Abstract

Objetivos

O pemetrexed é um inibidor da timidilato-sintase (TS) e é eficaz no cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC). 3′-desoxi-3 ‘- [18F] fluorotimidina (

18F-FLT), um marcador de proliferação, podia potencialmente identificar tumor específico TS-inibição. O objetivo deste estudo foi investigar o efeito do TS-inibição induzida por pemetrexed em

captação de 18F-FLT 4 horas após a administração pemetrexed em pacientes com NSCLC metastático.

Métodos

Quatorze NSCLC pacientes foram submetidos

18F-FLT tomografia por emissão de positrões dinâmico (PET) scans no início do estudo e 4 horas após a primeira dose de pemetrexed. Volumes de interesse foram definidos com um 41%, 50% e 70% limiar do pixel máximo. A análise cinética e as medidas foram realizadas simplificados. Em uma, duas, quatro e seis horas após a pemetrexed, desoxiuridina plasma foi medido como um indicador sistémica de TS-inibição. a resposta do tumor medido com critérios de avaliação de resposta em tumores sólidos (RECIST), tempo de progressão (TTP) e sobrevida global (OS) foram determinados.

Resultados

Onze pacientes tiveram avaliável

18F -FLT PET na linha de base e 4 horas após pemetrexed. Dois pacientes tinham aumentado

captação de 18F-FLT de 35% e 31% após pemetrexed, enquanto que outros dois pacientes tinham diminuído a absorção de 31%. Nos restantes sete pacientes

captação de 18F-FLT não mudou para além das fronteiras teste-reteste. Em todos os pacientes desoxiuridina níveis elevados após a administração do pemetrexed, implicando induzida por pemetrexed TS-inibição.

absorção 18F-FLT na medula óssea foi aumentada significativamente 4 horas após a administração de pemetrexed. Seis semanas após o início do tratamento de 5 doentes tiveram uma resposta parcial, 4 uma doença estável e 2 doença progressiva. Median TTP foi de 4,2 meses (intervalo de 3.0-7.4 meses); OS mediana foi de 13,0 meses (intervalo de 5.1-30.8 meses). Mudanças na

captação de 18F-FLT não são indicadores de resposta do tumor, TTP ou OS.

Conclusões

Medição TS-inibição em um ajuste de 4 horas clínica após pemetrexed revelou um não-sistemática mudar em

captação de 18F-FLT dentro do tumor. Não houve associação significativa com a resposta do tumor, TTP ou OS

Citation:. Frings V, van der Velde AAM, Boellaard R, Herder GJM, Giovannetti E, Honeywell R, et al. (2013) pemetrexed Induced A timidilato sintase A inibição em células não pequenas do pulmão pacientes com câncer: um estudo piloto com 3′-desoxi-3 ‘- [

18F] fluorotimidina Positron Emission Tomography. PLoS ONE 8 (5): e63705. doi: 10.1371 /journal.pone.0063705

editor: Xiaoyuan Chen, NIH, Estados Unidos da América

Recebido: 04 de janeiro de 2013; Aceito: 05 de abril de 2013; Publicado em: 24 de maio de 2013

Direitos de autor: © 2013 Frings et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Os autores reconhecer o quantitativo por imagem em Câncer: Ligação processos celulares com projeto Therapy (projeto QuIC-conceito) da iniciativa sobre medicamentos inovadores (IMI) para, em parte, o financiamento do projecto. Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC) apresenta frequentemente em um estágio avançado. Infelizmente, as opções de tratamento são limitadas nesta fase, incluindo quimioterapia com ou sem radioterapia [1] e terapias específicas [2]. Portanto, apesar de novas drogas e terapia personalizada, o tratamento de NSCLC metastático continua a ser um desafio.

O pemetrexed, uma droga anti-cancro com uma eficácia clínica em NSCLC não-escamosas, inibe a timidilato sintase (TS) [3], di-hidrofolato redutase (DHFR ), e glicinamida ribonucleótido formiltransferase (GARFT) [4]. É usado como tratamento de primeira linha em combinação com a cisplatina ou carboplatina e como monoterapia no tratamento de segunda linha em NSCLC metastático. Na literatura, as taxas de resposta de pemetrexed variar entre 10-30% [5]. Nível de expressão TS mostrou uma correlação inversa com sensibilidade pemetrexed [6]. O pemetrexed tem vários efeitos colaterais, tais como náuseas, anemia, depressão da medula óssea, estomatite, faringite e exantema [7], [8], o que pode ser grave. Toxicidades poderia ser reduzido em não responder pacientes se a efetividade seria previsível, de preferência em um estágio inicial, por exemplo, a partir de tomografia por emissão de positrões (PET) medições

3′-desoxi-3 ‘-. [

18F] fluorotimidina (

18F-FLT) PET poderia funcionar como biomarcador não invasivo da TS-inibição efectuada por pemetrexed. TS é uma enzima chave para a síntese de ácido desoxirribonucleico (ADN) e como tal, um alvo para fármacos anti-cancerígenos. A Figura 1 visualiza a via celular de timidina, que consiste em o de novo e a via de recuperação. TS é a enzima essencial na via de novo de nucleótidos de timidina. Quando a via de novo é regulada negativamente por um inibidor da TS (pemetrexed), a síntese de ADN dependerá da via de salvamento, que será acima regulada, facilitada pela redistribuição do transportador nucleósido equilibrative (ENT) para a membrana celular [9]. A Figura 1 indica a interacção de pemetrexed, que é a inibição de TS.

18F-FLT segue a via de salvamento de timidina endógena, que também fornece nucleotídeos timidina. No entanto, ao contrário de timidina endógena,

18F-FLT está preso no citoplasma e não é incorporada no DNA. A absorção de

18F-FLT irá aumentar como resultado do regulamento-se da via de salvamento, quando TS é efetivamente inibida. Além disso, a inibição da timidilato sintase vai levar a acumulação de desoxiuridina monofosfato que serão discriminados ao desoxiuridina e liberado para o compartimento e plasma extracelular. Um aumento de desoxiuridina no plasma após o tratamento a inibição de TS pode ser considerado como um marcador substituto sistémica de TS-inibição.

18F-FLT PET poderia monitorar tumor mudanças específicas de

captação de 18F-FLT após TS-inibindo tratamento [9].

18F-FLT não é incorporada no ADN, como mostra a seta pontilhada. Abreviaturas: ENT, Equilibrative nucleosídeos Transporter; TMP, Timidina Monofosfato; TDP, Timidina Difosfato; TTP, timidina Triphospate; DNT, deoxyribonucleotidase.

O primeiro estudo clínico de imagem induzida por drogas TS-inibição mostrou um [11C] aumentou timidina absorção de uma hora após nolatrexed (TS-inibidor) administração em pacientes com câncer gastrointestinal [10] . Um modelo de rato (fibrosarcoma) mostrou que

18F-FLT PET permite a medição inicial do TS-inibição causada por 5-fluorouracil, com um aumento de 1,8 vezes de

captação de 18F-FLT 1-2 horas após o tratamento [11] . Este aumento coincidiu com um aumento de duas vezes na acumulação desoxiuridina no plasma. Assim,

18F-FLT PET parece adequado para avaliação não invasiva da TS-inibição em tumores.

Desde

portos de sinal 18F-FLT informação combinada de proliferação e TS-inibição, calendário adequado das PET após a administração de pemetrexed é importante: se for aplicado demasiado tarde, o sinal de proliferação pode dominar (um declínio em caso de resposta), ao passo que o real TS-inibição pode ser mais proeminente dentro das primeiras 24 horas. Pré-clínica de dados

18F-FLT PET foi derivado de duas horas após a intervenção. os dados anteriores [12] sugeriu que este tempo-calendário pode ser estendido em pacientes já que o acúmulo desoxiuridina está presente até seis horas, portanto, um PET scan após 4 horas foi escolhido como o intervalo de tempo ideal.

A objetivo do presente estudo foi investigar o efeito do TS-inibição induzida por pemetrexed em

18F-FLT absorção de 4 horas após a administração de pemetrexed em pacientes com NSCLC metastático.

Materiais e Métodos

Os pacientes

Catorze pacientes com NSCLC histológico confirmou adenocarcinoma foram incluídos prospectivamente. Os pacientes foram recrutados no Centro Médico da Universidade VU de Amsterdã, Holanda. Os pacientes tinham de ser ≥18 anos de idade, prevista para o tratamento com pemetrexed e tinha um tumor de ≥ 3 cm de diâmetro dentro do peito. Antes da participação no estudo, todos os pacientes assinaram um consentimento informado específico do protocolo. Os pacientes foram classificados de acordo com o 7

th sistema de classificação TNM desenvolvido pela Associação Internacional para o Estudo do Câncer de Pulmão [13] e o status desempenho Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) [14] foram determinados. Os pacientes foram submetidos

varrimento 18F-FLT PET dentro de uma semana antes do início do tratamento com pemetrexed e 4 horas após a primeira dose de pemetrexed terapêutico, que consistia em 500 mg · m

-2.

scans 18F-FLT PET e medições de desoxiuridina foram realizados após pemetrexed como agente único. A terapia de combinação com cisplatina (75 mg · m

-2) ou carboplatina (AUC 5) foi dado um dia depois para evitar interferência com

captação de 18F-FLT. esquema de tratamento foi de acordo com a prática padrão, que é a cada 3 semanas. O estudo foi aprovado pelo comitê de ética revisão médica do Centro Médico da Universidade VU.

PET Imagiologia

PET scans foram realizadas utilizando um HR ECAT EXACT + digitalizador (Siemens /CTI), que consiste em 32 anéis de detectores de bismuto oxyorthosilicate germanate (BGO) [15]. Este scanner permite a aquisição de 63 aviões de dados através de um campo axial 15,5 centímetros de vista. Foram introduzidos dois cânula venosa:. Foi utilizado um marcador para injecção e o outro para a amostragem de sangue

Primeiro, uma varredura de transmissão de 10 minutos foi realizada utilizando três fontes de linha rotativo retráctil. Estes dados foram utilizados para corrigir os exames de emissões subsequentes para atenuação de fótons. Após a verificação de transmissão, uma dose alvo de 250 MBq

18F-FLT foi injectado por via intravenosa, 30 segundos depois de começar uma varredura de emissão dinâmica em 3D de ajuste com um tempo de varrimento total de 60,5 minutos, e com os seguintes comprimentos de quadro: 6 × 5 s, 6 × 10 s, 3 × 20 s, 5 × 30 s, 5 × 60 s, 8 × 150 s, e 6 × 300 s. Todas as leituras de emissões foram reconstituídas usando filtrada de volta projecção (FBP) com um filtro Hanning 0,5, resultando numa resolução espacial de transaxial ~ 7 mm no centro do campo de visão.

As amostras venosas foram desenhados a 5, 10, 20, 30, 40 e 60 minutos após

injeção de 18F-FLT. sangue total e atividade de plasma foi medida imediatamente, assim como fracções de metabolitos no plasma.

PET Data Analysis

A lesão primária foi identificado em todos os pacientes. Volume de interesse (VOI) foram definidos usando uma técnica de limiar semiautomática nas somados últimos 3 quadros, que foram reconstruídas usando subconjunto reconstrução expectativa de maximização encomendado com 2 iterações e 16 subconjuntos e 5 mm largura à meia altura (FWHM) suavização de Gauss. Voi limiares de 41% e 70% do pixel máximo corrigidos para o fundo, e 50% corrigido e não foram corrigidos para o fundo foram analisadas, em conjunto com o pixel máximo na ISV. VOIs tumor foram transferidos para FBP reconstruído dinâmica

imagens 18F-FLT para gerar curvas de tempo-actividade (TAC).

uma função de entrada derivado de imagem (IDIF) foi obtida desenhando manualmente regiões 2-dimensionais de interesse sobre o arco aórtico, ascendens aorta e da aorta descendens em FBP a reconstrução da imagem, estes foram, em seguida, aplicada a todos os quadros para gerar um IDIF. Os IDIFs foram corrigidos para as frações de relação de pais e plasma-a-sangue para obter funções de entrada plasma de metabolitos corrigido.

Para cada VOI, vários (semi) métodos quantitativos foram calculados utilizando Matlab (Natick, MA). valores de absorção padronizados (SUV) foram calculadas para o intervalo de 40-60 minutos e 50-60 minutos, normalizados para o peso corporal, massa magra e área de superfície corporal. proliferação total da lesão (TLP) foi calculada como o volume metabólica * SUV. análise cinética completa com regressão não linear (NLR), utilizando modelos de dois compartimentos teciduais irreversíveis e reversíveis com 3 e 4 parâmetros, respectivamente, foram incluídos, juntamente com a fração de volume de sangue. análise Patlak [16], assumindo um modelo irreversível e resultando em taxa de absorção líquida K

I, com os intervalos de tempo 10-60 minutos, 10-45 minutos, 10-30 minutos, 20-60 minutos e 30-60 minutos foram avaliados. O volume de distribuição foi calculado como K

1 /k

2 * (1 + K

3 /k

4), com os parâmetros derivados a partir NLR com 4 das constantes cinéticas.

Além disso, significativo SUV corrigido para o peso corporal foram calculados para o músculo, fígado, medula óssea e tecido pulmonar, como referência tecido não tumoral. Estes VOI foram colocados manualmente sobre o tecido designado de forma padronizada (músculo 3 × 3 voxels em 5 aviões, fígado 7 × 7 voxels em 5 aviões, medula óssea 2 × 2 voxels em 5 aviões, pulmão 3 × 3 voxels em 5 aviões ).

medidas desoxiuridina em amostras

Plasma Plasma Compra de desoxiuridina foram tomadas, pelo menos, uma semana e um minuto antes da primeira dose de pemetrexed, funcionando como medições duplas de linha de base. Subsequentemente, amostras foram tomadas um, dois, quatro e seis horas após pemetrexed para determinar a concentração no plasma ao longo do tempo desoxiuridina. Desoxiuridina (ng /ml) foi medida com uma cromatografia líquida validado com detecção por espectrometria de massa em tandem de ensaio (LC-MS /MS), tal como descrito anteriormente [17], [18].

A imuno-histoquímica

o procedimento para imuno-histoquímica (IHQ) para a expressão TS foi ligeiramente modificado a partir de Van Triest [19]. Thymilydate sintase rato monoclonal de ratinho do clone TS106, DAKO, 1/100, durante 1 h à temperatura ambiente. foi usada PowerVision sistema de detecção. expressão TS foi marcado quantitativamente com o H-score no núcleo e citoplasma. H-score foi pontuado como Σ (

I

PC ×), onde

I

representa a intensidade da coloração e PC a percentagem de células que mancha em cada intensidade. O H-score mediana dos pacientes incluídos foi utilizado como valor de corte para baixa e alta classificação expressão TS.

TS e polimorfismo Metilenotetraidrofolato redutase (MTHFR)

TS e MTHFR estão prognóstico fatores em NSCLC [20]. leucócitos isolados a partir da primeira amostra de sangue foram utilizadas para determinar TS e polimorfismo de MTHFR com PCR quantitativo em tempo real [21]. Definimos 2R2R, 2R3R e polimorfismo 3R3R por TS e 677C, 677T e C677T para MTHFR.

Resultados Clínicos

A resposta do tumor foi avaliada após seis semanas na tomografia computadorizada (TC) de acordo com a avaliação da resposta critérios nos tumores sólidos (RECIST) [22]. Além disso, o tempo de progressão (TTP) e sobrevivência global (OS) foram definidos como o início do tratamento com pemetrexed até que a primeira observação da progressão do tumor e o dia da morte, respectivamente.

Análise estatística

o desfecho primário foi a diferença absoluta e relativa de

captação de 18F-FLT medida com SUV e análise cinética total de 4 horas após a primeira dose de limites de teste-reteste pemetrexedo além anteriormente estabelecidas [23]. As diferenças de

captação de 18F-FLT foram correlacionados com o resultado clínico medida como resposta do tumor, TTP e OS. As variáveis ​​foram testadas quanto à normalidade de decidir por paramétrica ou estatística não paramétrica e um valor de p 0,05 foi considerado significativo. A análise estatística consistiu em teste t pareado, Wilcoxon Signed Rank Test e teste de Kruskal-Wallis. O valor médio para TTP e OS foi calculado com Kaplan Meier. Todas as análises estatísticas foram realizadas utilizando SPSS 15.0.

Resultados

Os pacientes

Catorze pacientes com NSCLC com doença em estágio IV foram incluídos. pontuação desempenho foi 0-1 para todos os pacientes, a idade média era de 59 e seis pacientes eram do sexo masculino. Três pacientes eram virgens de tratamento, onze pacientes tiveram uma linha de tratamento

st e três pacientes tiveram 2

nd linha de quimioterapia antes do tratamento com pemetrexed. Nenhum dos pacientes tinha radioterapia alvo sobre as lesões de índice. Após a inscrição estudo sete dos catorze pacientes receberam pemetrexed em combinação com carboplatina, seis em combinação com cisplatina e um paciente recebeu monoterapia pemetrexed.

PET Scans

A partir do quatorze incluiu pacientes, onze pacientes eram avaliável para derivar mudanças no

18F-FLT (ver Tabela 1 para estatística descritiva). Três pacientes não foram avaliados devido a: (1) erros técnicos com o scanner PET, (2) produção insuficiente marcador, e (3) os parâmetros cinéticos não-avaliáveis ​​para o segundo

18F-FLT PET scan. dosagem

18F-FLT variou de 226-278 MBq. A partir do ISV testados, 50% corrigido para o fundo era mais adequado, porque era viável para todas menos uma lesão e foi demonstrado ser o ISV de preferência tal como descrito no trabalho anterior [24]. Além disso, as conclusões do estudo não foram afetados pelo método de VOI. Portanto, mais resultados apresentados baseiam-se no VOI 50% com correcção de fundo e normalizados para o peso corporal.

A análise cinética foi realizada para validar SUV contra medidas quantitativas completas (por exemplo, K

i obtidos utilizando regressão não linear e análise Patlak). A Tabela 2 mostra os parâmetros cinéticos médios para o modelo reversível e irreversível NLR, análise Patlak e SUV pelos scans emparelhados. O modelo de dois compartimentos de tecido com 4 parâmetros reversível foi o modelo de escolha para NLR como indicado pelos critérios de Akaike e Schwarz [25] em 7 dos 11 (64%) para os varrimentos da linha de base. Para os exames de 4 horas após a administração de pemetrexed Akaike indicados o melhor ajuste com o modelo reversível dois tecidos compartimento em 8 dos 11 (73%) e Schwarz em 7 de cada 11 (64%) scans.

i resultados apresentados neste trabalho são, portanto, com base no modelo de dois compartimentos do tecido reversível com 4 constantes cinéticas NLR K.

O volume médio de distribuição, derivada da NLR 4k foi de 4,1 ml · cm

-3 e 6,7 ml · cm

-3 para linha de base e 4 horas após a administração pemetrexed respectivamente (Wilcoxon signed-rank p = 0,60). A correlação entre SUV e K

i derivado de Patlak com diferentes intervalos de tempo foi moderada, com R-quadrado variando entre 0.7-0.8. A Figura 2 mostra a correlação entre SUV e Patlak K

i 10-60 minutos antes e depois do tratamento com pemetrexed. Não houve diferença estatística na correlação entre SUV e Patlak foi encontrado antes e depois do início do tratamento com pemetrexed. Portanto SUV poderia ser usado para medir

diferenças de captação de 18F-FLT neste cenário.

A concentração média plasmática à relação de sangue e fração de pai para linha de base e 4 horas após a administração pemetrexed são mostrados na tabela 3 . a concentração média plasmática de taxa sangue variou 1,075-1,191. Vinte por cento dos

18F-FLT é glucoronisado no fígado em sessenta minutos após

administração 18F-FLT. Não houve diferença significativa no plasma à relação de sangue ou fracção pai entre as duas varreduras.

Em dois pacientes,

captação tumoral 18F-FLT aumentou significativamente (31 e 35%) 4 horas após a terapia em comparação com os valores basais (para além das fronteiras teste-reteste de 15% [23]), enquanto outros dois pacientes mostraram uma diminuição significativa (31%). A Figura 3 mostra um exemplo de um

18F-FLT PET scan de um paciente com o aumento da

18F-FLT absorção após a administração pemetrexed. Nos restantes sete pacientes, a mudança na

absorção 18F-FLT estava dentro da variabilidade do teste-reteste (ver Figura 4). Na Tabela 4 os resultados para as duas varreduras

18F-FLT PET e os resultados clínicos são listados por paciente. O SUV médio na linha de base e 4 horas após a administração do pemetrexed foram 3,89 e 3,78 (Wilcoxon signed-rank p = 0,79). mediano do volume da ISV no início era de 11,6 ml e 10,5 ml de 4 horas após a administração de pemetrexed (p = 0,93). Median TLP foi de 38,5 e 37,8 para a linha de base e 4 horas após administração pemetrexed, respectivamente (p = 0,42). SUV no músculo, fígado, medula óssea e pulmonar média são mostrados na Figura 5. A medula óssea mostrou um aumento significativo exclusivamente de

absorção 18F-FLT de 33%, 4 horas após a administração de pemetrexed (p 0,01).

Exemplo de

captação de 18F-FLT (a) antes e (B) 4 horas após a administração de pemetrexed, mostrando um aumento de

captação de 18F-FLT no tumor primário (seta) de 32% após a administração de pemetrexed .

Mudança de

captação de 18F-FLT no SUV 40-60 min normalizado para peso corporal (a) diferença absoluta, (B) porcentagem diferença.

a média SUV normalizados para o peso corporal em músculo, fígado, medula óssea e pulmão no início do estudo e 4 horas após pemetrexed.

Resultados clínicos

depois de seis semanas, a avaliação de resposta de acordo com RECIST não revelou pacientes com resposta completa (CR), cinco pacientes com resposta parcial (PR), sete com doença estável (SD) e dois com doença progressiva (PD). Linha de base SUV não foi preditiva para a resposta do tumor (teste de Kruskal-Wallis p = 0,86). a resposta do tumor para os onze pacientes avaliáveis ​​PET revelou 5 pacientes com PR, 4 SD e 2 PD. As diferenças entre as médias por grupo de SUV resposta do tumor são apresentadas na Figura 6A. ΔSUV não estava relacionada com RECIST (teste de Kruskal-Wallis, p = 0,59). Além disso, as diferenças em Patlak K

i, NLR K

i, K3 ou volume de distribuição não foi relacionada com RECIST (teste de Kruskal-Wallis p 0,05).

40-60 min SUV normalizado para peso corporal para (a) a resposta do tumor após 6 semanas, (B) a expressão imuno-histoquímica timidilato sintase, (C) polimorfismo timidilato sintase, (D) polimorfismo metilenotetrahidrofolato redutase.

O TTP mediana foi de 4,3 meses , com uma gama de 3.0-10.4 meses para a população em estudo completo. Linha de base SUV a partir destes catorze pacientes e TTP não foram associados (regressão de Cox p = 0,54). Para os onze pacientes avaliáveis ​​PET do TTP mediana foi de 4,2 meses, com uma gama de 3.0-7.4 meses. Não houve associação significativa entre a diferença de SUV e TTP (Log rank, p = 0,96). O OS mediana foi de 9,7 meses (intervalo de 5.1-32.7 meses) para o grupo completo e 13,0 meses (intervalo de 5.1-30.8 meses) para os pacientes avaliáveis ​​PET. SUV da linha de base, nem SUV diferença foram associados com OS (regressão de Cox, log-rank p = 0,74 e 0,43, respectivamente).

Desoxiuridina

emparelhados medições desoxiuridina da linha de base no plasma mostraram um valor consistente com uma média ± desvio-padrão de 12,6 ± 7,9 e 11,5 ± 6,0 ng /ml, respectivamente (teste t pareado p = 0,995). Uma hora após a administração de níveis de desoxiuridina pemetrexedo aumentou significativamente em todos os pacientes (p 0,05) e este persistiu até seis horas após a administração do pemetrexed (ver Figura 7). Não houve diferença significativa no deoxyruridine entre um, dois, quatro e seis horas depois foi observada administração do pemetrexed

* diferenças significativas testados com o teste t pareado, p .. 0.05, indicados pelo prêmio

imunohistoquímica

IHC por TS foi realizada em 12 pacientes. Median H-score foi de 105 no núcleo e 70 no citoplasma. A Figura 8 ilustra IHC de baixa e alta expressão de TS. A média de diferenças SUV para a expressão de TS baixa e alta são mostrados na Figura 6B (Mann Withney U teste p = 0,91)

Em (A) espalhados coloração nuclear em . 50% núcleos, e (B) em torno 10% dos núcleos. Nota no (A) também concomitante coloração citoplasmática dispersos.

TS e MTHFR Polimorfismo

TS e MTHFR foram determinados por doze pacientes. Para TS os polimorfismos 2R2R, 2R3R e 3R3R foram definidos, com respectivamente cinco, três e quatro pacientes por grupo. polimorfismo MTHFR mostrou seis pacientes com 677C, três pacientes com 677T e três pacientes com C677T. As diferenças entre as médias por polimorfismo SUV são mostrados na Figura 6C-D. Não foi observada diferença significativa na SUV por TS ou polimorfismo MTHFR (teste de Kruskal-Wallis p = 0,11 e p = 0,86, respectivamente). TS ou polimorfismo MTHFR não eram prognóstico para a resposta do tumor, TTP ou OS (Chi quadrado e Kruskal-Wallis p 0,05).

Baixa ou alta expressão de TS medida com IHC correlacionada com o polimorfismo TS (Qui-quadrado p = 0,03). H-score foi significativamente maior em pacientes com 2R3R e polimorfismo 3R3R comparação com 2R2R (Jonckheere-Terpstra p = 0,04). expressão IHC TS não se correlacionou com o polimorfismo MTHFR (p Qui-quadrado = 0,44).

Discussão

O presente estudo avaliou o potencial de medir TS-inibição com

18F-FLT PET em NSCLC doentes tratados com o inibidor da TS pemetrexed. A partir de estudos pré-clínicos compreensão e biológicos, um aumento de

captação de 18F-FLT é esperado após a administração pemetrexed na resposta pacientes, se a resposta clínica é atribuído principalmente à TS-inibição. Nossos dados mostram que dois dos onze pacientes tiveram um aumento

18F-FLT absorção de 4 horas após a administração do pemetrexed além das fronteiras reteste de teste (15% para SUV) [23], [24]. Estes dois pacientes tinham PR medida com RECIST após 6 semanas. No entanto, o aumento da

captação de 18F-FLT não se correlacionou com mais TTP ou OS.

Dois pacientes mostraram uma diminuição inesperada na

captação de 18F-FLT. A explicação biológica para isso não é clara. O intervalo de tempo de 4 horas deve ser demasiado curto para mostrar o efeito da proliferação diminuída, embora pemetrexed também é conhecido para aumentar a função TS [12], [12,21], reduzindo, consequentemente, a sua inibição e possivelmente diminuir

18F absorção de FLT. A diminuição da absorção pode também ser explicada por perfusão reduzida, mas só podemos especular isso desde que nós não medir a perfusão neste estudo. K

1 nesses pacientes não foram significativamente reduzidos em relação à linha de base ou a outros pacientes do estudo.

análise cinética completa, NLR e análise Patlak, foram avaliados neste estudo. Correlação entre Patlak e SUV foi moderada, mas não se alterou entre os dois exames. Uso de NLR, Paltak ou volume de distribuição não alterar os resultados do estudo comparados com SUV.

Os dados cinéticos completas mostraram um modelo de dois compartimentos de tecido reversível com 4 constantes de velocidade, tal como determinado por Akaike e Schwarz. Na literatura um modelo irreversível para

18F-FLT até 60 minutos, foi avaliado como modelo preferido [26], [27]. Muzi et ai. relataram a influência de K

4, após 90 minutos, implicando um modelo reversível em que ponto de tempo [28]. Em nosso estudo, 7 dos 11 pacientes tiveram um melhor ajuste com um modelo de dois compartimentos do tecido reversível. Isto sugere que k

4 é diferente de zero na maioria dos pacientes em nossa população de estudo dentro de 60 minutos após a injeção.

níveis plasmáticos Desoxiuridina aumentou após a administração pemetrexed em todos os pacientes, o que implica TS- mundial inibição. Isto está de acordo com estudos anteriores sobre pemetrexed e outros inibidores de TS [29] – [31]. Como este aumento apareceu em todos os pacientes, os níveis plasmáticos de desoxiuridina não foram capazes de distinguir qual paciente tinha terapêutico TS-inibição dentro do tumor. O aumento nos níveis plasmáticos de desoxiuridina é o mais provável devido ao TS-inibição eficaz no tecido normal. Isto é suportado por [18F] absorção aumentada FLT na medula óssea 4 horas após a administração pemetrexed, indicando a inibição de TS eficaz neste intervalo de tempo. A medula óssea tem baixa expressão de TS e pemetrexed induzida TS-inibição tem sido demonstrado ser mais eficaz no tecido com baixa expressão de TS [6]. Anteriormente, foi observado num modelo animal na medula óssea, que TS foi inibida eficazmente por tratamento de 5-FU, mas a mesma dose não afectou fígado [32], [33]. Por conseguinte, a medula óssea é provável que seja altamente sensível à inibição por TS pemetrexed. Como resultado, as toxicidades hematológicas também são comuns em pacientes tratados com pemetrexed. O nosso estudo confirma TS-inibição eficaz no início da medula óssea indicado pelo aumento de [18F] absorção FLT 4 horas após a administração de pemetrexed. Este efeito específico não-tumoral de TS-inibição na medula óssea pode servir como um substituto para outros tecidos que proliferam que esclarece o aumento dos níveis de desoxiuridina em todos os pacientes.

Um estudo anterior realizado em doentes com cancro da mama (n = 6 ) revelou um aumento no

captação de 18F-FLT em todos, mas um paciente de uma hora após o tratamento com a capecitabina [34]. Sem comparação estatística com o resultado clínico foi realizado. Este estudo em pacientes com câncer de mama é o único estudo com

18F-FLT PET exames realizados no prazo de um dia após o início do tratamento. Os achados

captação de 18F-FLT diferem dos nossos resultados do estudo. No entanto, os estudos não podem ser comparados, uma vez que avaliar diferentes tipos de tumor, diferentes intervalos de tempo e tratamentos diferentes. Além disso, como um pró-fármaco 5-FU, capecitabina tem acções diferentes lado TS de inibição; sua via metabólica pode interferir com o metabolismo timidina.

Pode-se argumentar que a falta de correlação entre

18F-FLT PET e evolução clínica resultou de tempo inadequado de imagem. O intervalo de tempo durante 4 horas foi baseado em estudos anteriores com vários inibidores de TS antifolato, que mostraram um aumento óptimo entre 1-4 horas para BGC9331 mas entre 4-24 horas, para a outra antifolate BGC 945 [

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]. No entanto, o ponto de tempo óptimo de digitalização pode não ser de 4 horas após a administração de pemetrexed. Além disso, a resistência aos medicamentos adquiridos à terapia poderia afetar a relação entre, em princípio, um biomarcador de imagem farmacodinâmica eficaz e o resultado clínico máximo em tempo de progressão ea sobrevida global.

A avaliação da resposta tem limitações, como apenas um paciente recebeu monoterapia pemetrexed e os outros pacientes tiveram a terapia de combinação incluindo cisplatina ou carboplatina. Estas diferenças em terapia afectar o resultado clínico. PD após seis semanas prova a falta de efeito terapêutico de pemetrexed, mas PR pode ser atribuído à terapia de combinação com a cisplatina ou carboplatina. Além disso, os resultados clínicos pode ser influenciada pela presença de lesões fora do campo de vista da dinâmica

18F-FLT PET, que é de 15,5 cm na região torácica.

As limitações do traçador

18F-FLT deve ser considerada.

18F-FLT pode estar em concorrência com timidina endógena. Além disso, a absorção de

18F-FLT é S-fase específica e dependente da presença de ENT1 transportador e a expressão e a actividade de timidina-quinase 1. contratante et ai. [35] publicou resultados do papel de cima e para a regulação negativa do transportador ENT, o transportador mais importante de

18F-FLT para a célula. Soloviev et ai. [11] destacou o conhecimento limitado das possíveis mudanças em tumores de enzimas essenciais e transportadores envolvidos na via de recuperação de timidina após o tratamento.