Sumário

O câncer de pulmão é um dos cânceres mais comuns e é a principal causa de morte no mundo. quimioterapia baseada em platina é o principal método de tratamento em pacientes com câncer de pulmão. Nossos estudos anteriores indicaram que polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) em alguns genes transportadores desempenhado papel importante na eficácia da quimioterapia à base de platina. O objetivo deste estudo foi investigar a associação entre SNPs nos genes transportador e eficácia da quimioterapia à base de platina. Os principais polimorfismos em transportadores

OCT2, LRP, AQP2, AQP9

e

TMEM205

genes foram genotipados em 338 pacientes com câncer de pulmão. O rs195854 no modelo genotípica, rs896412 em modelos genotípicas e recessivos para todos os sujeitos apresentaram associação significativa com a resposta à quimioterapia. Na análise estratificada,

TMEM205

rs896412,

OCT2

rs1869641 e rs195854,

AQP9

rs1516400 e

AQP2

rs7314734 mostrou relação significativa com resposta à quimioterapia. Em conclusão, os polimorfismos genéticos em

OCT2

, A

QP2

,

AQP9

e

TMEM205

pode contribuir para a resposta à quimioterapia em pacientes com câncer de pulmão.

Citation: Wang Y, Yin JY, Li XP, Chen J, Qian CY, Zheng Y, et al. (2014) A Associação de genes transportadores polimorfismos e Lung Cancer Chemotherapy resposta. PLoS ONE 9 (3): e91967. doi: 10.1371 /journal.pone.0091967

editor: Masaru Katoh, National Cancer Center, Japão

Recebido: 21 de outubro de 2013; Aceito: 16 de fevereiro de 2014; Publicação: 18 de março de 2014

Direitos de autor: © 2014 Wang et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Este trabalho foi apoiado em parte pela amp National High-tech R D Programa da China 863 Grant Program 2012AA02A517 (ZYC) (https://www.863.gov.cn/), National Natural Science Foundation da China concede 81.173.129 e 81.373.490 (ZYC) e 81202595 (JY) (https://scholarmate.nsfc.gov.cn/scm/), Programa para a Fundação Científica especial de Investigação do Doutor Disciplinas na Universidade do Ministério da Educação da China Grant 20110162110034 (ZYC), Hunan Provincial Natural Science Foundation da China Grant 12JJ7006 (ZYC) (https://www.hnst.gov.cn/zxgz/zkjj/). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

o câncer de pulmão é um dos cânceres mais comuns e é a principal causa de morte em todo o mundo [1]. A percentagem de sobrevivência de cinco anos foi de cerca de 15, que é muito mais baixa do que outros tipos de cancro [2]. O cancro do pulmão é composto de dois tipos: o cancro do pulmão não pequenas (NSCLC) e cancro do pulmão de células pequenas (SCLC). A cirurgia é a base do tratamento para doentes com NSCLC início, enquanto a fase posterior NSCLC e SCLC pacientes foram tratados principalmente por quimioterapia à base de platina [3], [4]. A cisplatina, carboplatina foram os mais vulgarmente usados ​​primeira linha de drogas terapêuticas clínicas, mas os tumores foram sempre resistentes a eles e reduziu a sua eficácia [4].

A resistência à quimioterapia tem vários mecanismos, incluindo reduzida acumulação de compostos de platina ( ou diminuir a ingestão de aumentar o efluxo dos transportadores), desintoxicação, ou nível aumentado de reparação de danos do ADN e assim por diante [3], [5]. Vários transportadores contribuir para acumulação de platina nas células cancerosas. Aquaporinas (AQPs) são membros de uma família de proteínas transmembranares que têm a função de transportar os canais de água molecular. A família AQPs contém, pelo menos, 11 tipos diferentes [6]. A expressão de

AQP2

e

AQP9

foram reduzidos em linhas resistentes Pt apresentação que eles são os potenciais novos transportadores Pt drogas [7].

TMEM205

era uma nova proteína transmembranar, com quatro domínios transmembranares, está previsto para ser uma proteína relacionada com a secreção-pelas suas sequências de nucleótidos [5]. A resistência à cisplatina foi aumentada através da transfecção de

gene TMEM205

em células resistentes à cisplatina [8], [9]. proteína transmembranar 205 (

TMEM205

) pode diminuir o acúmulo de composto de platina por efluxo crescentes [5]. O cátion transportador orgânico 2 (

OCT2

), codificada pelo

SLC22A2

gene, teve um papel potencial de aumentar a absorção de platina e sensibilidade [10] – [12]. Resistência relacionada-proteína (

MVP /LRP

) pode-se regular a sensibilidade aumentando a acumulação de cisplatina celular e /ou ao diminuir o efluxo de cisplatina a partir de núcleos de células de cancro do ovário [13]. Para resumir, aumentando a expressão de

AQP2

,

AQP9

,

OCT2

e

MVP /LRP

ou diminuindo a expressão de

TMEM205

pode levar a sensibilidade de platina.

Usando o mesmo medicamento e dose pacientes terão resposta diferente à quimioterapia por causa das diferenças comparáveis ​​internos ou externos, tais como a idade do paciente, tabagismo, sua saúde geral e variantes genéticas [ ,,,0],14]. Muitos estudos descobriram que SNPs em transportadores de drogas desempenham um papel importante no metabolismo e transporte de drogas terapêuticas, e que afectam a resposta à terapia [15]. Daniele Campa et.al [16] investigou a relação de

ABCB1, ABCC2

e

ABCG2

polimorfismos com eficácia a quimioterapia à base de platina e demonstrou que um SNP de

ABCC2

foi significativamente associados com resposta à quimioterapia. Nossos estudos anteriores mostraram que vários cobre transportador protein1 SNPs podem ser significativamente associada com eficácia à base de platina quimioterapia e toxicidade em pacientes com câncer de pulmão [17], [18]. Oliver Zolk indicado et.al que o c.808 G T SNP em

OCT2

absorção significativamente alterada de compostos endógenos e drogas [19]. Portanto, a hipótese de que alguns outros polimorfismos do gene transportador também pode estar relacionada com a eficácia da quimioterapia à base de platina.

Neste trabalho, foi utilizado o método de marcação para análise da relação de 26 polimorfismos de

AQP2, AQP9, LRP /MVP, TMEM205

e

OCT2

genes com resposta à quimioterapia à base de platina (Tabela 1). Este é o primeiro estudo a investigar associação destes genes polimorfismos com resposta à quimioterapia do cancro do pulmão.

Materiais e Métodos

Os sujeitos do estudo

O protocolo do estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética da Xiangya Faculdade de Medicina da Universidade Central do Sul com um número de CTXY-110008-2 registro. A admissão de pesquisa clínica foi aprovado pelo Registro de Ensaios Clínicos chinês e o número de registo é ChiCTR-RO-12002873 (https://www.chictr.org/usercenter/project/edit.aspx?proj=4039). pacientes com câncer de pulmão foram quantificados e inscritos entre setembro de 2011 e março de 2013, Xiangya Hospital da Universidade Central do Sul e tumor província de Hunan Hospital em Changsha Hunan. Todos os pacientes foram fornecidos consentimento informado por escrito, em conformidade com o código de ética da Associação Médica Mundial (Declaração de Helsinki) antes deste estudo foi iniciado. As características clínicas básicas foram coletadas, incluindo a idade, tabagismo, histologia, sexo e estádio TNM, Eastern Cooperative Oncology Group Performance Status (ECOG PS)

Os critérios de inclusão foram listados como se segue:. (1) Os pacientes que estavam diagnosticado cancro do pulmão por histologia ou citologia; (2) Os pacientes que nunca tinham recebido qualquer terapia radical ou biológico antes e durante a quimioterapia; (3) Todos os pacientes que foram recebidos pelo menos dois ciclos de quimioterapia de primeira linha; (4) Todos os pacientes que foram recebidos durante todo o seguimento entre seis meses. Os critérios de exclusão foram listados como se segue: (1) Os pacientes que estavam na gravidez ou período de alimentação; (2) Os pacientes que tinham sido diagnosticados com outras doenças malignas; (3) Os pacientes que tiveram metástases cerebrais; (4) Os pacientes que tiveram infecção ativa.

Os pacientes incluídos neste estudo receberam quimioterapia de primeira linha à base de platina, incluindo cisplatina e carboplatina. resposta a quimioterapia foi avaliada após os primeiros dois ciclos de quimioterapia de acordo com a directriz RECIST (versão 1.1) para tumores sólidos [20]. Os pacientes que apresentaram resposta completa (CR) ou resposta parcial (PR) foram considerados como sensibilidade platina, enquanto a doença progressiva (PD) ou doença estável (SD) foram considerados como de resistência de platina [20].

SNPs Marcação selecção

Nós investigamos todas as variantes genéticas comuns em

TMEM205, AQP2, AQP9, LRP

e

OCT2

. Todos os SNPs de 5 kb a montante do primeiro exão e 5 kb a jusante do último exão dos cinco genes foram seleccionados como os SNPs candidatos. No total, foram seleccionados 26 SNPs no presente trabalho (Tabela 1). Todos estes 26 SNPs satisfeitos os seguintes critérios: (1) Os SNPs foram escolhidos a partir do banco de dados do HapMap Projeto Internacional de Fase II da população chinesa (https://www.hapmap.org/); (2) Todos os SNPs foram haplótipos SNPs tagger; (3) freqüência do alelo menor (MAF) foi maior do que 5% em Pequim população Han China; O coeficiente de correlação (4) O desequilíbrio de ligação em pares foi ao quadrado (r

2) 0,8. Este trabalho foi realizado usando Haploview versão 4.2 [21].

Foram 3 tagger SNPs para

TMEM205

, média r2 de 0,988, 4 tagger SNPs para

LRP

, significa r2 de 1,000, 7 tagger SNPs para

AQP2

, média r2 de 0,997, 6 tagger SNPs para

AQP9

, média r2 de 0,964, 6 tagger SNPs para

OCT2

, média r2 de 1,000.

extração de DNA e genotipagem procedimento

Cerca de 5 ml de sangue venoso foram coletadas de cada paciente para estudos genéticos. O ADN genómico foi extraído de sangue periférico inteiro utilizando o DNeasy Blood Kit de tecido (Qiagen, Xangai, China) ou Genomic DNA Purification Kit (Promega, EUA) de acordo com os protocolos convencionais.

Poymorphisms foram detectados usando matriz Sequenom Massa Genótipo Plataforma (Sequenom, San Diego, Califórnia, EUA) . Os iniciadores foram concebidos usando AssayDesigner software 3.1. As sequências dos iniciadores são apresentados na tabela S1. Procedimentos de genotipagem são os seguintes cinco passos principais: (1) reacção em cadeia da polimerase (PCR); Os componentes e reagentes foram como se segue: 1,8 ul de HPLC grau água, 0,5 mL de 10 x tampão de PCR com MgCl 2 15 mM, 0,4 ul de MgCl2 25 mM, 0,1 uL de mistura de dNTP 25 mM, 0,2 uL de mistura de iniciadores de 0,5 mM, 0,2 uL de 5 U /uL HotStar Taq e 1 ul de 10 ng /mL de ADN num volume final de 5 mL. PCR foi executado a 94 ° C durante 15 minutos, 45 ciclos de ciclagem térmica (94 ° C durante 20 segundos, 56 ° C durante 30 segundos e 72 ° C durante 1 minuto), extensão a 72 ° C durante 3 min. (2) Tratamento de SAP; Os componentes e reagentes foram como se segue: 1,53 mL água nanopura, 0,17 mL de buffer SAP, 0,3 uL enzima SAP (1,7 U /uL) num volume final de 2 mL. As condições foram de 37 ° C durante 40 minutos, 85 ° C durante 5 minutos. (3) reacção de extensão; Componentes e reagentes foram as seguintes: 0,619 mL Nanopure água, 0,2 mL Iplex Tampão Além disso, 0,2 mL Iplex mix Rescisão, 0,94 mL Iplex Estender Primer Mix, 0,041 mL Iplex Enzyme, reagente SAP 2 mL e 5 mL PCR reagente em um volume final de 9 mL. As condições foram de 94 ° C durante 30 segundos, 94 ° C durante 5 segundos, 40 ciclos de 52 ° C durante 5 segundos, 5 ciclos de 80 ° C durante 5 segundos, e 72 ° C durante 3 minutos. (4) Troca Iônica Clean-up; (5) A análise do fragmento; . Chamadas polimorfismos foram analisados ​​usando o software Spectro Typer 4.0 de Sequenom

A análise estatística

Todos os SNPs obedeceu Hardy – Weinberg (HWE) usando o teste do qui – quadrado. A associação de genótipos e resposta à quimioterapia foram testados com regressão logística análise.O co-variáveis ​​potenciais sobre a resposta à quimioterapia foram selecionados por meio de regressão logística binária. Idade, sexo, tabagismo, PS e tipo histológico foram consideradas como co-variáveis. Toda a análise acima foram realizados por Plink (versão 1.07, https://pngu.mgh.harvard.edu/purcell/plink/) e /ou SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, Illinois, EUA). odds ratio (OR) e intervalos de confiança de 95% (IC) foram usadas para avaliar a resposta à quimioterapia. P 0,05 foi considerado como significativo. A figura foi realizada utilizando StataSE versão 12 (StataCorp, College Station, TX, EUA). Todos os dados podem ser fornecidos para quem quer via email.

Resultados

Um total de 338 pacientes foram estudados. As características clínicas básicas destes pacientes foram apresentados na Tabela 2. Os respondedores (CR + PR) foram 154 e não-respondedores foram 184, com a idade média de 55,6 ± 8,9 anos (variação 36-77 anos) e 55,3 ± 8,8 anos ( variam 31-76 anos), respectivamente. Não houve diferenças significativas entre respondedores e não-respondedores em sexo, idade e tabagismo indicou que as populações foram devidamente correspondida. Os não-pequenas doentes com carcinoma do pulmão de células eram mais propensos a ser não-respondedores do que os respondedores (79,9 vs 57,8%, p 0,0001). A proporção de ECOG 0-1 foi menor em respondedores do que os não-respondedores (96,8 vs 99,5%, P = 0,047).

análise de covariáveis ​​mostrou que histologia e ECOG pode ser fatores de risco estatisticamente significativos sobre a platina eficácia da quimioterapia baseada em toda a população, do sexo feminino e doentes com NSCLC. Histologia foi um fator estatisticamente significante para o sexo masculino, não-fumantes e pacientes fumantes. Histologia, sexo e tabagismo ou não pode ser fatores estatisticamente significantes para as patentes acima de 55 anos. Todas as co-variáveis ​​possíveis foram ajustados antes da análise de dados. Todos os 26 polimorfismos que provavelmente foram associados com eficácia a quimioterapia à base de platina foram detectados e analisados. A informação de base dos 26 SNPs foram apresentados na Tabela 1. No entanto, para fazer a tabela não muito complicar, apenas os dados mais significativos 5 SNPs ‘foram listados na versão publicada. Os demais resultados foram listados na Tabela S2. Analisou-se a associação em modelos genotípicas, dominantes e recessivos, respectivamente. O rs195854 (OR = 0,60, 95% CI, 0,36-1,00, P = 0,049) do

OCT2

pode estar associado a eficácia da quimioterapia no modelo genotípica, rs896412 de

TMEM205

significado apresentado em genotípica (OR = 0,29, 95% CI, 0.10-0.81, P = 0,019) e recessiva (OR = 0,082, IC 95%, ,010-,66, P = 0,019) modelos. Não pode haver nenhum polimorfismos associados significativamente com a eficácia da quimioterapia no modelo dominante.

Não-pequenas células e cancro do pulmão de pequenas células eram muito diferentes biologicamente. Fumantes e não-fumantes, jovens e idosos, homens e mulheres também podem ser diferentes em resposta à quimioterapia. Para investigar ainda mais a relação destas SNPs com resposta de quimioterapia nestes diferentes categorias, foi realizada a análise de estratificação. Os resultados dos cinco SNPs foram mostrados na Figura 1. Os outros foram listados na Tabela S3. Os resultados mostraram que

OCT2

rs1869641 em genotípica e modelos dominantes para assuntos de fumo e no modelo dominante para a idade ≤ 55 populações provavelmente foi significativamente associada com a eficácia da quimioterapia.

OCT2

rs195854 em modelo genotípica para fumar e subgrupo do sexo masculino, bem como no modelo recessivo para o subgrupo tabagismo pode estar associado a resposta à quimioterapia. O rs7314734 de

AQP2

só mostrou associação significativa com a resposta à quimioterapia para não-fumantes em modelo dominante. O rs1516400 de

AQP9

pode ser significativamente associados com quimioterapia para pacientes com NSCLC em genotípica e modelos recessivos. O rs896412 de

TMEM205

mostrou associação significativa para o subgrupo de idade . 55 em modelo genotípica, o subgrupo masculino em genotípica e modelos recessivos

Cada caixa ea linha horizontal representa o OR e IC95% . NSCLC: carcinoma pulmonar de células não pequenas, CPPC: carcinoma do pulmão de células pequenas. * P . 0,05

Neste estudo, o número de variáveis ​​independentes para

OCT2, LRP, AQP2, AQP9

e

TMEM205 Quais são 6, 4, 7, 6 e 3, respectivamente. Cada SNP foram analisados ​​em três modelos genéticos. Para ter em conta o problema de testes múltiplos, o limiar de significado é, portanto, de 0,05 /3 (6 + 4 + 7 + 6 + 3) = 0,0006. Usando esse limite, ninguém associação permaneceu significativa.

Discussão

Neste estudo, nós investigamos a associação de 5 genes transportadores (

OCT2, AQP2, AQP9, MVP Comprar e

TMEM205

) SNPs com resposta à quimioterapia à base de platina. Nossos resultados mostraram que rs195854 SNPs (

OCT2

) e rs186941 (

OCT2

), rs7314734 (

AQP2

), rs1516400 (

AQP9

) e rs896412 (

TMEM205

) pode estar relacionado com a resposta à quimioterapia em pacientes com câncer de pulmão.

OCT2

foi expressa principalmente na membrana basolateral, que foi o principal sítio de induzida pela cisplatina toxicidade renal [7], [22], [23]. Estudos sugeriram que estavelmente transfectadas

OCT2

em linhas de células, a acumulação intracelular de platina e a formação de aductos de Pt-ADN foram significativamente aumentada [24]. Estes estudos sugerem que

OCT2

pode ser um transportador chave para cisplatina e regulador na eliminação renal da cisplatina. Com base no presente estudo, os rs195854 SNPs e rs186941 de

OCT2 Quais são ambos mostraram associação com a quimioterapia no subgrupo de fumar e /ou em populações masculinas. Este resultado sugeriu que o

OCT2

polimorfismos do gene pode desempenhar um papel crucial na eficácia da quimioterapia à base de platina. No entanto, a associação significativa foi apenas ocorreu em rs195854 no modelo genotípica em todos os pacientes. modelo genotípica é comparar o tipo selvagem homozigotos, heterozigotos e mutantes indivíduos homozigotos. No entanto, os outros dois modelos foram comparar dois genótipos e os genótipos restantes. Nós hipótese o razão possível é que a diferença pode ser maior no modelo genotípica se o número de sujeitos um genótipo é, significativamente diferentes em dois grupos. No entanto, a verdadeira razão deve ser investigada em estudos futuros. Em fumar subgrupo, rs195854 e rs1869641 ambos mostraram mais resistência à quimioterapia em dois dos três modelos (Figura 1). Há possibilidade de que o tabagismo está substituindo o potencial efeito da variação genética em

OCT2

na regulação do transporte de platina. Fumar pode levar a resposta à quimioterapia pobres em muitas razões. Tal como, o fumo do cigarro pode estar relacionada com alterações favoráveis ​​no metabolismo do pulmão de muitos compostos endógenos, as actividades de muitas enzimas biotransformadoras em tecidos do pulmão e afecta as taxas de metabolismo para várias drogas [25]. E essas leves ou nunca fumadores pacientes com câncer de pulmão apresentaram maior proporção de

EGFR

mutações que estiveram ligados a

EGFR-TKI

terapia resposta [26], [27]. No futuro tratamento do cancro do pulmão, podemos distinguir temas de acordo com os seus hábitos de fumar e aplicar diferentes agentes quimioterapêuticos.

Os rs195854 SNP pode ser significativamente associada com resposta à quimioterapia para pacientes do sexo masculino em modelo genotípica e tinha a tendência recessiva modelo, embora não houve associação significativa. Este resultado foi consistente com a eliminação da droga do retardador em mulheres e que a expressão de

OCT2

foi significativamente mais baixa nas mulheres em coelhos, ratinhos, e ratos [28] – [30]. Assim, é tentador especular papel dependente de sexo por

OCT2

em resposta a quimioterapia contribui para a eliminação de diferentes cisplatina. Uma associação significativa foi também ocorreu no subgrupo de idade ≤ 55 para rs1869641. Kelly K. Filip ski et.al sugeriu que rs316019 de

OCT2

pode não ser associado com suas variáveis ​​farmacocinéticos estudados [24]. Nossos resultados mostraram que

OCT2

pode estar associado a eficácia da quimioterapia à base de platina, mas os mecanismos específicos precisam ser estudados na continuação dos trabalhos.

AQP9

não era apenas importante para a resistência arsénio em células de cancro do pulmão humanas, aumentando a absorção de arsénio [31], mas também desempenham um papel crítico no desenvolvimento da resposta quimioterapia à base de platina.

AQP9

rs1516400 pode ser significativamente associados com a resposta a quimioterapia para pacientes com NSCLC em modelos genotípicas e recessivos, mas não para doentes com CPPC. Esses resultados podem ser devidos à NSCLC e SCLC diferenciais vários pontos, por exemplo, que diferentes anormalidades genéticas moleculares: a mutação de p53 é maior em CPPC [32] e NSCLC são frequentemente sobre-expressão de COX-2 [33]. Além disso, existem diferentes na perda de controlos do ciclo celular para os dois tipos de histologia [34], [35]. O efeito diferente para

AQP9

rs1516400 em NSCLC e SCLC pode reforçar o fato de que eles têm diferentes marcadores prognósticos genéticos. Este estudos identificados que

AQP9

pode ser um potencial de biomarcadores preditivos de resposta à quimioterapia à base de platina em pacientes com NSCLC. No entanto, o mecanismo de como

AQP9

desempenhar um papel na eficácia da quimioterapia à base de platina para pacientes com câncer de pulmão exige a ser estudado no próximo trabalho.

AQP2

é o mais importante canal de água na membrana plasmática apical [6]. Verificou-se estar associada com a resistência de cisplatina e pode ser uma proteína /veículo transportador de membrana /obrigatório para esse efeito [36]. Os rs7314734 SNP de

AQP

2 apresentou mais associação com a resposta à quimioterapia no subgrupo não-fumantes e a razão pode ser explicado semelhante ao

OCT2

.

Ding-Wu Shen et .al mostrou que a expressão de

TMEM205

foi aumentada em células resistentes a cisplatina [8]. No entanto, as células uma vez que o gene foi overexpressed ficou mais resistente à cisplatina [9]. Este estudo mostrou que

TMEM205

rs896412 pode ser significativamente associada com resposta à quimioterapia em pacientes com câncer de pulmão (genotípica e modelos recessivos) (Tabela 3), o subgrupo masculino (genotípicas e recessivos modelos) e subgrupo de idade 55 (modelo genotípica) (Figura 1). Os resultados diferentes em subgrupos masculinos e femininos podem estar ligados com diferem eliminação de platina semelhante ao

OCT2

. Estudos sugerem que pacientes mais velhos ( 70 anos), especialmente aquelas que não tinham doenças coexistentes pode obter resultados similares de tratamento que os pacientes mais jovens ( 70 anos) [37] – [39]. Encontramos uma diferença estatisticamente significante entre rs1869641 de

OCT2

no subgrupo de idade ≤ 55 e rs896412 de

TMEM205

no subgrupo de idade 55. Isso foi diferente comparando com os estudos anteriores. A possível razão pode ser o diferente limite (55, 70, respectivamente), mas deve ser investigado. Pensamos que

TMEM205

pode desempenhar um papel importante no cancro do pulmão resposta à quimioterapia à base de platina e também seria um possível biomarcador para quimioterapia do câncer de pulmão.

O rs195854 e rs1869641 de

OCT2

, rs896412 de

TMEM205

, rs7314734 de

AQP

2, localizado em 5 kb a montante das regiões de genes, o possível mecanismo de regulação da expressão não eram conhecidos no momento . Nós supomos que localize na zona do intensificador e a variante pode regular a expressão. O rs1516400 localizado no neargene-5 de

AQP9

. Pode ser na área do promotor e a sua mutação pode regular a actividade do promotor de

AQP9

, e, em seguida, a expressão de

AQP9

foi alterado. No entanto, os possíveis mecanismos precisam ser estudados nos estudos posteriores.

Este estudo tem algumas limitações. Por um lado, para obter conclusões mais credíveis, devemos fazer uma validação independente para esses SNPs. Estamos tentando, assim, para ampliar o tamanho da amostra e irá validar esses SNPs no estudo futuro. No entanto, as amostras são muito difíceis de recolher e não o suficiente para outra validação população independente agora. Por outro lado, a avaliação da resposta à quimioterapia após cada dois ciclos de tratamento de quimioterapia é susceptível de obter resultados mais fiáveis. No entanto, só podemos unificar os dois ciclos de quimioterapia para estes pacientes. Muitos pacientes não receberam mais de quatro ciclos de quimioterapia por causa de muitas razões, tais como condição financeira e assim por diante.

Não houve qualquer estudo indicou se os polimorfismos desses cinco genes estavam relacionados com a quimioterapia à base de platina resposta em pacientes com cancro do pulmão antes. Este estudo foi o primeiro a investigar as suas associações com resposta à quimioterapia à base de platina. Os resultados do

TMEM205

rs896412,

OCT2

rs1869641 e rs195854,

AQP9

rs1516400 e

AQP2

rs7314734 sugeriu que esses SNPs pode estar associado a platina resposta à quimioterapia baseada. Mais estudos como esses SNPs impactar a resposta à quimioterapia à base de platina para os cânceres de pulmão deve ser garantido.

Informações de Apoio

Tabela S1.

Primers de todos os SNPs seleccionados

doi: 10.1371. /journal.pone.0091967.s001

(DOCX)

Tabela S2.

Associação dos outros polimorfismos de nucleotídeo único e resposta à quimioterapia à base de platina em todos os doentes com cancro do pulmão

doi:. 10.1371 /journal.pone.0091967.s002

(DOCX)

Tabela S3.

Estratificação análises das associações de outros polimorfismos e eficácia da quimioterapia em genotípicas, modelos dominantes, recessivos

DOI:. 10.1371 /journal.pone.0091967.s003

(DOCX)

Agradecimentos

Agradecemos a todos os recursos que apoiaram o estudo, e todos os pacientes que participaram do estudo, e Bio Miao Biotecnologia Co., Ltd. Beijing, China por sua assistência técnica, Kamila Śmieszkol corrigiu o manuscrito.