Abstract

O significado clínico do vírus do papiloma humano (HPV) em nó pescoço metástase de câncer de desconhecido primário (CUP) é não está bem estabelecida. Nós teve como objetivo abordar a relação do estado HPV entre metástase e do tumor primário, e também a importância da condição HPV em relação radiografia detectou metástase cística em cabeça e pescoço carcinoma de células escamosas (CECP) e CUP. DNA do HPV foi examinada em 68 pares de metástase e tumor primário e na metástase de nó de 27 taças. Em copos tratados cirurgicamente, p16 foi analisada por imunohistoquímica. Quando amigdalectomia provou câncer tonsilar oculto nas CUP, DNA HPV e p16 também foram examinados no primário oculto. metástase cística na tomografia computadorizada com contraste foi correlacionada com o site principal e estado de HPV em outra série de 255 HNSCCs e copos com status de HPV conhecidos. metástase foi HPV-positivos em 19/37 CCEs (51%) de orofaringe (OPSCCs) e 10/27 (37%) As taças, mas não em não-OPSCCs. Fluido foi coletado de metástase cística por meio de aspiração com agulha fina em dois OPSCCs e uma xícara, e todas as coleções líquidas eram HPV-positivos. estatuto de HPV, incluindo a presença de DNA do HPV, genótipo e estado físico, bem como o padrão de expressão de p16 foi consistente entre as metástases do tumor primário e primário ou oculta. cancer tonsilar oculto foi encontrado mais frequentemente em CUP p16-positivas do que na Copa p16-negativos (odds ratio (OR), 39,0; intervalo de confiança de 95% (CI), 1,4-377,8; P = 0,02). Radiograficamente, cística metástase era específico para OPSCC e CUP, e foi associado com HPV positividade em relação à metástase necrótica ou sólidos (OR, 6,2; IC 95%, 1,2-45,7; P = 0,03). Em conclusão, o status do HPV permanece inalterada depois de metástase. O primário oculto da CUP HPV-positivo é provavelmente localizada na orofaringe. status de HPV determinado a partir de punção aspirativa por agulha fina facilita o diagnóstico de metástase cística

Citation:. Yasui T, Morii E, Yamamoto Y, Yoshii T, Takenaka Y, Nakahara S, et al. (2014) Papilomavírus Humano e Cystic metástase em câncer de orofaringe e Câncer de Unknown primária Origem. PLoS ONE 9 (4): e95364. doi: 10.1371 /journal.pone.0095364

editor: Craig Meyers, da Escola de Medicina da Universidade Penn State, Estados Unidos da América

Recebido: 11 de dezembro de 2013; Aceito: 25 de março de 2014; Publicação: 21 de abril de 2014

Direitos de autor: © 2014 Yasui et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Os autores não têm apoio ou financiamento para relatar

Conflito de interesses:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

cervical linfonodo metástase de câncer de origem desconhecida ( CUP) é uma entidade clínica rara e atualmente é responsável por não mais do que 3% da cabeça e do carcinoma de células escamosas do pescoço (CECP) [1]. Em muitos casos, após a sua apresentação inicial como CUP, o site principal é revelado predominantemente na orofaringe, particularmente no tonsilas palatinas e da base da língua [2]. carcinoma de células escamosas da orofaringe (OPSCC) está etiologicamente classificados em dois subtipos distintos; um está relacionado com o tabaco, enquanto que a outra é causada pelo vírus do papiloma humano (HPV) [3], [4]. A sobre-expressão de p16 serve como um marcador substituto de infecção por HPV, apesar de um subconjunto de tumores p16-positivos são HPV-negativos [4]. OPSCC HPV-positivos e /ou p16-positivas surge preferencialmente no tonsilas palatinas e da base da língua [4], sugerindo a relevância do HPV para a Copa.

A prevalência do HPV na metástase do CECP tem sido bem estudou; demonstrou-se que a metástase de nó de HPV-positivo é específico para OPSCC [5], [6], ao passo que a relação do estado do HPV entre o tumor primário e suas metástases nó correspondente não está bem estabelecida. Apesar de uma série de estudos têm mostrado boa concordância de status do HPV entre o tumor primário e metástases, o tamanho da amostra de cada estudo era pequeno, e estado físico HPV não foi abordada [7] – [9]. A prevalência do HPV na metástase do copo tem sido relatada a variar de 28 a 92%, dependendo da definição de CUP [8] – [11], ao passo que a relação do estado HPV entre a metástase e seu tumor primário oculto correspondente não tem foi estabelecida.

a associação de OPSCC com histologicamente identificada metástase cística é bem conhecido [12], enquanto a maioria das primárias ocultas no copo com histologicamente identificada metástase cística são localizadas na tonsilas palatinas ou a base do a língua [13]; isto sugere o envolvimento de infecção por HPV na formação de metástase cística. Goldenberg et ai. analisou o status do HPV em tecidos dissecado do pescoço dos pacientes OPSCC e copo, e descobriu que 87% (13/15) dos nodos metastáticos císticos eram HPV-positivos [14]. Em outro estudo, foi relatado que um quisto fissura branquial muitas vezes prova ser metástase cística após a intervenção cirúrgica, seguido de exame histopatológico [15]. A razão para isto é que tanto a metástase cística nó e um cisto da fenda branquial presente radiograficamente como cistos cervicais laterais, e que a sensibilidade da detecção das células SCC em fluido cístico, por meio de exame citopatológico é pobre. Assim, um diagnóstico diferencial não cirúrgico entre estas duas entidades em termos de estatuto HPV é de interesse clínico. O diagnóstico diferencial requer não só cria uma associação entre infecção por HPV e radiograficamente identificada metástase cística, mas também o desenvolvimento de análise de HPV de fluido cística recolhido por punção aspirativa por agulha fina (PAAF).

Nós projetamos o presente estudo entender melhor o significado clínico do estado HPV em relação metástase da CUP. Para este fim investigámos o status do HPV, incluindo a presença de DNA do HPV, genótipo e estado físico, em pares correspondentes de tumor primário e de metástases em uma grande série de HNSCC, e avaliada a relação entre o tumor primário e a sua metástase sobre status de HPV. Nós investigamos ainda mais não só a prevalência do HPV na metástase do copo, mas também a relação entre a metástase do câncer e sua tonsilar oculto (comprovada após amigdalectomia) no que diz respeito ao estatuto de HPV e padrão de expressão p16 correspondente. Além disso, estudamos a relação entre radiografia detectou metástase cística e o status de local primário e HPV, com ênfase na detecção do HPV no líquido cística.

Materiais e Métodos

Declaração de Ética

o protocolo do estudo foi aprovado pelo Conselho de Administração da Universidade de Osaka Institutional Review em dezembro de 2004. Todos os pacientes forneceram consentimento informado por escrito.

os pacientes

o status HPV do primário tumor e sua metástase correspondente, bem como o status de HPV de metástase de CUP, foram abordados em ambas as configurações retrospectivos e prospectivos. Na configuração retrospectiva, fixado em formalina parafina-embedded (FFPE) amostras de 28 pares de metástase de primário e nó e de 17 xícaras foram inscritos. Todos os tumores foram cirurgicamente excisadas entre janeiro de 2005 e março de 2010, sem qualquer tratamento prévio, e foram histologicamente diagnosticado como carcinoma de células escamosas. No cenário prospectivo, um total de 53 HNSCCs e copos de nódulo positivo suspeitos foram inscritos. biópsias de tumores primários suspeitas e amostras FNA de metástase suspeitos foram obtidos de pacientes ambulatoriais entre abril de 2010 e setembro de 2012. As amostras de biópsia e amostras de PAAF foram armazenados em RNAlater reagente estabilização de RNA (QIAGEN Inc., Valencia, CA, EUA) e tampão ATL (QIAamp Mini Kit: QIAGEN Inc.), respectivamente. Quando a coleta de fluido foi realizado usando FNA, a sua centrifugado foi armazenado como descrito acima. Apenas um único ciclo de FNA foi realizado para a análise de HPV, enquanto que FNA foi repetido conforme necessário para análise citopatológico. Quando amigdalectomia revelou um tumor primário oculto em pacientes CUP, o espécime FFPE do primário oculto foi analisado para DNA do HPV e p16. A expressão de p16 foi também examinada em metástases cirurgicamente excisadas de CUP, independentemente das configurações. Para a análise radiográfica, um total de 255 pacientes com CECP e copo, que se submeteram a um pré-tratamento com contraste tomografia computadorizada e foram comprovadas patologicamente ser nó positivo, foram inscritos. Esta população incluía a série retrospectiva de 45 HNSCCs /cups, a série prospectivo de 50 HNSCCs /cups, ea série adicional de 160 HNSCCs. O estatuto de HPV adicional da série foram avaliadas utilizando amostras de biópsia FFPE a partir do tumor primário [16]. Diagnóstico de CUP foi feito depois de processamento profundo não conseguiu detectar um tumor primário, apesar de metástase patologicamente comprovado. O processamento incluiu o seguinte: a história médica; exame físico; pescoço tomografia computadorizada e /ou ressonância magnética; endoscopia faringolaríngea; endoscopia digestiva alta; biópsia da mucosa da orofaringe e nasofaringe; e

18F-fluorodeoxyglucose tomografia por emissão de positrões (FDG-PET) ou FDG-PET /CT. Amigdalectomia não foi incluído nos critérios, porque, em princípio, amigdalectomia foi realizada simultaneamente com esvaziamento cervical quando o tumor era ressecável.

Detecção e tipagem de DNA do HPV de alto risco e avaliação do estado físico HPV16

o DNA foi extraído a partir de amostras de FFPE utilizando o kit de tecido DNeasy (QIAGEN Inc.), e a partir de amostras frescas utilizando o kit QIAamp Mini (QIAGEN Inc.). A presença de ADN de HPV foi seleccionado por meio de uma reacção aninhada em cadeia da polimerase (PCR) utilizando o /11 conjunto de iniciadores PGMY09 (para PCR primário) e GP5 + /6 + conjunto de iniciadores (por PCR secundário) como relatado anteriormente [17] . Os produtos de PCR foram purificados secundárias e sequenciado directamente utilizando um 3100 Genetic Analyzer (Applied Biosystems, Foster City, CA, EUA). Dactilografia foi realizada por comparação da sequência com os dos tipos de HPV conhecidos utilizando o programa BLAST do NCBI (https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi). O estado físico de HPV16 foi dirigida de acordo com a proporção de

E2

para

E6

copiar números, que foi determinada por meio de real-time PCR amplificação do

E2

e

E6

quadros de leitura aberta conforme relatado anteriormente [18]. A linha celular de cancro cervical CaSki foi usada como um controlo positivo [19].

A imuno-histoquímica de p16

análise da proteína p16 foi realizada utilizando cortes de tecido FFPE 4 mícrons com um controlo positivo adequado . Após recuperação de antigénio utilizando uma câmara de aquecimento pressurizado Pascal (DAKO, Glostrup, Dinamarca), as secções foram incubadas com anticorpo anti-p16 a uma diluição de 1:500 (clone LC8: Santa Cruz Biotechnology, Inc., Dallas, TA, EUA) . Após a incubação, o anticorpo anti-p16 foi detectada utilizando o kit EnVision ChemMate (DAKO) e visualizadas por meio de diaminobenzidina como um cromogénio. coloração de controlo negativo foi efectuada na ausência de anticorpo primário. Os casos foram classificados como positivos para p16 quando 50% ou mais das células mostraram coloração nuclear e citoplasmática.

Definição de nó cística na TC com contraste de digitalização

A definição de nós císticas na contrastada TC foi reforçada, em conformidade com os critérios descritos por Goldenberg et al. [14]. Nós com uma forma redonda ou oval, uma fina ( 2 mm) cápsula de reforço, a atenuação da água homogênea e nenhum complexo interno que eram heterogéneos, ou tiveram área sólida foram classificados como cística (Fig 1a.). Nós com mais grossas paredes sólidas e /ou heterogênea, complexa baixa atenuação central foram classificados como necrótica (Fig 1b.); enquanto nós com um teor de sólidos homogênea foram classificados como sólido (Fig. 1c).

Observe uma parede fina de aumento do contraste e conteúdo de baixa densidade homogênea na metástase cística.

a análise estatística

a simetria do estado HPV e /ou expressão de p16 entre o tumor primário e sua metástase correspondente foi analisada utilizando o teste de kappa. A diferença no fenótipo de HPV /p16 entre o nó metástase de CUP (com e sem câncer tonsilar oculto) foi examinada usando o teste exato de Fisher-Freeman-Halton. As relações entre o cancro tonsilar ocultismo e status do HPV e entre oculto câncer e p16 expressão tonsilar foram examinadas por meio de análise univariada utilizando o modelo de regressão logística eo teste exato Clopper-Pearson, respectivamente. As diferenças na prevalência de metástase cística de acordo com o site principal foram avaliados por meio de análise univariada utilizando o modelo de regressão logística ou o teste exato de Clopper-Pearson, conforme o caso. A relação entre a infecção por HPV e metástase cística foi avaliada por meio de análise univariada utilizando o modelo de regressão logística. Todos os testes estatísticos foram dois atados. Os valores de P 0,05 foram considerados como sendo estatisticamente significativo. Todos os dados foram analisados ​​utilizando software 10,02 (SAS Institute, Cary, NC, EUA) JMP Versão.

Resultados

Relação de status do HPV entre a metástase primária e nó na OPSCC

na configuração retrospectiva, 40% (15/06) de OPSCCs eram HPV-positivos e de 60% (9/15) eram HPV-negativas, em relação tanto do tumor primário e suas metástases nó correspondente (Tabela 1). A presença ou ausência de infecção por HPV foi consistente entre o tumor primário e a sua correspondente metástase, indicando a similaridade no estado de HPV entre os dois (P 0,0001). É digno de nota o facto de que 17% (1/6) do OPSCCs HPV-positiva teve múltiplos nódulos metastáticos, os quais eram HPV-positivo. Por outro lado, 33% (09/03) de OPSCCs HPV-negativo teve múltiplos nódulos metastáticos, os quais eram HPV-negativo. Nenhum dos 13 não-OPSCCs (5 hipofaringe, 4 de laringe, e 4 cancros orais) eram HPV-positivos.

Quanto à definição prospectiva, análise de PCR não teve sucesso em 6% (3/53 ) dos casos por causa da preparação de DNA pobre da FNAS. No entanto, FNAS repetidas evidenciou malignidade em todos os três destes casos. Por conseguinte, a análise prospectiva foi limitada a 50 casos, que foram finalmente diagnosticados por workup clínico completo para ser os seguintes cancros: 22 orofaríngea; 2 nasofaringe; 7 hipofaringe; 7 de laringe; 2 por via oral; e 10 copos. Em ambos o tumor primário e a sua metástase, 59% (13/22) de OPSCCs eram HPV-positiva, ao passo que 41% (9/22) de OPSCCs e 100% (18/18) dos não-OPSCCs foram HPV- negativo tanto no tumor primário e a sua metástase; novamente, esta indicada a semelhança em estado de HPV entre o tumor primário e a sua metástase (P 0,0001; Tabela 1). Colectivamente, 51% (19/37) dos OPSCCs eram HPV-positivos, os quais originaram tanto no tonsilas palatinas ou a base da língua. Como mostrado nas Tabelas 2 e 3, tanto o genótipo de HPV e estado físico foram consistentes entre o tumor primário e a sua metástase (P 0,0001). HPV16 foi responsável por 95% (18/19) dos casos de HPV-positivo e HPV33 foi detectado em um dos casos restantes. integração virai completa foi encontrado em 56% (10/18) dos casos de HPV16-positiva, enquanto o restante 44% (8/18) dos casos de HPV16-positivos exibiram uma mistura de epissomal e integrado formas virais.

a prevalência do HPV no copo e no relacionamento do estado HPV entre a metástase de primário eo nó oculto

nas configurações retrospectivos e prospectivos, 35% (6/17) e 40% (4/10 ) de copos eram HPV-positivos, respectivamente, indicando que um total de 37% (10/27) de copos eram HPV-positivos (Tabela 1). características detalhadas de copos com respeito ao HPV são apresentados na Tabela S1 para a configuração retrospectiva e na Tabela S2 para o ambiente prospectivo. HPV16 e HPV18 foi responsável por 80% (10/08) e 20% (2/10) dos 10 casos de HPV-positiva, respectivamente. integração virai completa foi encontrado em 63% (08/05) dos casos de HPV16-positiva, enquanto o restante 38% (3/8) dos casos de HPV16-positivas mostraram formas virais mistas. Deve notar-se que o fluido foi recolhido por FNA em três casos (2 OPSCCs e uma taça) no ambiente prospectivo. Todos os três coleções líquidas foram encontrados para ser HPV positivo, embora repetido citologia FNA não conseguiu detectar células malignas em um deles.

De 27 pacientes com CUP, 19 amigdalectomia foram submetidos juntamente com esvaziamento cervical, que revelou câncer oculto tonsilar em 32% (6/19). A relação entre metástase e seu câncer tonsilar oculto sobre o status de HPV e de expressão p16 correspondentes estão resumidos na Tabela 4. O fenótipo do estatuto de HPV e de expressão p16 foi consistente entre metástase e sua correspondente câncer tonsilar oculto (P = 0,01). Além disso, como mostrado nas Tabelas 2 e 3, o genótipo HPV e estado físico foram consistentes entre metástase e sua correspondente câncer tonsilar ocultismo. FIG. 2 representa hematoxilina e eosina e imuno-histoquímica p16 de câncer tonsilar oculto com metástase cística. A camada mucosa superficial das amígdalas foi encontrado para ser intacto, enquanto que as células cancerosas que expressam p16 eram proeminentes em uma camada cripta com invasão para a camada da submucosa (Fig. 2a e 2b). tecido canceroso que delineou uma parede cística fina expressa difusamente p16 (Fig. 2C e 2D).

A barra de escala corresponde a 1 mm.

De nota, 100% (6/6) dos copos com câncer tonsilar oculto revelado expressa p16, enquanto 50% (3/6) eram HPV-positivos. Em contraste, apenas 23% (3/13) e 15% (2/13) dos copos sem cancro tonsilar oculto revelado foram p16-positivos e HPV-positiva, respectivamente. A diferença na distribuição do HPV fenótipos /p16 foi estatisticamente significativa entre os copos, com e sem câncer revelou tonsilar oculto (P = 0,004); esta descoberta nos levou a investigar a relação entre o câncer tonsilar ocultismo e status de HPV ou expressão p16 em metástase de CUP. Como mostrado na Tabela 5, a possibilidade de que ocultam o cancro das amígdalas poderiam ser descobertos após amigdalectomia foi significativamente maior quando o nó metástase de CUP foi p16-positivas, do que quando era p16-negativos (odds ratio (OR), 39,0; 95% intervalo de confiança (Cl), 1,4-377,8; P = 0,02). Embora o câncer de tonsilar oculto foi comprovada com mais frequência em CUP HPV-positivos do que na Copa do HPV-negativo, a diferença não alcançou significância estatística (P = 0,17)

Associação de radiografia identificou metástase cística com primário local do tumor e do estado HPV

tomografia computadorizada com contraste de um total de 255 pacientes com CECP nódulo positivo ou CUP foram revistos (Tabela 6). Nenhum dos 146 não-OPSCCs (18 nasofaringe, 91 hipofaringe, 25 de laringe, e 12 cancros orais) mostrou radiografia detectou metástase cística, enquanto 6% (5/82) dos OPSCCs e 11% (3/27) de Copas fez. Todos os cinco OPSCCs com radiografia detectou metástase cística originado tanto no tonsilas palatinas ou a base da língua. A incidência de metástases cística foi significativamente menor no não-OPSCC que em OPSCC (OR, 0,05; IC de 95%, 0,004-0,8; P = 0,03). Dos casos com metástase cística, 38% (3/8) mostrou metástase nodal múltipla, todos os quais envolvidos metástase necrosado. Todos os restantes cinco casos mostrou metástase nodal solitário, que foi cística. Porque tanto a infecção pelo HPV e metástase cística foi específico para OPSCC e CUP, foi investigada a associação de status do HPV com o achado radiológico da metástase no OPSCC e CUP (Tabela 7). Em comparação com o tecido necrótico e /ou metástase sólida, cística metástase nó era mais provável que seja de HPV-positivo (33 contra 75%; OR, 6,2; 95% CI, 1,2-45,7; P = 0,03). Por sua vez, a frequência de radiograficamente identificáveis ​​metástase cística foi maior no tumor HPV-positivos do que em tumores HPV-negativos (15 versus 3%; 95% CI, 1,3-43,8;; OR, 6,2 P = 0,02).

Discussão

no presente estudo, nós mostramos que metástase HPV-positivos é específico para OPSCC, especialmente quando OPSCC surge no tonsilas palatinas e da base da língua. Também demonstramos que o status de HPV, incluindo a presença de DNA do HPV, genótipo, e estado físico, foi consistente entre o tumor primário e sua metástase correspondente. Estes resultados sugerem que o tumor primário oculto da CUP com metástase HPV-positivo é provavelmente localizada na orofaringe, particularmente no tonsilas palatinas ou a base da língua. Os resultados respeitantes à nossa série de copos estavam de acordo com esta sugestão. Amigdalectomia revelou câncer tonsilar oculta em 60% (3/5) dos copos com metástase HPV-positivos nó e 67% (6/9) dos copos com metástase p16-positivas, mas em nenhum dos 10 copos com HPV-negativo /p16-negativos metástase. Além disso, temos mostrado pela primeira vez que o estatuto de HPV, incluindo a presença de DNA do HPV, genótipo, e estado físico, bem como o padrão de p16 expressão são consistentes entre metástase e sua correspondente câncer tonsilar ocultismo. Coletivamente, nós estabelecemos não só que o status HPV do tumor permanece inalterada após a metástase, mas também que o sítio primário oculto da CUP com metástase relacionadas com o HPV existe na orofaringe.

Tendo em conta estas constatações, é mais provável no caso de copo com metástase relacionadas com o HPV que o tumor primário oculto está localizada na base da língua, a menos que o cancro tonsilar oculto é comprovada após amigdalectomia. Weiss et ai. informou que a amigdalectomia e biópsia cega da base da língua revelou o tumor primário oculto em todos os 12 copos com metástase HPV-positivos, e em todos os 11 copos com metástase p16-positivas [8]. Em nossa série, amigdalectomia não revelaram câncer tonsilar oculta em 40% (2/5) dos copos com metástase HPV-positivos, e em 33% (3/9) dos copos com metástase p16-positivo, em que o ocultismo tumor primário era esperado para ser localizada na base da língua. Além disso, descobrimos que amigdalectomia não teve sucesso na detecção do tumor primário oculto em todos os 10 copos com metástase HPV-negativo /p16-negativos. Da mesma forma, Park et al. informou que a amigdalectomia e biópsia da mucosa foram bem sucedidos na identificação de OPSCC oculto em apenas 7% (2/27) dos copos com metástase HPV-negativos e em 14% (4/29) dos copos com metástase p16-negativos [10 ]. Parece que é difícil identificar o tumor primário oculto usando amigdalectomia quando metástase de CUP é HPV-negativo /p16-negativos.

De acordo com uma revisão sistemática de tipos de HPV em CECP, a prevalência de HPV 18 em OPSCC foi baixa; HPV18 representaram apenas 9 de 909 (1,0%) casos OPSCC HPV-positivos [20]. Além disso, a grande maioria ( 95%) de HNSCCs HPV18-positiva, não foram OPSCCs. Em contraste, HPV18 representaram dois de 10 (20%) As taças de HPV-positivo na nossa série; Infelizmente, tanto dos pacientes com copos de HPV18-positivos não foram submetidos a amigdalectomia (Tabela S1 e S2). Ainda não está claro se ou não o local primário oculto nessas duas Copas foi tonsila. Dada a constatação acima referida que não SCC-orofaríngea formar a grande maioria dos casos CECP HPV18-positiva, é provável que o primário oculto de COPO HPV18-positivo existe em outras do que a orofaringe locais. Esta é uma questão interessante que terá de ser abordada no futuro.

OPSCC e CUP frequentemente formar histologicamente identificável metástase cística [12], [13]. Por outro lado, o nó cística metástase é muitas vezes diagnosticada como sendo um cisto da fenda branquial [15]. Por sua vez, não é até a intervenção cirúrgica seguida de exame histopatológico que o cisto da fenda branquial pode ser provado ser cística metástase. Isto é porque ambos metástase cística nó e cisto da fenda branquial presente radiograficamente como cistos cervicais laterais, e porque a sensibilidade da citopatológico é pobre na detecção de células malignas em fluidos cística. Em metástase cística, a sensibilidade do diagnóstico citopatológico foi relatado para estar no intervalo de 33-50% [15], [21]. Para encontrar uma solução em relação ao diagnóstico diferencial destas duas entidades, primeiro abordou a relação entre o site primário e radiograficamente identificáveis ​​metástase cística em imagens de CT com contraste. Descobrimos que radiograficamente identificáveis ​​metástase cística era específico para OPSCC e CUP, e que o subsite de OPSCC com radiograficamente identificáveis ​​metástase cística era ou tonsila palatina ou a base da língua. Porque o principal local específico para metástase cística era idêntico ao sítio primário específico para a infecção pelo HPV, o próximo investigou a relação entre infecção por HPV e metástase cística. Descobrimos que radiograficamente identificáveis ​​metástase cística é mais provável que seja HPV-positivos em comparação com metástase sólido ou necrótica em OPSCC e CUP. Estes resultados indicam que a positividade de HPV do fluido cística recolhidos por FNA vai ajudar a fazer um diagnóstico definitivo, ou seja, que o cisto de interesse é maligno. A hibridação in situ, o que pode ser usado na detecção de ADN de HPV em blocos de células preparados a partir de recolha de fluido cístico, parece inadequado para este propósito por causa da baixa celularidade. PCR, que é superior a hibridação in situ em sensibilidade, é susceptível de servir de forma mais eficaz para a detecção de ADN de HPV em recolha de fluido cístico. No presente estudo, nós demonstramos pela primeira vez a possibilidade de detectar o ADN do HPV utilizando PCR aninhada em colecções fluido aspirado a partir de metástases císticas. Coletivamente, nós mostramos que radiograficamente identificáveis ​​metástase cística é provavelmente HPV-positivos, e que a PCR permite a detecção do DNA do HPV na recolha de fluidos usando FNA. Estes resultados indicam que um quisto cervical lateral cujo fluido FNA é HPV-positivo é metástase cística, mas não um cisto da fenda branquial.

Na tomografia computadorizada com contraste, a 6% do nódulo positivo OPSCC e 11% de nódulo positivo CUP mostrou metástase cística. Esta prevalência de radiograficamente identificáveis ​​metástase cística em OPSCC e CUP é relativamente baixo, em comparação com a de histologicamente identificada metástase cística. Por mais que 56 e 73% dos cânceres de nódulo positivo das amígdalas palatinas e da base da língua, respectivamente, foram relatados para formar histologicamente identificável metástase cística [12]. Esta diferença provavelmente reflete a capacidade limitada de tomografia computadorizada com contraste para visualizar uma lesão cística. É difícil distinguir entre uma lesão cística a partir de uma lesão necrótica, particularmente quando a lesão de interesse é pequena. Além disso, mesmo quando uma grande metástase aparece necrótica na tomografia computadorizada com contraste, a FNA, por vezes, produz uma recolha de fluidos, indicando que radiologicamente o nó parece ser necrótica, mas histologicamente parece ser cística.

Em conclusão, verificou-se que o estado de HPV do tumor permanece inalterada depois de metástase. Na Copa do HPV-positivos, o tumor primário oculto é provavelmente localizada na orofaringe, especialmente quer no tonsilas palatinas ou na base da língua. HPV-positivos OPSCC e copo tendem a formar metástase cística. análise de PCR do fluido FNA permite a detecção não-cirúrgico do DNA do HPV, o que pode facilitar o diagnóstico diferencial de metástase cística e do cisto da fenda braquial.

Informações de Apoio

Tabela S1. .

Características de câncer de origem desconhecida na configuração retrospectiva

doi: 10.1371 /journal.pone.0095364.s001

(xlsx)

Tabela S2.

Características do Câncer do Desconhecido primária no ajuste prospectivo

doi: 10.1371. /journal.pone.0095364.s002

(XLSX)