiamento para relatar

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Introdução

O câncer de pulmão mata mais pacientes do que qualquer outra doença maligna no mundo [1]. doença em estágio inicial podem ser tratados com intenção curativa, embora o risco de recaída é notoriamente elevada. Infelizmente, a maioria dos doentes com cancro do pulmão presentes numa fase avançada. Apesar de uma resposta inicial ao tratamento, a maioria destes pacientes em estágio final acabará por avançar na terapia padrão e morrer de sua doença [2]. Apesar da natureza complexa da biologia do câncer de pulmão, suas bases moleculares estão se tornando cada vez mais claro [3]. A descoberta de um número de tais alterações moleculares subjacentes cancro do pulmão conduziu a terapias com fármacos inibidores específicos, tais como erlotinib e gefitinib por mutações no receptor do factor de crescimento epidérmico (EGFR) orientada exclusivamente [4], [5] ou Crizotinibe para o gene . translocação resultando no oncogene EML4-ALK [6]

Temos desenvolvido anteriormente um processo formal para a classificação de um cancro – melanoma – em subtipos moleculares [7]. subtipos moleculares são definidos como aqueles tumores que contenham o mesmo conjunto de defeito molecular (principalmente genético) (S) e as suas vias associadas. A divisão de um câncer em subtipos é proposital, em que cada subtipo propôs diretrizes de tratamento que incluem ensaios específicos, terapias específicas e ensaios clínicos. Este processo produz um “modelo de doença molecular” formal que pode ser usado por médicos para orientar as decisões de tratamento, e refinada por investigadores, com base nos resultados clínicos e achados laboratoriais.

À luz da percepção crescente sobre os mecanismos moleculares subjacentes câncer pulmonar com o desenvolvimento de diagnósticos moleculares sofisticados e direcionados terapias, agora alargar a abordagem subtipagem molecular para câncer de pulmão. Similar ao modelo de doença molecular melanoma descrito anteriormente, o modelo de doença molecular cancro do pulmão é constituído por um conjunto de subtipos moleculares accionáveis ​​e directrizes de boas práticas propostas para o tratamento de cada subtipo. Em contraste com o modelo de melanoma, existe uma heterogeneidade molecular maior que existe dentro do cancro do pulmão (ver Figura 1). Terapias (aprovados ou experimentais) que devem ser considerados e os que são contra-indicados são discutidos. Um subtipo é considerada accionável se há tanto um ensaio aprovado para determinar se um determinado tumor, que se encaixa de classificação e, pelo menos, um aprovado pela FDA ou terapia direcionada experimental com eficácia potencial para esse subtipo. Um exemplo seria tumores pulmonares contendo a mutação EGFR exão 19 para os quais ensaios comerciais e agentes direcionados estão disponíveis no momento. A versão mais recente deste modelo pode ser encontrado on-line aqui: https://bigmac.collabrx.com/lc_edit/index.php/A_Lung_Cancer_Molecular_Disease_Model .

There É significativo cross-talk entre estas vias e seus efectores a jusante, o que temos classificados em 6 caminhos para a simplicidade para explicar as diferenças nas modalidades de tratamento. O adicional de 4 vias são: EGFR (azul), KRAS (amarelo), EML4-ALK (laranja) e P53 /BCL (roxo). Pensa-se que a via de Ras /RAF /MEK /MAPK, podem ser constitutivamente activada pelo oncogene fusão EML4-ALK [100]. A complexa relação entre essa via e EML4-ALK é indicado por uma linha tracejada.

A versão on-line contém informação adicional em profundidade sobre genes relevantes, testes genéticos, caminhos, drogas, metas e clínica ensaios, todos com hiperlinks e organizado em um formato Wikipedia-like. Dado o estado em evolução do conhecimento, prevemos este modelo de base terá de ser revisto regularmente com novos achados clínicos e científicos. Os tipos existentes são susceptíveis de ser dividido em novos subtipos correspondentes para respondedores e não-respondedores, e os novos tipos são susceptíveis de ser adicionado para acomodar grupos tumorais anteriormente invisíveis. Com o tempo, este modelo será definido com maior e maior especificidade e ligado a terapias cada vez mais eficazes.

Resultados

As tabelas 1 e 2 resumem os subtipos de câncer de pulmão, mais ou menos em ordem de importância a associada oncogene /supressor de tumor, a prevalência e potencial para intervenção terapêutica. Os oncogenes que definem os subtipos na Tabela 1 Atualmente alto “força de evidência ‘(SOE) e capaz de servir como o oncogene dominante e ponto putativa de intervenção para a terapia, enquanto que os oncogenes e genes supressores de tumor que definem subtipos na Tabela 2 são baixo SOE médio ou e “no horizonte” para estratégias de tratamento do cancro do pulmão. A Figura 1 mostra as principais vias de sinalização envolvidos no cancro do pulmão. É nossa esperança que o atual modelo serve para concentrar a investigação translacional sobre questões que podem afetar diretamente o atendimento ao paciente, e que a atividade resultante levará a alterações no modelo.

O subtipo 1

o subtipo 1 portos aberrações no gene EGFR /via -. um conjunto de mutações segmentáveis ​​com inibidores disponíveis comercialmente, bem como agentes mais recentes no horizonte

o subtipo 1.1 visão geral

SUBTYPE 1,1 é caracterizada por mutações no gene de EGFR que tornam estes tumores que responde aos inibidores de EGFR. EGFR codifica um receptor transmembranar que é um membro da família ErbB de tirosina-quinases. O EGFR é uma proteína da superfície celular que se liga ao factor de crescimento epidérmico e outros ligandos do factor de crescimento para se tornar activada [3]. Após a activação, a actividade da tirosina-cinase EGFR estimula a activação de vias de jusante, incluindo Ras /MAPK e AKT /PI3K que conduzem à síntese de DNA e proliferação celular [8], [9], [10], [11].

EGFR tem sido mostrado para ser desreguladas através de vários mecanismos, incluindo NSCLC em sobre-expressão, amplificação ou mutação [12]. orientações NCCN recomendam testes EGFR para as seguintes histologia na recorrência de cancro ou metástases: adenocarcinoma (AC) e câncer de pulmão de células grandes (LC) [13]. alterações EGFR ocorrer em ~ 10% dos ocidental e ~ 50% dos pacientes asiáticos com adenocarcinoma pulmonar, histologia, que compreende 44% dos casos NSCLC [14]. Maior frequência de mutação EGFR ocorre em não-fumantes, mulheres, e os tumores não-mucinoso. Dados de vários estudos clínicos indicou que pacientes com mutações EGFR têm melhorado a sobrevivência livre de progressão quando tratados com inibidores do EGFR em comparação com pacientes com as mesmas mutações que receberam padrão de atendimento, os regimes de quimioterapia citotóxica [5], [15], [16 ]. A pontuação SOE para determinar o estado de mutação do EGFR em pacientes com CA ou histologia LC é, portanto, “alto”

Este subtipo inclui três classes de mutações: mutações classe I – exão 19 supressões em-frame (44% de todos. mutações de EGFR), Classe II – alterações de um único aminoácido (L858R 41%, G719 4%, outras mutações missense 6%), Classe III – exão 20 em-quadro a duplicação /inserções (5%). Oitenta e cinco por cento de todos os EGFR mutações de activação são de Classe I ou L858R [17]. EGFR mutações são relativamente raros ( 3,6%) em carcinoma de células escamosas e teste EGFR não é rotineiramente recomendado por diretrizes NCCN [13], [18]

abordagem terapêutica potencial para o subtipo 1.1

inibidores do EGFR.

NSCLC deve ser testado no momento do diagnóstico de mutações EGFR como aqueles que apresentam tais mutações beneficiar de inibidores de EGFR (por exemplo, erlotinib ou gefitinib) na configuração de primeira linha, como recomendado pelo orientações NCCN [13]. inibidores do EGFR estão desempenhando um papel cada vez mais importante no tratamento de CPNPC em determinados grupos de pacientes com EGFR aberrante funcionando e também são usados ​​no tratamento de segunda e terceira linha [4].

Terapias de Combinação.

Alguns ensaios adicionais para recorrente ou NSCLC avançado estão em andamento. Estes ensaios irão testar a eficácia de inibidores de EGFR de segunda geração ou aprovados inibidores de EGFR (por exemplo, erlotinib) em combinação com outros fármacos inibidores, tais como inibidores de MET /VEGFR2

Subtipo 1.2 -. Descrições

subtipo 1.2 é definido como NSCLC que abriga uma mutação T790M no exão 20 do gene de EGFR. mutações T790M emergem em resposta ao tratamento com TKI EGFR. As contas de mutação T790M para aproximadamente 50% dos casos em que adquiriram resistência ao erlotinib ou gefitinib ocorre [19], [20], [21]. Uma pequena percentagem de doentes pode levar a mutação antes do tratamento EGFR TKI. Dados de ensaios clínicos indicaram a presença de uma mutação T790M em EGFR é preditiva de resistência a inibidores de EGFR [22]. A pontuação SOE para testar doentes com adenocarcinoma do EGFR mutante que desenvolveram resistência TKI de EGFR é, portanto, “alta”.

EGFR TKI (tais como gefitinib ou erlotinib) são inibidores selectivos do domínio de cinase do EGFR, que funcionam através da competição com ATP para a ligação no local de ligação ATP, impedindo assim autofosforilação e ativação. A mutação T790M afecta o resíduo gatekeeper no domínio quinase catalítico e confere resistência ao fármaco aumentando a afinidade de EGFR para o ATP -. Reduzindo, assim, a potência dos inibidores de cinase ATP-competitivos [23]

Curiosamente, o desenvolvimento de um T790M mutação pode, na verdade, uma sobrevida relativamente melhorada, como tumores que adquirem que parecem ser menos agressivos do que os tumores com resistência EGFR TKI devido a outros mecanismos [21]. Outras aberrações que podem dar origem à resistência EGFR TKI incluem mutações PIK3CA, EMT ou amplificação Met, ou a conversão em pequena histologia do câncer de pulmão de células [3], [24]. Assim, para os pacientes que progridem no EGFR TKI com a resposta inicial e mutação conhecida, seria benéfico para realizar uma biópsia de repetição.

abordagem terapêutica potencial para o subtipo 1,2

Várias modalidades de tratamento para lidar com drogas resistência devido à mutação EGFR T790M estão actualmente a ser explorado.

segunda geração EGFR inibidores.

a primeira estratégia emprega segunda de TKI geração, como afatinib (BIBW2992), que inibe irreversivelmente o receptor do factor de crescimento epidérmico humano 2 (HER2) e cinases de EGFR. dados pré-clínicos demonstraram que afatinib é um potente inibidor irreversível de receptores /ErbB1 EGFR /HER1 incluindo a variante T790M [25].

inibidores de MET.

Embora as mutações secundárias de EGFR são responsáveis ​​pela maioria dos casos de resistência adquirida TKI de EGFR, a activação de outras vias pode também conduzir à resistência. Por exemplo, a amplificação de c-met tem sido observada em aproximadamente 5% -20% dos pacientes com resistência adquirida a inibidores de EGFR. Uma segunda estratégia terapêutica acrescenta, assim, várias drogas ou anticorpos capazes de inibir c-MET (por exemplo crizotinib, foretinib, ARQ 197, MetMAb) para primeiro- (erlotinib) ou segunda (PF-00299804) geração de EGFR-TKI [26], [ ,,,0],27], [28]. c-Met é um proto-oncogene que codifica uma proteína conhecida como receptor do factor de crescimento de hepatócitos (HGFR) que possui actividade de tirosina-quinase. Pesquisas recentes indicaram uma relação de reciprocidade e complementaridade entre T790M e amplificação MET. inibição simultânea de ambos podem melhorar os resultados dos pacientes [29]. Há também dados que sustentem que um anticorpo contra c-MET (MetMAb) é benéfica para pacientes com expressando alta c-MET, em combinação com erlotinib [30].

inibidores da Hsp90.

A terceira abordagem envolve a inibição da chaperona molecular Hsp90 com inibidores de Hsp90 tal como AUY922, e possivelmente ganetespib (STA9090). As consequências moleculares e celulares de inibição de Hsp90 não está bem definida, mas alguns cancros aumentar os níveis de Hsp90 activo, utilizando para processar Hsp90 mutante ou proteínas misexpressed [31], [32]. inibidores de Hsp90 pode, assim, bloquear múltiplas vias de sinalização que estão funcionando de forma aberrante em células de câncer [33].

Terapias de Combinação.

Alguns ensaios adicionais para recorrente ou NSCLC avançado estão em andamento. Estes ensaios irá testar a eficácia de várias terapias de combinação incluindo inibidores de EGFR, inibidores de cinase da tirosina geração segunda, a MET inibidor duplo /VEGFR2, um inibidor de Chk1 e muito mais.

O subtipo 1,3 Overview

SUBTYPE 1.3 tumores são definidos com base em uma assinatura proteomic chamado VeriStrat, que fornece provavelmente a capacidade de resposta a terapias inibidores de EGFR, tais como erlotinib na ausência de mutações de EGFR.

VeriStrat utiliza espectrometria de massa para avaliar os níveis de ligando de EGFR de tumor e prever a resposta do doente e os resultados de sobrevivência para erlotinib e outros inibidores de EGFR a partir de amostras de soro [34], [35], [36].

VeriStrat profiling é uma ferramenta de diagnóstico de análise do soro aprovado para pacientes com NSCLC que testaram negativo para a mutação EGFR desde alguns pacientes com status de tipo selvagem EGFR podem ainda beneficiar de regimes de tratamento erlotinib. Vários estudos recentes têm indicado que a classificação VeriStrat tem poder significativo para prever a resposta e sobrevivência aos inibidores de EGFR para vários tipos de câncer [34], [35], [36]. A pontuação SOE para classificação VeriStrat para pacientes com status de EGFR do tipo selvagem é “elevado”. Um estudo descobriu que 73% dos pacientes EGFR em peso NSCLC erlotinib previamente administrada tinha um status “VeriStrat bom”. Os “bons” VeriStrat pacientes tinham a sobrevivência aumentada após o tratamento erlotinib em comparação com o grupo “VeriStrat pobre” [34]. Isto é pensado para ser baseada em dependência tumor na via EGFR [36].

abordagem terapêutica potencial para o subtipo 1,3

inibidores do EGFR.

Os pacientes com uma “boa VeriStrat “Estado estão previstos para responder bem a inibidores do EGFR e deve prosseguir terapia de segunda e terceira linha para NSCLC EGFR positiva, conforme descrito por várias organizações de renome, incluindo ASCO eo NCCN [13], [37]. inibidores do EGFR estão desempenhando um papel cada vez mais importante no tratamento de CPNPC em determinados grupos de pacientes com aberrante funcionando EGFR [3].

inibidores de Segunda Geração de EGFR.

Como observado anteriormente, a dupla EGFR e Her2 BIBW inibidor de 2992 está actualmente a ser testado em uma fase 2 e 3 ensaio clínico para explorar a eficácia em pacientes com adenocarcinoma de pulmão abrigar wildtype EGFR [38].

O subtipo 2

subtipo 2.1 é caracterizada por mutações no gene K-ras. K-ras pertence a uma família de GTPases pequenas que regulam o comportamento celular em resposta a estímulos extracelulares. Ras-regulados de sinal de controlo de processos de vias tais como a integridade do citoesqueleto de actina, a proliferação, diferenciação, adesão celular, apoptose, e a migração de células através da MAPK e AKT vias /PI3K [8], [39].

Ras tem muitos isoformas dos quais K-ras e N-ras e os mais relevantes para câncer humano e são estimados a ser mutado em 20-30% de todos os cânceres [40]. Embora estas isoformas são funcionalmente semelhantes, que parecem desempenhar papéis exclusivos em cancros particulares [41]. Por exemplo, as aberrações H-ras são frequentemente observada no cancro da bexiga [42], e N-ras mutante está em aproximadamente 20% dos melanomas [43], [44]. mutações K-ras são observados principalmente em adenocarcinomas do pulmão, do cólon ou do pâncreas [45].

Subtipo 2,1 visão geral

2,1 Subtipo é o único subtipo nesta categoria e é caracterizada por mutações em K-ras. proteínas K-ras possuem actividade intrínseca de GTPase. As mutações pontuais nos codões 12, 13 ou 60 no oncogene K-ras levam à ativação constitutiva da proteína K-ras através de mudanças no domínio de ligação ao GTP que impede a conversão de GTP para o PIB [3], [46]. Em geral, as mutações K-ras foram relatados em 15% a 20% de todos os doentes com NSCLC. Aproximadamente 30% -50% dos adenocarcinomas são referidos como tendo mutações K-ras, com mutações no codão 12 mais detectada [3], [14]. mutações K-ras são vistos quase que exclusivamente em fumantes com um estudo relatando que 43% dos fumantes que desenvolveram NSCLC tinha uma mutação K-ras em comparação com 0% dos não-fumantes ao longo da vida com NSCLC [47]. carcinomas de células escamosas não são relatados para expor mutações K-ras [48].

abordagem terapêutica potencial para o subtipo 2.1

Uma meta-análise que incluiu 28 estudos de NSCLC referem piores resultados para os pacientes com mutações de K-ras, particularmente aqueles com adenocarcinoma histologia [46]. mutações K-ras em NSCLC está associada à diminuição da resposta ao EGFR TKI. No entanto, K-ras e mutações de EGFR são quase sempre mutuamente exclusivos e a falta de resposta a TKI EGFR é muito provavelmente devido à ausência de uma mutação do EGFR, em oposição à existência de uma mutação K-ras [29]. A pontuação SOE para pacientes testes de adenocarcinoma de mutações K-ras é “elevado”.

MEK e inibidores de mTOR.

Apesar do amplo impacto de mutações Ras sobre o cancro, Ras não foi alvejado com sucesso terapeuticamente em NSCLC. No entanto, várias abordagens estão sendo testadas em ensaios clínicos. O primeiro envolve simultaneamente a segmentação de MAPK a jusante AKT e vias /PI3K [8], [10]. inibidores da quinase (como MEK ou inibidores de mTOR) que têm como alvo cinases nas vias a jusante da Ras pode, assim, ser eficaz contra K-ras células mutantes [49].

inibidores de HSP90.

A segunda abordagem envolve a inibição da chaperona molecular Hsp90. Como observado anteriormente, os inibidores de HSP90 podem bloquear várias vias de sinalização que estão funcionando de forma aberrante em células de câncer [33].

terapia REOLYSIN.

REOLYSIN é uma formulação proprietária de reovírus humano em desenvolvimento pela Oncolytics Biotech Inc. para vários tipos de câncer. REOLYSIN (reovírus de serótipo 3 – A estirpe Dearing) é um vírus oncolítico que ocorre naturalmente que preferencialmente lisa as células cancerosas, especificamente aquelas que foram regulados positivamente a sinalização RAS. A lise preferencial de células activadas Ras ea natureza não patogênica do reovírus [50] fazem REOLYSIN uma opção terapêutica atraente para o subtipo 2.1 K-ras pacientes mutantes. REOLYSIN está em fase 2 ensaios clínicos para NSCLC e fase 1 e 2 ensaios clínicos para vários outros tipos de câncer, incluindo melanoma, cancro colorectal, osteosarcoma, e muito mais.

O subtipo 3

O oncogene EML4-ALK é uma aberração relativamente recém-descoberto em NSCLC com vários agentes direcionados em desenvolvimento ativo, incluindo crizotinib que foi recentemente aprovado pela FDA para este subtipo [6], [51].

O subtipo 3.1 Visão geral

subtipo 3.1 é o único subtipo nesta categoria e abriga o oncogene fusão EML4-ALK, uma fusão entre echinoderm microtubule-associated protein-4 como (EML4) e linfoma anaplásico quinase (ALK) [6]. A fusão gera uma quinase transformadora tirosina, com até nove diferentes variantes identificadas [52]. Várias isoformas de desempenhar um papel no cancro do pulmão [53], [54]. EML4-alq representa um novo alvo molecular em um pequeno subconjunto dos CPNPC. Pacientes com tumores mutantes EML4-ALK são caracteristicamente mais jovem, do sexo feminino, e nunca fumantes leves [6], [55], [56]. O gene de fusão foi observada predominantemente em adenocarcinomas (4-7%) e é mutuamente exclusiva com mutações no EGFR, K-ras e genes ERBB2 [6], [56]. Curiosamente, fusões ALK também foram descritos em linfomas anaplásico e em cerca de 50% dos tumores miofibroblásticas inflamatórias (imts) com EML4 [3], [57]. A pontuação SOE para pacientes testes de adenocarcinoma para a translocação EML4-ALK é “elevado”.

abordagem terapêutica potencial para o subtipo 3.1

ALK inibidores.

EML4-ALK NSCLC representa um único subconjunto de doentes com NSCLC para os quais os inibidores ALK apresentam um elevado potencial como uma estratégia terapêutica muito eficaz [6]. Os pacientes que abrigam a fusão EML4-ALK não beneficiam de EGFR TKI e deve ser direcionado para ensaios de terapias alvo-ALK [58]. Crizotinibe foi aprovado pela FDA [51], e LDK378 está em desenvolvimento para EML4-ALK NSCLC. De nota, dentro de mutações que levam a ALK Crizotinibe resistência já foram descritos, análoga à mutação T790M levando a resistência erlotinib e gefitinib na EGFR [59].

inibidores de Hsp90.

O Hsp90 inibidor de IPI-504 está actualmente em ensaios clínicos para testar a sua eficácia em pacientes com câncer de pulmão com mutações de ALK. Como observado anteriormente, os inibidores de HSP90 podem bloquear várias vias de sinalização aberrante funcionamento em células de câncer [33]. Ganetespib (STA-9090) também está sendo utilizado em ensaios clínicos contra a pacientes com câncer de pulmão ALK translocado.

O subtipo 4

O subtipo 4 portos aberrações no c-MET. c-Met é um proto-oncogene com implicações importantes em NSCLC [3], [60]. Vários agentes estão em desenvolvimento ativo para alvejar esta via.

O subtipo 4.1 visão geral

subtipo 4.1 é caracterizado por desregulação do fator de transcrição do receptor tirosina quinase mesenquimais-epitelial (anotado como c-MET). c-Met é um proto-oncogene que codifica um receptor de membrana de tirosina-quinase conhecido como receptor do factor de crescimento de hepatócitos (HGFR) [60]. Grande parte da actividade oncogénica da c-Met deriva da sua função fisiológica normal. Em células saudáveis ​​c-Met promove o crescimento celular e a migração celular. No entanto, a desregulação da via c-Met leva à proliferação celular, sobrevivência celular, angiogénese, invasão e metástase [61]. c-Met desregulação pode ocorrer através de uma variedade de mecanismos, incluindo c-Met sobre-expressão, activação, a sobre-expressão do factor de crescimento de ligando de hepatócitos de c-met (HGF), a amplificação de genes, e a perda de C-CBL de heterozigosidade [60], [62] . Estas alterações, discutidas abaixo, são actualmente agrupados no subtipo 4.1. Os testes para a detecção de todas estas alterações não são considerados ainda biomarcadores aprovados pela FDA, nem é c-Met ainda considerado um marcador preditivo que informa tomada de decisão clínica para pacientes com cancro de pulmão. Os dados dos testes de ensaios clínicos c-MET terapias direcionadas em subgrupos de pacientes geneticamente selecionados, esperamos aumentar a pontuação SOE de média a alta no futuro próximo.

c-MET superexpressão foi observado em 67% dos adenocarcinomas, 57 % dos carcinomas de grandes células, 57% dos carcinomas de células escamosas, e 25% dos cancros do pulmão de pequenas células [63]. Um estudo recente demonstrou que os tumores de adenocarcinoma tiveram um aumento significativo do número de cópias do gene MET indicando que a amplificação do gene é um mecanismo possível subjacente a sobreexpressão de c-Met [64]. c-Met ocorre concomitantemente com a activação e a sobre-expressão pode ser detectada utilizando coloração imuno-histoquímica para o c-MET (denominados P-MET para a detecção de fosforilação de Y1003 normalmente em locais ou Y123 /1234/1235) [63], [65].

O HGF ligando de c-Met também pode ser sobre-expresso por células tumorais com a expressão moderada observada em 45% dos tumores de cancro do pulmão [66]. Quando HGF se liga ao receptor de c-met que gera TEM autofosforilação levando à activação da via de TEM que permite a mobilização de células e vascularização -. Dois processos que contribuem para a malignidade de tumores [3], [60]

Finalmente, c desregulação -Met também pode ocorrer através de mutação genética. Esta aberração é claramente distinguível dos demais por sequenciação genética [60] e tem sido atribuído ao subtipo 4.2.

O subtipo 4.2 visão geral

O subtipo 4.2 é caracterizada por mutações de c-MET.

mutações de c-met tem sido observada em ambos NSCLC e cancro do pulmão de células pequenas. A prevalência de mutações de c-met é relativamente baixo em comparação com a frequência de c-Met sobre-expressão em cancro de pulmão, mas o seu potencial para causar a progressão da doença foi demonstrado ser significativa [60]. As mutações são encontrados em dois domínios diferentes da proteína do receptor de c-met. Um estudo de quatro linhas de NSCLC e 127 adenocarinomas identificadas quatro mutações missense (E168D, L229F, S323G, N375S) no domínio de semaforina, um domínio estrutural de semaforinas, que são uma grande família de proteínas segregadas e transmembranares. Outro grupo de mutações foram encontradas no domínio justamembrana incluindo: R988C e T1010I, S1058P, e uma variante de splicing alternativa (a que falta o exão ácido 47-amino 14) que afecta o domínio justamembrana [63]. mutações justamembrana são significativas porque este domínio é um importante sítio regulamentar para as funções catalíticas de tirosina-quinases. Mutações nesta região resultou na fosforilação da tirosina de proteínas constitutivas e tumorigenicidade aumentada in vitro. E168D (domínio sema) e R988C e T1010I (mutações justamembrana) também foram observados em SCLC [66].

Outra aberração observada recentemente correlacionar positivamente com mutação c-MET em linhas celulares de NSCLC é a mutação do Casitas linfoma de linhagem B (C-CBL) gene [62]. C-CBL é uma ligase de ubiquitina-ligase e adaptador que desempenha um papel na homeostase normal. A elevada taxa de mutação de c-CBL observada em cancro do pulmão Pensa-se que seja uma combinação de mutação somática missense e perda de heterozigosidade (LOH) no locus c-CBL [3], [60], [62]. C-CBL LOH está associada com mutações em um ou outro do Met ou genes de EGFR como estes eventos foram observados para co-ocorrem nas mesmas amostras. é assim formulada a hipótese de que as mutações de c-CBL podem combinar ou com uma alteração MET ou mutação do EGFR para contribuir para a tumorigénese pulmão e metástase [62]. Devido a uma SOE baixa para c-CBL como um biomarcador preditivo no contexto clínico, que ainda não foi atribuído o seu próprio subtipo.

Deve também notar-se que as mutações MET variam ao longo de linhas étnicas e raciais. Um estudo recente descobriu a maior frequência de mutações c-Met em asiáticos. A mutação de domínio sema N375S foi encontrado para ser a mutação mais frequente, em geral, ocorrem com mais frequência em asiáticos do leste do que caucasianos, e nunca em amostras de afro-americanos [67].

abordagem terapêutica potencial para o subtipo 4

TEM inibidores.

Várias terapias direcionadas para o tratamento da atividade de MET aberrante estão atualmente em testes clínicos. A primeira estratégia emprega inibidores directos MET capazes de interferir com a sinalização de c-met. Vários – incluindo ARQ 197, CABOZANTINIB e foretinib – estão actualmente em fase 2 e 3 ensaios clínicos

anticorpos MET

Um anticorpo de braço único dirigido contra o domínio extracelular do MET, chamado.. MetMAb, foi testado em um estudo randomizado de fase II em pacientes com NSCLC previamente tratados com erlotinib. Na análise de intenção de tratamento, nenhum benefício foi observado com a adição de MetMAb ao erlotinib em comparação com aqueles tratados apenas com erlotinib. No entanto, naqueles pacientes com “diagnóstico de altura TEM” critérios de imuno-histoquímica (um composto de intensidade e extensão da coloração que foi visto em aproximadamente 50% dos pacientes), houve melhora na progressão-livre e sobrevida global, levando ao início de um estudo de fase III, neste subgrupo de pacientes [30].

anticorpos HGF.

Dois anticorpos HGF que têm como alvo a acção aberrante do HGF estão actualmente a ser testado em pacientes com câncer de pulmão. AMG-102 é um anticorpo monoclonal humano que está na fase I e II de ensaios clínicos para NSCLC e vários outros cancros. Os dados de um ensaio em pacientes com tumores sólidos avançados sugere que AMG-102 é bem tolerada e pode inibir a progressão do tumor em alguns doentes [68]. Um segundo anticorpo HGF AV-299 está em desenvolvimento pela AVEO Pharmaceuticals. Os dados da fase 1 de ensaios clínicos em vários tipos de cancro têm indicado que AV-299 é tolerável e pode ser combinado favoravelmente com inibidores de EGFR, tais como gefitinib e erlotinib. Os dados sobre a eficácia de AV-299 no tratamento do NSCLC deve estar disponível no final de 2011.

Hsp90 inibidores.

Outra estratégia envolve a inibição da proteína acompanhante, Hsp90, que é necessário para a proteína c-met (e outra cinase) de dobragem e a estabilidade [3]. AUY922 e IPI-504 estão atualmente em fase 1 e 2 ensaios clínicos para câncer de pulmão.

O subtipo 5

O subtipo 5 portos aberrações na via AKT /PI3K. PI3K age de forma antagônica com a fosfatase lipídica, PTEN, fazer pender a balança entre duas moléculas sinalizadoras, PIP2 e PIP3 [69], [70]. Após a estimulação do fator de crescimento, PI3KCA é activado o aumento dos níveis PIP3 que impulsiona a fosforilação de AKT e processos a jusante como a maior tradução da proteína, a divisão celular e apoptose reduzida [10], [69].

O subtipo 5.1 Visão geral

Subtipo 5,1 é caracterizada por aberrações em PI3K, um esf ingosina-quinase, que regula o crescimento da Akt /PI3K. A família de proteínas PI3K é dividido em três classes e várias subclasses com base na estrutura primária, regulamentação e na especificidade de substrato lipídico vitro. Destes o Ia classe é a mais estudada, em parte por causa de seu papel no câncer. Estas proteínas são compostas de uma subunidade catalítica conhecida como p110 e uma subunidade reguladora conhecida como p85. Até agora, o PI3K é o único membro da família encontrado para ter mutações somáticas no cancro humano. Estas mutações ocorrem predominantemente nos domínios de hélice ou de cinase da subunidade catalítica p110 alfa que é codificada pelo gene PI3KCA [71].

A via PI3K /AKT desempenha um papel fundamental na regulação da proliferação de células de mamíferos e de sobrevivência. As mutações de activação PI3KCA têm sido implicados em vários cancros, incluindo melanoma, câncer de mama, câncer colorretal e NSCLC. No cancro do pulmão, a amplificação do gene PI3KCA ocorre com uma frequência muito maior do que as mutações ativadoras [69], [71].